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常温运输,4℃保存
一年
Animal RNA Extraction Reagent TRIzol
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北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产供应动物RNA提取试剂(TRIzol)促销,我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂,价格优惠,欢迎广大科研工作者垂询订购。
名称:动物RNA提取试剂(TRIzol)促销
品牌:百奥莱博
产地:国产|进口
英文名:Animal RNA Extraction Reagent TRIzol
规格:100mL
本试剂盒是类似于TRIzol、基于异硫*酸胍/酚/*仿提取原理的快速总RNA提取试剂,可用于从各种动物组织(包括白细胞)和部分植物材料中快速提取总RNA。
产品特点:
1. 操作简单快速,只要10分钟左右,可以全在室温下进行。
2. RNA 质量高,OD260/OD280一般在1.9左右。一般不含用RT-PCR可以检测到的基因组DNA污染。
3.适用于大部分实验材料,如培养细胞、各种动物材料和少数植物材料。植物RNA的提取最好使用植物RNA提取试剂盒。
4. 性价比高于进口TRIzol和TRI Reagent等同类产品。
储存条件:常温运输,4℃保存,有效期一年。
使用方法:
注意:下面的操作步骤是用1mL 本产品进行的微量提取的,细胞使用量一定要准确,不能超过下述用量,否则将超出本产品的裂解能力,RNA产量将急剧降低。如果样品量大,请按比例增加各成份的用量。RNA 工作环境最好用高效无毒的固相RNase清除剂(BTN3080)彻底处理。
1. 对贴壁细胞(10 平方厘米):吸尽培养液,加入1mL的本产品用枪充分吹打确保细胞全部裂解,然后将裂解液转移至干净的1.5mL塑料离心管中,进入第6 步。
2. 对悬浮细胞(五百万至一千万个):离心收集细胞,吸尽液体,加入1mL本产品,用枪充分吹打确保细胞全部裂解,然后将裂解液转移到干净的1.5mL塑料离心管中,进入第6 步。
3. 对新鲜组织(50-100mg):将新鲜组织剪切成小块,放入10mL或15mL塑料离心管中,加入1mL的本产品,用Polytron 剪切式匀浆器冰上匀浆30秒左右,将匀浆液转移至新的1.5mL塑料离心管中,进入第6步。注意:对肝、脾、胰、肾等细胞分裂十分旺盛的组织(细胞中含大量正在复制的DNA),使用量不要超过30-50mg,否则十分容易产生DNA污染。对10mg以下的组织,最好加入本公司的微量RNA 助沉剂。
4. 对RNAhold 保存的组织(50-100mg):先用纸吸去RNAhold液体后再剪切成小块,其余操作同第3 步。RNAhold处理后的组织韧性很强,匀浆时间需要适当延长。
5. 对液氮中保存的组织(50-100mg):在研钵中研磨成粉,加入1mL 本产品,用枪充分吹打确保细胞全部裂解,然后将裂解液转移到干净的1.5mL塑料离心管中,进入第6 步。
6.在装有裂解物/匀浆物的1.5mL塑料离心管中加入0.2mL自备*仿,振荡器上充分振荡混均30秒。注意:一定要把官底的溶液震荡起来,否则只是液面的振动。
7. 13000-15000g室温离心3分钟。
8. 将上清液(约0.6mL)转移到另一干净的1.5mL塑料离心管中。下层有机相(蓝色)和中间层含有DNA和蛋白质,避免触及,否则将产生蛋白质和DNA污染。为保险起见,可以留下50-100μl上清液不取。
9. 对脂类丰富的组织(如脂肪组织和脑组织),需再重复*仿抽提一到两次以让*仿充分去除脂类分子。
10.在上清液中加入等体积的异丙醇,振荡器上振荡30秒混匀。
11. 13000-15000g室温离心5分钟,离心底的侧面将形成RNA沉淀。如果组织使用量低于10mg或需要提高RNA 回收率,可以将离心时间延长到20或30分钟。
12.小心吸弃上清液,注意不要吸弃RNA沉淀。
13.在含RNA沉淀的离心管中加入1mL 75%乙醇,振荡混匀30秒。
14. 13000-15000g室温离心1分钟。
15.小心吸弃上清液,注意不要吸弃RNA沉淀。
