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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
295
- 英文名:
RNA Long-term Preservative Solution
- 保质期:
一年
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
4℃运输,-20℃保存,有效期一年。使用方法:将本产品直接用于溶解 RNA沉淀(跟使用 RNase-free 水一样),然后 放置在适当温度下保存(一般在-20℃)。保存在 RNApreserve中的RNA可以直接电泳,不影响Northern杂交。但由于RNA保存液会抑制后续酶反应,所以如果RNA要用于RT-PCR等反应,需要预先用 LiCl沉淀去除RNA保存液(将1/3倍体积的LiCl加入溶液中,4℃
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产供应北京现货RNA长效保存液促销,我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂,价格优惠,欢迎广大科研工作者垂询订购。
名称:北京现货RNA长效保存液促销
编号:BTN3100
规格:1.5mL
英文名:RNA Long-term Preservative Solution
品牌:百奥莱博
产地:北京
本品是一种能高效抑制RNase活性的新型小分子混合物,用于防止RNase对RNA的降解作用。
产品特点:
1.高效抑制 RNase,保存在 RNA保存液中的RNA可以在抵抗100 ng/mL的RNase A的降解作用达 36小时,效果比人胎盘RNase抑制蛋白和RVC更有效。
2. 耐高温,100℃保温30分钟后活性不受任何影响。
3. 抗氧化,不需要DTT。
4. 有效pH范围广。
5.产品为淡红色液体,可以-20℃保存两年。
产品组成:
| 成分 | 规格 |
| RNA保存液 | 1.5ml |
| LiCl溶液(10M) | 1.5ml |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:4℃运输,-20℃保存,有效期一年。
使用方法:
将本产品直接用于溶解 RNA沉淀(跟使用 RNase-free 水一样),然后 放置在适当温度下保存(一般在-20℃)。保存在 RNApreserve中的RNA可以直接电泳,不影响Northern杂交。但由于RNA保存液会抑制后续酶反应,所以如果RNA要用于RT-PCR等反应,需要预先用 LiCl沉淀去除RNA保存液(将1/3倍体积的LiCl加入溶液中,4℃12000~15000g离心20-30分钟,弃上清,用75%乙醇洗一次既得RNA沉淀)。
疑难解答:
Q:本产品抑制 RNase的Ki值是多少?
A:本产品是混合物,不能确定其Ki值。
Q:百奥莱博的液相RNase清除剂和RNA保存液都可以保存 RNA,都能灭活/抑制溶液中 2 ng/μL左右的RNase,它们的主要区别何在?
A:一是原理不同。前者通过共价修饰使 RNase 失活(类似于DEPC);后者通过竞争抑制保护 RNA(类似于RNase Inhibitor)。二是兼容性不同。前者与很多后续反应兼容,故 RNA可以直接使用;后者会抑制很多后续反应,需要去除后在使用 RNA。三是稳定性不同。后者比前者更稳定,更耐热。
欲咨询购买北京现货RNA长效保存液促销,请致电北京百奥莱博科技有限公司,为您提供最全面周到的产品服务,除此之外,我公司正在促销以下产品:
·Methacarn固定液
编号:BTN131291
英文名称:Methacarn Fixative Solution
规格:250mL
本产品为甲醇、*仿、乙酸等混合固定液。Methacarn固定液对核内抗原的保存效果较好,适用于某些抗原、癌基因蛋白产物检测的固定。固定时间应根据组织块大小确定,一般室温固定4-24小时。
储存条件:常温运输,4℃保存,有效期半年。
·强RIPA裂解液
编号:BTN131006
英文名称:RIPA Lysis Buffer(Strong)
规格:250mL
RIPA裂解液是一种传统的细胞组织快速裂解液。RIPA裂解液裂解得到的蛋白样品可以用于常规的Western、IP等实验。本产品裂解强度较强,对膜蛋白、胞浆蛋白、核蛋白、胞浆磷酸化蛋白和各种转录因子均有很好的效果,本产品含有各种蛋白酶和磷酸蛋白酶抑制剂,能有效防止各种蛋白酶对目的蛋白的降解。我公司各种RIPA裂解液产品特点见下表:
| 产品名称 | RIPA裂解液(强) | RIPA裂解液(中) | RIPA裂解液(弱) |
| 有效裂解成分 | 1% Triton X-100,1% deoxycholate,0.1% SDS | 1% NP-40,0.5% deoxycholate,0.1% SDS | 1% NP-40,0.25% deoxycholate |
| 裂解强度 | 强 | 中 | 温和 |
