原厂链接: http://www.zenoaq.jp/english/
产品说明
STEM-CELLBANKER® GMP grade 是ZENOAQ公司针对冻存各类贵重的干细胞(胚胎干细胞 、诱导多能干细胞、间充质干细胞等)而特别配制,完全按照Good Manufacture Practice (GMP)规范进行生产和质量管理的细胞・组织冻存液。
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- 有效提高各类干细胞的复苏存活率,而不影响其染色体组形、增殖能力和分化能力。
- 不会对冻存细胞的DNA或RNA造成损伤,能用来冻存组织。
- 完全使用日/美/欧药典等最高等级原料,所含成分明确。
- 不含异源动物成分(Xeno-free)。
- 完全配方的冻存液,无需调配即可使用。可直接存放于负80度冰箱(不须程序降温),省事省力省时间。
产品应用实例:
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1. 使用STEM-CELLBANKER®对人体胚胎干细胞(hESC) 和诱导多能(iPS)干细胞进行实际冻存测试。
资料来源:瑞典卡罗林斯卡医学院附属医院妇产科临床科学部Outi Hovatta教授
测试冻存液:STEM-CELLBANKER®冻存液 vs 常规细胞冻存液(细胞培养基 + 10% DMSO + 血清代替品)
细胞存活率评估方法:Trypan Blue 和 Live/Dead assay kit试剂盒
結果: 在没有对细胞的染色体组形、增殖能力和分化能力造成影响的情况下,STEM-CELLBANKER®冻存液明显提高了HS293、HS306和ChiPSA细胞的存活率。上图显示STEM-CELLBANKER®冻存细胞的复苏存活率获得明显提高。下图显示各复苏细胞的增殖能。
*鸣谢Outi Hovatta教授和Frida Holm女士提供以上资料
2. 使用STEM-CELLBANKER®对人体间质干细胞(Human Mesenchymal Stem Cells)和血管内皮前体细胞(Endothelial Progenitor Cells)进行实际冻存测试。
筑波大学再生医疗讲座 大根田修教授提供
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MSCs |
EPCs |
STEM-CELLBANKER® |
>95% |
>90% |
细胞株:人体脐带血来源间质干细胞(MSCs)和血管内皮前体细胞(EPCs)
测试冻存液:STEM-CELLBANKER®细胞冻存液
细胞冻存方法:冻存细胞于-80度冰箱, 3日后移至-192度液氮管,冻存72 日后复苏。.
细胞存活率评估方法:Trypan Blue
测试结果:MSCs 和EPCs的存活率分别高达95% 和 90%以上。结果也显示STEM-CELLBANKER®细胞冻存液没有对干细胞的增殖和分化能力造成影响。
欲知详细内容,请参考 MSCs 或 EPCs
*鸣谢 大根田修(Ohneda Osamu)教授和长野真澄(Nagano Masumi)博士提供以上资料
3. 使用STEM-CELLBANKER®对小鼠胚胎干细胞(129SV)进行实际冻存测试。
ZENOAQ研究所 细胞工学组
细胞株:129SV (Mouse ES cell)
测试冻存液:ZENOAQ 产品(CELLBANKER® 1, 1plus, 2 和 STEM-CELLBANKER®)
4. 使用STEM-CELLBANKER®对小鼠正常肾脏组织进行冻存测试
资料来源:ZENOAQ中央研究所
STEM-CELLBANKER® → -80℃ |
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HE染色標本 |
Caspase3免疫染色標本 |
取材后立刻以福尔马林固定 |
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HE染色標本 |
Caspase3免疫染色標本 |
从小鼠取出5mm3大小的肾脏组织,投入1ml的STEM-CELLBANKER®冻存液后直接放置于负80度冰箱进行冻结。之后,对经解冻、清洗、福尔马林固定和石蜡包埋的组织块进行HE染色和Caspase3染色。组织学检查结果发现,与未经冻结的组织状态(对照)相比, STEM-CELLBANKER®冻存组织块没有受到明显的损伤,证明STEM-CELLBANKER®能够应用于冻结组织块。此外,Caspase3染色结果呈阴性反応,表示没有细胞凋亡发生。
5. 利用微阵列芯片(Microarray)对STEM-CELLBANKER®冻存细胞展开基因表达分析
从未经冻存的培养细胞和经STEM-CELLBANKER®冻存的细胞抽出total RNA,以微阵列解析进行遗传基因的平行对比分析。结果发现两组细胞的大多数基因之间的表达变化小于1.6倍。
测试细胞:小鼠肺纤维芽细胞
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参考文献
- Shimazu et al. (2015) Serum- and xeno-free cryopreservation of human umbilical cord tissue as mesenchymal stromal cell source. Cytotherapy, 2015; 17: 593 - 600.
- Nakagawa M et al. (2014) A novel efficient feeder-free culture system for the derivation of human induced pluripotent stem cells. Scientific Reports 4 Article, number:359.
- Miyamoto Y et al. (2012) Cryopreservation of Induced Pluripotent Stem Cells. Cell Medicine., Vol. 3, pp. 89-95, 2012.
- Saliem M et al. (2012) Improved cryopreservation of human hepatocytes using a new xeno free cryoprotectant solution. World J Hepatol. May 27;4(5):176-83.
- Holm et al. (2010) An effective serum- and xeno-free chemically defined freezing procedure for human embryonic and induced pluripotent stem cells. Hum Reprod. 25(5):1271-9. Epub 2010 Mar 5.
- Nakamura A et al. (2010) Human primary cultured hepatic stellate cells can be cryopreserved. Med Mol Morphol. 43:107-115.
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产品成分说明:
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限定化学成分细胞冻存液,含有DMSO、葡萄糖等各种细胞营养成分、pH调节剂等国际药典 [美、欧、日本药方局级]成分。
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储存方法
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储存于4度以下。质量保障期从产品的生产日期起算,为期3年。3个月以上没有使用CELLBANKER®冻存液的计划时,尽可能冷冻保存。为避免重复冻结-解冻过程可能导致的CELLBANKER®品质下降和性能降低,推荐将 100mL 产品分装小瓶后,再存放于 4°C以下或-20°C冰箱冻存。
质量保障承诺
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- STEM-CELLBANKER® GMP grade细胞冻存液经过严格内毒素、pH、渗透压和微生物检查,确保产品不含细菌、霉菌以及支原体。
- 使用小鼠胚胎干细胞(Mouse ES Cells)、Jurkat 和SK-007细胞验证性能测试冻存细保存活率达80%以上.
注意事项
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- CELLBANKER®系列产品只供实验室研究使用,是试剂级产品。
- 我们推荐用户在使用本产品之前,事先对所使用的细胞进行至少为期 1 周的
试验性细胞冷冻保存培养。确认性能后再进行正式冻存。
- 免责声明: 本公司将不为任何不正常使用此产品时所发生的意外负责。