考马斯亮蓝染色试剂盒厂家

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名称：考马斯亮蓝染色试剂盒厂家
产地：国产|进口
规格：100+500ML
品牌：百奥莱博
编号：QN0879
英文名：Coomassie Brilliant Blue Staining Reagent(Staining Solution and Destaining Solution)
本考马斯亮蓝染色试剂盒采用了最经典的考马斯亮蓝染色和脱色方法，以考马斯亮蓝G-250为染料，可用于SDS-PAGE或非变性PAGE等蛋白电泳凝胶的常规染色和脱色，或Western转膜后PAGE胶上残余蛋白的检测。

试剂盒组分：
考马斯亮蓝染色液————————100ml
考马斯亮蓝脱色液————————500ml

使用方法：
1、电泳结束后，取凝胶放入适量考马斯亮蓝染色液中(至少5倍胶体积)，确保染色液可以充分覆盖凝胶。
2、将凝胶置于摇床上缓慢摇动，室温染色至少2小时，低丰度蛋白染色需4小时以上。
3、染色结束后移除染色液，染色液通常可重复利用2-3次，但染色效果会略有影响。
4、将凝胶浸泡于和染色液等量体积的脱色液中，摇床上脱色4-8小时，期间更换3-5次脱色液。

注意事项：
1、染色时间4小时以上效果最佳。
2、脱色可根据目的蛋白丰度和脱色效果随时终止，或延长脱色时间。
3、脱色越彻底，检测的蛋白量越低，脱色24小时一般可以检测出0.1ug蛋白量。
4、脱色后，将凝胶保存在水中，拍照或扫描保存图像。或制成干胶保存。

储存条件：室温保存，至少一年有效。

欲咨询购买考马斯亮蓝染色试剂盒厂家，请致电北京百奥莱博科技有限公司，为您提供最全面周到的产品服务，除此之外，我公司正在促销以下产品：

·苹果酸脱*酶
编号：QN0479
英文名称：Malatedehydrogenase
规格：5KU
苹果酸脱*酶是细胞溶酶体中的一种氧化还原酶。

别名：MDH
CAS号：9001-64-3
分子量：70 kDa
储存条件：2～8℃
酶活：30.4KU/ML
性状：白色悬浮液体

·二硫苏糖醇
编号：QN1112
英文名称：DTT
规格：5g|25g|100g
本品是一种还原蛋白质S-S键的试剂;生化研究用作巯基保护剂;酶的专一性抑制剂;测定酶活力。SDS-PAGE上样缓冲液的配制等。

别名：DTT
CAS号：3483-12-3
分子式：C4H10O2S2
分子量：154.25
纯度：≥97%(滴定)
性状：白色针状或白色颗粒、粉末
储存条件：2～8℃

·牛血清白蛋白 BSA(全组分)
编号：QN0334
英文名称：Albumin bovine serum
规格：5g|10g|25g|100g
本品是试剂级产品，用于遗传工程和医药研究，用作胎酶和其他蛋白质的稳定剂，蛋白质标准。

CAS号：9048-46-8
含量：≥98%
氮含量：15.5～16.5 %
PH：6.7～7.3
性状：白色至微黄色干粉或结晶
溶解性：溶于水，溶解后由澄清变为略微浑浊，颜色由浅黄色变为黄绿色，参考浓度为40 mg/mL。
储存条件：2～8℃

牛血清白蛋白，英文名称为Bovine Serum Albumin，也称Bovine albumin，或Cohn Fraction V，简称BSA。BSA有着极其广泛的实验室应用，在免疫实验中常用作封闭剂，包括ELISA、WB(Western Blot)。作为载体蛋白，将其交联于半抗原和其他弱抗原可以使它们在抗体生产中具有更强的免疫原性。在限制性内切酶消化反应中，BSA常常被用作一些酶的反应稳定剂，并且能防止它粘附到管壁和枪头上。BSA也常用于生物制药的生产过程或者作为营养物用于细胞和微生物培养。除此之外，还作为蛋白定量检测的标准品使用。我们提供的BSA产品，使用优质牛血浆，利用热休克法(Heat Shock)法制备而成。

本级别的牛血清白蛋白(BSA, Standard Grade)，可以满足大部分常规实验需求，如用作免疫封闭剂、组织细胞培养添加剂、蛋白/酶稳定剂以及蛋白定量标准品。

注意事项:
(1)用于细胞实验，溶解后，须用一次性针头滤器过滤除菌。
(2)为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。


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·EDC·HCL
编号：QN0669
英文名称：EDC•HCL
规格：25g
CAS号：25952-53-8
分子式：C8H17N3•HCl
分子量：191.70
纯度：≥99％
性状：白色结晶性粉末
溶解性：溶于水，参考浓度≤100mg/ml
熔点：110～115℃
储存条件：4℃