16. 重复第13-15的洗涤步骤一次(也可以省略)。
17. 短暂快速离心,用移液枪小心吸弃残留乙醇(约50μL)。
注意不要吸弃RNA沉淀。此步十分重要,否则残留的乙醇会影响RNA的后续使用。
18.室温放1-2分钟后立即加入50-100μl RNase-free 水使RNA沉淀溶解。千万不要用真空离心法使RNA沉淀过于干燥,否则RNA 将变得十分难溶。RNA样品可以立即使用或存放于-80℃待用。
注意:由于RNase-free 水没有主动灭活残留RNase的功能,而任何方法提取的RNA 都可能有残留的RNase,所以强烈建议客户使用本公司推出的具有主动灭活残留RNase 功能的、同时跟后续RT-PCR等反应兼容的液相RNase 清除剂(BTN3091)。
附一:RNA 完整性的电泳检测(仅供参考,本产品不含相关试剂)
如果需要做Northern杂交,强烈建议用户使用甲醛变性胶进行RNA电泳,因为非变性胶不能分离所有的RNA分子(BioTechniques,28:414,2000)。如果是简单检测,可以使用TAE缓冲液或超快核酸电泳液进行常规电泳,但文献报道必须使用RNAload这样的变性上样液(BioTechniques,9:558,1990)。普通DNA上样液不含变性剂,也没经过去RNase处理,所以最好不要使用,否则RNA容易降解。
动物RNA电泳后应该在UV下呈现三条清晰的rRNA 带,28S rRNA条带的荧光强度一般比18S rRNA 条带的荧光强度强1.5-2.3倍。如果这两条rRNA 带不清晰或比例小于此范围则表示RNA 有降解(因为大的RNA 被酶降解的可能更大)。
跟动物一样,植物果实和种子的RNA一般有三条电泳带,但植物叶片的RNA 有四条或更多rRNA带,多余的RNA 来源于叶绿体。
如果电泳发现RNA样品中有DNA污染(一般是使用过多样品造成),可分别用非酶DNA 清除剂或RNase-free DNase 清除。
附二:RNA产量和纯度测定(仅供参考,本产品不含相关试剂)
用pH在7.5-8.2的TE缓冲液将5-10μL RNA稀释10-20倍后在OD260和OD260测光吸收,通过光吸收可以得出RNA浓度(1 OD260的RNA=40μg/mL),进而计算出RNA的产量(浓度×体积)和产率(RNA产量/组织用量)。RNA的产率还随组织的营养状态和组织的种类不同而不同,一般来说,代谢旺盛的组织(如肝脏和肾脏)RNA的产率高,代谢不旺盛的组织(如肌肉和脂肪组织)RNA的产率低,下面是常见动物组织的RNA产率:
肌肉,胎盘和脑组织: 1-2μg RNA/mg 组织
肝,胰和肾组织: 5-10μg RNA/mg 组织
培养细胞: 5-15μg/10E6细胞
RNA的纯度通过OD260/OD280 来确定,一般在1.8-2.1之间即算合格。但即使低于此范围,一般也不会影响RT-PCR等反应。
蛋白质污染可以通过酚/*仿抽提一次然后酒精沉淀去除,多糖污染可以用多糖清除剂去除。
想要了解更多关于动物RNA提取试剂(TRIzol)促销的价格、品牌、厂家、说明书、促销信息,请和我们联系。此外我公司还销*(代"售")下面的产品:
·鲱鱼精DNA溶液
编号:BTN130908
英文名称:Herring Sperm DNA Solution
规格:1mL
本产品是浓度为10mg/mL的、经过热变性处理的单链鲱鱼精DNA溶液可以用于Southern、Northern预杂交,还可以用于酵母化学转化和电转化。本产品即开即用,非常方便。
储存条件:低温运输和-20℃保存、有效期一年。
·DNA marker(λ-EcoT14 I)
编号:BTN90602J
英文名称:DNA ladder(λ-EcoT14 I)
规格:100μg
本产品是浓度为10mg/mL的、经过热变性处理的单链鲱鱼精DNA溶液可以用于Southern、Northern预杂交,还可以用于酵母化学转化和电转化。本产品即开即用,非常方便。
储存条件:低温运输和-20℃保存、有效期一年。
·OPD干粉
编号:BTN131115
英文名称:o-phenylenediamine dihydrochloride
规格:25g
OPD和HRP反应时生成水溶性橙黄色产物,在492nm时有最大吸收峰。
储存条件:常温运输,避光保存,有效期一年。
·PCR污染清除剂
