- ¥300 - 9000
- 佳兰
- JLE003
- 北京
- 2025年07月16日
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- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20℃
- 英文名：
Thermal stable MMLVReverse Transcriptase
- 供应商：
佳兰生物
- 保质期：
一年
- 库存：
大量
- 规格：
5000U/10000U/50000U/200000U
| 规格： | 5000U | 产品价格： | ¥300.0 |
|---|---|---|---|
| 规格： | 10000U | 产品价格： | ¥400.0 |
| 规格： | 50000U | 产品价格： | ¥2500.0 |
| 规格： | 200000U | 产品价格： | ¥9000.0 |
产品名称：耐热MMLVReverse Transcriptase (RNase H-)
产品浓度：200U/μl
贮存条件：-20℃保存，有效期一年。
产品说明：逆转录酶能以RNA或单链DNA为模板起始合成互补的DNA链。MMLV Reverse Transcriptase (RNase H-)是M-MLV逆转录酶的突变型，通过多个点突变去除了RNase H的活性中心，提高了酶的热稳定性，增强了与模板的亲和力，减少了逆转录反应中RNA的降解，使cDNA第一链的得率增加，更容易获得全长cDNA。
来源：E.coli菌株，含有突变型莫洛尼氏鼠白血病病毒（M-MLV）逆转录酶基因。
产品应用：第一链cDNA的合成；RT-PCR反应。
产品纯度：200U的本酶和1μg的16S、23S rRNA在37℃下孵育1h，电泳条带无肉眼可见的变化。
推荐的反应条件：
cDNA第一链的合成
1)在无RNase的PCR管中加入：Oligo dT12-18(1μg/μl)或特异引物（2-10pm)或随机引物(50-250ng)1μl；Total RNA (10ng-5μg)或mRNA(1-500ng)xμl；dNTP (10mM each)1μl；DEPC ddOH2(13-x)μl。
2)70℃保温10分钟后迅速冰浴2-10分钟。
3)离心数秒使反应液聚集于PCR管底部。
4)向上述反应液中加入：5×RT Buffer 4μl；RNasin (40U/μl) 1μl；轻轻吸打混匀。
5) 50℃保温2分钟（Oligo dT12-18或基因特异引物）；如果是随机引物则25℃保温10分钟。
6)加入1μl MMLV逆转录酶，混匀后50℃保温50分钟。
7)70℃保温15分钟后置冰上冷却，得到cDNA。该产物可直接用于第二链的合成或RT- PCR扩增反应，保存请置于-20℃。
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文献和实验all the credit; if you have problems with it, contact me :-) Jim Hutchins hutchins@umsmed.edu http://www.umsmed.edu/~hutchins/ References Raineri, I., Moroni, C. and Senn, H.P. (1991). Improved efficiency for single-sided PCR by creating
; if you have problems with it, contact me :-) Jim Hutchins hutchins@umsmed.edu http://www.umsmed.edu/~hutchins/ References Raineri, I., Moroni, C. and Senn, H.P. (1991). Improved efficiency for single-sided PCR
; if you have problems with it, contact me :-) Jim Hutchins hutchins@umsmed.edu http://www.umsmed.edu/~hutchins/ References Raineri, I., Moroni, C. and Senn, H.P. (1991). Improved efficiency for single-sided PCR by creating a reusable pool