| 对膜蛋白的提取 | 很好 | 较好 | 一般 |
| 对胞浆蛋白的提取 | 很好 | 很好 | 很好 |
| 对核蛋白的提取 | 很好 | 较好 | 较好 |
| 胞浆磷酸化蛋白提取 | 很好 | 很好 | 很好 |
| 细胞核转录因子提取 | 很好 | 很好 | 很好 |
| 含蛋白酶抑制剂 | 是 | 是 | 是 |
| 含磷酸酯酶抑制剂 | 是 | 是 | 是 |
| 主要用途 | WB,IP | WB,IP | WB,IP,co-IP |
储存条件:低温运输,4℃保存,有效期一年。
使用方法:
对于培养细胞样品:
1. 融解RIPA裂解液,混匀。取适当量的裂解液,在使用前数分钟内加入PMSF,使PMSF的最终浓度为1mM。
2. 裂解细胞
2.1 对于贴壁细胞:去除培养液,用PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍(如果血清中的蛋白没有干扰,可以不洗)。按照6孔板每孔加入150-250微升裂解液的比例加入裂解液。用枪吹打数下,使裂解液和细胞充分接触。通常裂解液接触细胞1-2秒后,细胞就会被裂解。
2.2 对于悬浮细胞:离心收集细胞,用手指把细胞用力弹散。按照6孔板每孔细胞加入150-250微升裂解液的比例加入裂解液。再用手指轻弹以充分裂解细胞。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量较多,必需分装成50-100万细胞/管,然后再裂解。
3. 充分裂解后,10000-14000g离心3~5分钟,取上清,即可进行后续的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。
注意:通常6孔板每孔细胞加入150微升裂解液已经足够,但如果细胞密度非常高可以适当加大裂解液的用量到200微升或250微升。
对于组织样品:
1. 把组织剪切成细小的碎片。
2. 融解RIPA裂解液,混匀。取适当量的裂解液,在使用前数分钟内加入PMSF,使PMSF的最终浓度为1mM。
3. 按照每20毫克组织加入150-250微升裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以适当添加更多的裂解液,如果需要高浓度的蛋白样品,可以适当减少裂解液的用量。)
4. 用玻璃匀浆器匀浆,直至充分裂解。
5. 充分裂解后,10000-14000g离心3~5分钟,取上清,即可进行后续的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。
6. 如果组织样品本身非常细小,可以适当剪切后直接加入裂解液裂解,通过强烈vortex使样品裂解充分。然后同样离心取上清,用于后续实验。直接裂解的优点是比较方便,不必使用匀浆器,缺点是不如使用匀浆器那样裂解得比较充分。
注意:RIPA裂解液的裂解产物中经常会出现一小团透明胶状物,属正常现象。该透明胶状物为含有基因组DNA等的复合物。在不检测和基因组DNA结合特别紧密的蛋白的情况下,可以直接离心取上清用于后续实验;如果需要检测和基因组结合特别紧密的蛋白,则可以通过超声处理打碎打散该透明胶状物,随后离心取上清用于后续实验。如果检测一些常见的转录因子,例如NF-kappaB、p53等时,通常不必进行超声处理,就可以检测到这些转录因子。
备注:
1.为取得最佳的使用效果,尽量避免过多的反复冻融。可以适当分装后使用。
2.裂解样品的所有步骤都需在冰上或4℃进行。
3.用RIPA裂解液裂解得到的蛋白样品,建议使用BCA蛋白浓度测定试剂盒,不建议使用Bradford法测定由本裂解液裂解得到样品的蛋白浓度。
北京现货RNA长效保存液促销关键词:RNA Long-term Preservative Solution,RNA长效保存液,BTN3100
·SDS-PAGE分离胶配胶液
编号:BTN100868
英文名称:SDS-PAGE Resolving Gel Buffer
规格:250mL
本产品专门用于配制非联续SDS-PAGE胶的分离胶,其浓度为4×,配胶时即开即用,非常方便。
储存条件:常温运输、4℃保存,有效期一年。
·AMV逆转录酶
编号:BTN90502
英文名称:AMV Reverse Transcriptase
规格:200U
AMV逆转录酶分离自禽类成髓细胞瘤病毒(AMV),其方法由Houts等人的方法改进而来。分离得到的酶是分子量为157KD的αβ全酶。本酶经高度纯化,完全无核酸酶污染。本酶可用于cDNA合成,也可用于RNA和DNA的双脱氧测序。AMV逆转录酶以总RNA或polyA+ RNA为模板,具有以RNA为模板的DNA聚合酶活性,DNA为模板的DNA聚合酶活性和RNase H酶活性,最适反应温度在42-55℃,最高可达60℃,如果使用焦磷酸*,最适温度为37-41℃。按照标准使用方法可以得到长至10-12 kb cDNA。本AMV逆转录酶比普通AMV逆转录酶和MMLV逆转录酶能耐受更高的温度和合成更长的cDNA。
产品特点:
1.高灵敏度,可以1ng的总RNA进行cDNA合成。
