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- 百奥莱博
- 北京
- QN1072-TIW
- 2025年06月29日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
密封保存
- 保质期：
九个月
- 英文名：
Bradford Protein Assay Kit
- 库存：
817
- 供应商：
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产销*(代"售")北京Bradford法蛋白浓度测定试剂盒价格，我公司是生物试剂、化学试剂专业供应商，立足北京，服务全国的高校、研究所、医院、企业科研部门，欢迎各位老师来电垂询订购。
名称：Bradford法蛋白浓度测定试剂盒
英文名：Bradford Protein Assay Kit
产地：国产|进口
规格：250T
品牌：百奥莱博
考马斯亮兰G-250染料，在酸性溶液中与蛋白质结合，使染料的最大吸收峰的位置(Imax)，由465nm变为595nm，在一定的浓度范围内，测定的吸光度值A595与蛋白质浓度成正比。Bradford法测定蛋白浓度不受绝大部分样品中的化学物质的影响，样品中巯基乙醇的浓度可高达1M，二硫苏糖醇的浓度可高达5mM，但受略高浓度的去垢剂影响，需确保SDS的浓度低于0.1%，Triton X-100低于0.1%，Tween 20, 60, 80低于0.06%。
操作说明：
一．微孔酶标仪法
1. 完全溶解蛋白标准品，取10ul，稀释至250ul ，使终浓度为0.2mg/ml。待测蛋白样品在什么溶液中，标准品也宜用什么溶液稀释。但是为了简便起见，也可以用0.9%NaCl或PBS稀释标准品。
2. 5×G250染色液使用前请颠倒3-5次混匀，取1ml 5×G250染色液，加入4ml双蒸水，混匀成1×G250染色液，此1×G250染色液可在4℃保存一周。
3. 将标准品按0,2,4,6,8,12,16,20微升分别加到96孔板中，加PBS稀释液补足到20微升。
4. 将样品作适当稀释(最好多做几个梯度，如作2倍、4倍、8倍稀释)，加20微升到96孔板的样品孔中。由于移液器在取小量时的误差，标准线前面的点可能不很准确，所以尽可能的让样品点落在标准线1/2后。
5. 各孔加入200微升稀释后的1×G250染色液，室温放置3-5分钟。
6. 用酶标仪测定A595，或560-610nm之间的其它波长的吸光度。
7. 根据标准曲线计算出样品中的蛋白浓度。
二．分光光度计法 如无酶标仪，染色反应可在离心管中进行，反应液混匀后加入比色皿中，使用分光光度计测定吸光值。步骤如下：
1. 取八支(或者更多)干净的10ml离心管，标记上号。
2. 取100ulBSA加入PBS 2.4ml稀释至终浓度为0.2mg/ml。
3. 5×G250染色液使用前请颠倒3-5次混匀，取10ml的5×G250染色液，加入40ml双蒸水，混匀成1×G250染色液，此1×G250染色液可在4℃保存一周。
储存条件：密封保存，有效期九个月。
关键词：QN1072,Bradford Protein Assay Kit,Bradford法蛋白浓度测定试剂盒
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| 编号 | 名称 |
| QN0832 | 5-硝基愈创木酚* |
| QN0669 | EDC·HCL |
| QN0418 | 羧肽酶B |
| QN0226 | N6-异戊烯基腺嘌呤(植物细胞培养级) |
| QN0515 | 胶原酶III |
| QN0494 | β-半乳糖苷酶 |
| QN1172 | 尼龙膜N+(0.45um) |
| QN1187 | 丽春红S |
| QN0820 | 无水*化* |
| QN1044 | 异丙基-β-D-硫代半乳糖苷 |
| QN0809 | 液体生物防腐剂 |
| QN0480 | 离析酶R-10 |
| QN0541 | 尿苷二磷酸葡萄糖二* |
| QN0862 | 橙花叔醇(顺反异构体混和物) |
| QN0586 | 二乙三胺五乙酸 |
| QN0159 | ONPG |
| QN0427 | 亮*酸脱*酶 |
| QN0791 | 乙酰丁香酮 |
| QN0595 | 四甲基*化铵 |
| QN0729 | 咪唑 |
| QN0460 | 胰蛋白酶(1:250) |
| QN0529 | 磷酸二脂酶抑制剂(IBMX) |
| QN0596 | 6-*基青霉烷酸 |
| QN0694 | *化亚锡(二水合物) |
| QN1178 | 两性电解质(pH6～9) |
| QN1256 | 细胞爬片抗原修复液(1X) |
| QN1058 | 20×SSC缓冲液，PH7.0 |
| QN0146 | 索拉非尼 |
| QN0863 | 菊糖 |
| QN0822 | 丁香油 |
| QN0160 | N-乙酰-D-*基葡萄糖 |
| QN0424 | 透明质酸 |
| QN0678 | 靛基质试剂 |
| QN0021 | 依克立达 |
| QN0732 | 亲和素 |
| QN0192 | D-阿拉伯糖 |
| QN0693 | *喹*(代"啉")二磷酸盐 |
| QN0284 | TG酶-大豆分离蛋白 |
| QN0079 | 青霉素G*盐 |
| QN0955 | 通用引物 ITS2 |
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文献和实验原理：这一方法基于考马斯亮蓝G-250有红蓝两种不同的形式。在一定浓度的乙醇及酸性条件下，可配成淡红色的溶液，当与蛋白质结合后，产生蓝色化合物，反应迅速而稳定。反应化合物在465－595nm处有最大的光吸收值，化合物颜色的深浅与蛋白浓度的高低成正比关系，因此可检测595nm的光吸收值的大小计算蛋白的含量。 溶液： ①Bradford储存液 100ml95％乙醇 200ml88％磷酸 350mgServaG蓝 室温下长期保持稳定。 ②Bradford
(一)实验原理双缩脲法(Biuret法)和Folin�酚试剂法(Lowry法)的明显缺点和许多限制，促使科学家们去寻找更好的蛋白质溶液测定的方法。1976年由Bradford建立的考马斯亮兰法(Bradford法)，是根据蛋白质与染料相结合的原理设计的。这种蛋白质测定法具有超过其他几种方法的突出优点，因而正在得到广泛的应用。这一方法是目前灵敏度最高的蛋白质测定法。考马斯亮兰G-250染料，在酸性溶液中与蛋白质结合，使染料的最大吸收峰的位置(lmax)，由465nm变为595nm，溶液的颜色
发光基团pNA游离出来，可通过酶标仪或分光光度计（λ=405nm 或400nm）测定其吸光值，通过测定吸光度来检测Caspase的活性。 二、自备试剂 PBS、蛋白定量试剂盒(Bradford法,选用) 三、实验操作指南 1．准备工作： A、 裂解液溶解后混匀，冰浴备用。 B、 裂解液工作液制备：每50 μL裂解液中加入0.5 μL DTT，冰浴备用。 2．样本处理： A、悬浮细胞 1） 诱导完成后的细胞，2000 rpm离心5 min，弃上清，收集细胞，PBS轻轻重悬细胞并计数
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