·罗丹明标记鬼笔环肽
编号：QN0267
英文名称：TRITC Phalloidin
规格：300T
本品为TRITC标记的鬼笔环肽，染色反应特异性强，对比性高，具有比Actin抗体更好的染色效果，适合用作F-actin的定性和定量检测。另外，经本品结合后的F-actin仍能维持actin自身具有的许多生物学特性。且本品的结合没有物种差异性，适用性广泛。

别名：罗丹明鬼笔环肽
分子式：C60H70N12O13S2
分子量：1231.4
性状：紫色粉末(冻干粉)

鬼笔环肽(Phalloidin)是一种来源于毒蕈类鬼笔鹅膏的环状七肽毒素，以高亲和力(Kd= 20 nM)选择性结合于丝状肌动蛋白F-actin，而不会与单体肌动蛋白G-actin结合，通常用来标记组织切片，细胞培养物或无细胞体系中的F-actin，从而对F-actin进行定性和定量分析。另外，鬼笔环肽衍生物也以相近的亲和力结合于大小纤维，无论是动植物来源的肌肉细胞或非肌肉细胞，按照每一个肌动蛋白亚基约与一个鬼笔环肽分子的计量比结合。且非特异性结合几乎可忽略，染色区域和非染色区域辨识度非常明显。因此，鬼笔环肽衍生物特别适合替代肌动蛋白(Actin)抗体进行相关研究。另外鬼笔环肽衍生物很小，直径约12-15Å，分子量＜2000 Daltons，未标记肌动蛋白(Actin)的许多生理特性都得以维持，比如，同肌动蛋白结合蛋白如肌球蛋白，原肌球蛋白，DNase I等仍能发生反应;鬼笔环肽标记的纤维丝仍可穿透固相肌球蛋白基质;以及甘油抽提的肌纤维标记后仍可收缩等。

鬼笔环肽(Phalloidin)的结合阻止丝状肌动蛋白(微丝)的解离，稳定微丝结构，从而破坏微丝的聚合-去聚合的动态平衡。此特性使得肌动蛋白聚合发生的临界浓度(CC)降至＜1µg/mL，因此，可用作一种聚合促进剂。此外，鬼笔环肽还可抑制F-actin的ATP水解活性。

1. 工作液准备
本品以溶于甲醇的 20µM 储存液形式提供，总量为 300µl。按照 100 nM 的工作液浓度来换算，可制备总量为 60ml 的工作液。建议收到产品后，根据单次使用量，对母液进行小量分装，-20℃避光冻存，一年稳定。开始实 验前，使用 1×PBS 缓冲液稀释储存液到需要的工作浓度。推荐工作浓度为：80~200nM。现配现用。

2. 染色步骤
1) 细胞爬片生长 24h，使其密度达到 50%汇合度。
2) 吸掉培养液，37℃预热的 1×PBS(pH 7.4)清洗细胞 2 次。
3) 使用溶于 PBS 的 4%甲醛溶液进行细胞固定，室温固定 10min。 注意：避免固定剂中含有甲醇成分，因为甲醇在固定过程中可能破坏肌动蛋白。
4) 室温条件下，用 PBS 清洗细胞 2~3 次，每次 10min。
5) 室温条件下，用丙*(代"酮")(≤-20℃)脱水或者用 0.5% Triton X-100 溶液透化处理 5min。
6) 室温条件下，用 PBS 清洗细胞 2~3 次，每次 10min。
7) 取 200µl 配制好的 TRITC 标记鬼笔环肽工作液，覆盖住盖玻片上的细胞，室温避光孵育 30min(通常情况下， 4℃~37℃孵育皆可)。 注意：为了降低背景，可于 TRITC 标记的鬼笔环肽工作液内加入 1% BSA;另外，孵育过程中为了避免溶液挥 发，可将盖玻片转移到一个密封的容器内。
8) 用 PBS 清洗盖玻片 3 次，每次 5min。
9) 使用 200µl DAPI 溶液(浓度：100 nM)对细胞核进行复染，约 30s。
10) 用 PBS 清洗盖玻片，然后倒置在已经滴有一滴 Fluoromount-GTM 水溶性封片剂的载玻片上。使用纸巾轻轻檫 掉多余封片剂，然后用指甲油永久封片。此法制备的标本玻片可置于 4℃避光保存，通常 6 个月内可继续做 F-actin 染色分析。 注意：也可以直接使用含有 DAPI 的抗荧光淬灭封片剂合并步骤 9)10)，简化步骤。
11) 荧光显微镜或者共聚焦显微镜下进行荧光观察，选择 TRITC 激发/发射滤片(Ex/Em=540/570nm)和 DAPI 激 发/发射滤片(Ex/Em=364/454nm)。


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