2.反应温度可升高到60℃,可有效打开RNA二级结构,适用于二级结构复杂的RNA模板。
3.可合成长至10-12kb的cDNA。
4.可用于first strand cDNA合成、RT-PCR、RNA测序和双脱氧法DNA测序、引物延伸和DNA片段的3´-末端标记。
5.本酶具有内源性的RNase H活性,所以最好不要用于cDNA文库的构建。
产品组成:
| 成分 | 规格 |
| AMV 逆转录酶(10U/μL) | 20μl |
| 5×AMV Buffer | 200μl |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
活性定义:以poly(rA)为模板,以oligo(dT)12-18 为引物,在37℃温度下,在10分钟将1nmol的dTMP掺入入到多核苷酸中所需酶量为一个单位。
使用方法:(合成1st-strand cDNA)
1.按下表配制RT反应体系:
| 加入物 | 加入量 |
| 总RNA 或poly(A)mRNA 或专一的RNA |
500-2000ng 50-500ng 0.05pg-500ng |
| 注:RNA样品不能有基因组DNA污染。 | |
| Oligo(dT)18(0.5ug/μL) 或随机引物(0.2ug/μL) 或RNA模板专一性引物 |
1μL 1μL 15-20pmol |
| 注:随机引物于RNA模板的比例跟最后得到的cDNA的平均长度成反比 | |
| RNase-free水 | 补水到11μL |
2.70℃保温5分钟后立即冰浴。
3.严格按下表顺序加入各成分:
| 5×AMV Buffer(本产品提供) | 5μL |
| RNase Inhibitor(40U/μL,自备) | 1μL |
| 焦磷酸* 40mM(预热到42℃) | 2.5μL |
| dNTP(10mM each,自备) | 2.5μL |
| AMV逆转录酶 | 1-3μL(=10-30U) |
4.补水使反应终体积为25μL。
5.42℃保温60分钟(对Oligo dT引物或模板专一引物)或37℃保温60分钟(对随机引物)。如果不使用焦磷酸*,反应温度可以提高到42-55℃,最高可达60℃。
6.70℃保温10分钟以终止反应,放置在冰上待用。合成的cDNA可以直接作为PCR模板使用,不需要纯化。50μL Taq DNA聚合酶催化的PCR体系中最多可以使用25μL的RT产物,一般使用10μL AMV催化的RT产物即可。
北京现货RNA长效保存液促销关键词:RNA Long-term Preservative Solution,RNA长效保存液,BTN3100
SV1646 SNAP-Cell 启动试剂盒
BTN100947 环状DNA全基因组扩增试剂盒 Circular DNA Whole Genome Amplification Kit
BTN131282 多聚甲醛-磷酸缓冲固定液 Polyoxymethylene PBS
SY0097 Pax6-Luc荧光素酶报告基因质粒 Pax6 luciferase reporter plasmid
HR0368 SDS-PAGE 上样 Buffer SDS-PAGE sample Buffer
BTN100601 细胞核微量制备试剂盒 Nuclei Miniprep Kit
SV0376 FseI限制性内切酶 FseI Restriction Endonuclease
SY0458 牛饱和铁转铁蛋白 Bovine Transferrin, HOLO
KFS219 Caspase-3蛋白检测试剂盒 Caspase 3 Detection Assay(Western Blot)
RFT093 2×pfu PCR MasterMix
SV1275 Quick-Load 低分子量 DNA Ladder
BTN130950 革兰氏阴性菌DNA提取试剂盒(Southern级) Gram negative bacteria DNA extraction kit(Southern Grade)
WE0274 蛋白标准溶液BSA Protein Standard Solution(BSA)
YT546 亚磷酸脱*酶 Phosphite Dehydrogenase (Crude Enzyme)
ALH241 2×Pfu PCR MasterMix
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组织切片↓常规脱蜡、水化↓第一次溶液A孵育(去上清)↓第二次溶液A孵育(留上清)↓氯仿-异戊醇抽提↓RNA酶和蛋白酶消化↓酚抽提↓沉淀↓(却除未螺旋化DNA)↓透析溶液A2×SSC 100μg 蛋白酶K/ml 1% SDS不同类型的基因分析所要求的DNA质量长数量不同。Southern印迹杂交分析需要10~15μg大片段DNA(>20kb),因为杂交前要进行相应的限制性内切酶消化和凝胶分离不同片段长度的DNA。故DNA提取要求高,小片段DNA存在会直接影响杂交信号。与之相反,多聚酶链反应(PCR
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