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- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20℃
- 保质期:
6个月
- 英文名:
pLenti sgRNA(MS2)_zeo
- 库存:
大量
- 供应商:
联迈生物
- 规格:
1ug
质粒名称: pLenti sgRNA(MS2)_zeo
其他名称:
质粒大小(bp): 9996
抗性: Ampicillin
质粒类型: Mammalian Expression, Lentiviral,CRISPR
是否病毒:
启动子:U6 and EF1A
稳转或瞬转:
组成型或诱导性:
表达水平:高拷贝
蛋白标签:
测序引物:
5‘端:GAG GGC CTA TTT CCCATG ATT CCT TCA TAT
GenBank号:
其他属性:
质粒图谱:
质粒序列:
>lenti sgRNA(MS2)_zeo backbone sequence 9996 bps
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文献和实验体(P65 和 HSF1 都是强激活域); modified sgRNA(sgRNA 2.0):在 gRNA 骨架上插入 MS2 发夹序列,作为 MS2 融合蛋白的对接位点。 工作时,dCas9-VP64 通过 gRNA 结合到靶基因启动子,sgRNA 上的 MS2 发夹再招募 MS2-P65-HSF1,形成多激活域协同作用,激活强度远高于单独的 dCas9-VP64。 其他可选的激活系统还有 VPR(VP64-p65-Rta 三联融合)、SunTag(串联表位招募多拷贝激活域)等,各有强弱,SAM
dCas9-VPR VP64 + p65 + Rta 三联 强 目前常用,单 gRNA 即可有效 SAM dCas9-VP64 + MS2-P65-HSF1 + 带 MS2 发夹的 modified sgRNA 强 需要特殊 gRNA 骨架和系统表达 MS2 融合蛋白 SunTag dCas9 串联表位 + 抗体融合的多拷贝 VP64 很强 构建较大,递送相对复杂 CRISPRa 的 gRNA 设计规则与敲除完全不同,这是最常见的错误来源: 靶区域是 TSS 上游约 −400 到 −
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