编号:BTN140648
英文名称:DNA Contamination Scavenger
规格:250mL
微量核酸污染导致的PCR假阳性是广大实验者最头痛的问题之一。为解决此难题,本公司开发了本款PCR污染清除剂,本产品无毒、无腐蚀性,可将裸露的核酸完全降解至无法作为扩增模板的小片段,且无法恢复,从而彻底消除PCR 过程中由于各种环境污染而导致的假阳性扩增。
产品特点:
1.本产品为非酶类试剂,所有组分可生物降解、无毒无害。不含有机溶剂或者挥发性物质,不含无机酸或者碱性物质,不会对金属形成腐蚀。
2.产品中各组分协同作用,快速、非序列特异性的降解核酸污染。
3.使用简单,操作方便。喷洒或浸泡处理15分钟即可完成清除作用。
4.可广泛用于清除实验操作台、仪器、塑料和玻璃器皿、移液器、解剖刀、镊子、手套等各种实验器材表面的DNA污染。
5.与传统的PCR污染清除方法,如:稀酸处理法、紫外照射法、尿嘧啶糖苷酶(UNG)法和酶解变性等相比,本产品具有能彻底破坏DNA分子、有效清除小片段核酸等优点。
储存条件:常温运输和保存,有效期两年。
使用方法:
注意:以下操作均需要戴手套进行。本产品可重复使用5-10次,使用后建议密封保存。
工作平台的清洁:
直接将本产品喷于台面,最少15分钟后用普通吸水纸擦净,最后用吸水纸擦净,晾干。
实验仪器的清洁:
用浸有本品的纸擦拭仪器表面,再用吸水纸擦净,晾干。用本品处理金属器械的时间不能超过15分钟。
玻璃和塑料器皿的清洁:
将器皿浸泡在本产品中,静置处理最少15分钟后取出,再用蒸馏水浸泡二次以上,倒立晾干后备用。
移液枪的清洁:
根据生产厂家的使用手卸下移液枪的前端,留下接口塞和圈套后将其浸放在本产品中最少15分钟,再用蒸馏水彻底冲洗后,晾干,装回移液枪。
塑料离心管和滴头的清洁:
将反应塑料离心管和滴头充分浸泡在本产品中最少15分钟以上(最好不要有气泡),然后蒸馏水充分浸泡两次,试管或离心管可立即使用或干燥后备用。
动物RNA提取试剂(TRIzol)促销关键词:TRIzol,动物RNA提取试剂(TRIzol),Animal RNA Extraction Reagent TRIzol,BTN3070
·酵母化学感受态细胞制备试剂盒(B型)
编号:BTN81109B
英文名称:Yeast Chemical Competent Cell Preparation Kit
规格:20次
本酵母化学感受态细胞制备试剂是一种通过化学处理,高效快速制备酿酒酵母化学感受态细胞,用于长期冻存以备后续转化的产品。
产品特点:
1.一次制备,-80℃保存,多次使用,免去每次转化都要制备酿酒酵母感受态细胞。
2. 操作简单,单溶液制备,除酵母培养的时间外,整个操作只需要30分钟
3. 主要用于酿酒酵母S. cerevisiae,也适用于其他多种实验用酵母菌株,包括S. pombe、C. albicans、Pichia pastoris等。
4. 受体酵母可以不含质粒,也可用于携带有选择性质粒的酵母。
5. 对酿酒酵母,最高转化效率可达到0.2-1×105个转化子/μg质粒DNA。对其他酵母,效率稍低,范围在100-2000个转化子/μg质粒DNA。
6. 得到的感受态细胞可以用各种线性或环状酵母穿梭质粒DNA进行转化,例如YIp,YRp,YCp,YEp和YAC等。
7.可以用于酵母双杂交、定点突变(Site-Directed Mutagenesis)、基因破坏(Gene Disruption)、等位突变基因修复(Mutant Allele Recovery)等实验。
8. 本产品可以制备20 只酵母感受态细胞(需要200mL 酵母培养液),其中A型只用于制备感受态细胞,B型还带高效转化液。
储存条件:常温运输和保存,有效期一年。
产品组成:
成分 | 20T(A) | 20T(B) |
制备液A | 120ml | 120ml |
制备液B | 6ml | 6ml |
制备液C | 10ml | 10ml |
转化液A | 无 | 30ml |
转化液B | 无 | 30ml |
说明书 | 1份 | 1份 |
北京百莱博科技有限公司是RNA纯化产品的专业生产供应销*(代"售")商,恭候您的咨询选购动物RNA提取试剂(TRIzol)促销。
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