- ￥750
- 盖宁生物
- 上海
- GN1285
- 2025年12月29日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
常温
- 保质期：
三年
- 英文名：
pQE-40
- 库存：
现货
- 供应商：
上海盖宁生物
| 别名: | pQE40, pQE 40 |
|---|---|
| 质粒类型: | 大肠杆菌表达载体 |
| 表达水平: | 低拷贝 |
| 启动子: | T5 |
| 克隆方法: | 多克隆位点，限制性内切酶 |
| 载体大小: | 4031 bp |
| 5' 测序引物及序列: | pQE30-F: AGCGGATAACAATTTCACACAG |
| 3' 测序引物及序列: | pQE30-R: TTCTGAGGTCATTACTGGATC |
| 载体标签: | N-His |
| 载体抗性: | Ampicillin (氨苄青霉素) |
订购信息
| 产品编号 | 产品名称 | 规格 | 价格 |
|---|---|---|---|
| 1285 | pQE-40 | 5ug质粒 |
¥1000.00 |
质粒图谱
载体描述
pQE vectors and constructs can be maintained in any E. coli strain that is ampicillin-sensitive and carries the pREP4 repressor plasmid, or harbors the lacIq gene on the F-factor episome. 配套表达菌株为M15[pREP4].
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*发表【英文论文】请标注：From Shanghai Gaining Biotechnology Co., Ltd.
蛋白为44KD，融合后应为73KD，但是没有见到表达. 综合分析会是什么原因？该蛋白国外已在pQE30载体上表达成功，应该不会是稀有密码的原因造成表达终止吧？第1号和3号克隆已测序，表达框没有移码，基因全长正确。测序结果如下，请参考： AAATCGGATCTGGTTCCGCGTGGATCCCCGGAATTCCCGGGTCGACATGATACAAGTACTGATGGCTGCTGCAAGCTTTG
组氨酸标签，pQE30系列中的三个载体的多克隆位点距离其实密码子而个相差一个碱基，pQE-9则是在多克隆位点处的设计较简单。PQE40则是带有6×组氨酸二氢叶酸还原酶标签（6×His-DHFR），对于比较难表达的蛋白以及蛋白太小容易被降解的蛋白可以利用这种标签。它可以保证蛋白的稳定性，同时不会对外源蛋白的免疫原性造成很大的影响，非常适合用于表位筛选。在C末端加入标签 在蛋白的C末端加入标签的好处是显而易见的：可以利用基因本身的ATG作为起始密码子，保证了蛋白天然的N末端，这对于一些医药用的重组
反应过夜。 3. 反应完毕后取5mL pQE-31质粒的酶切液做电泳分析，检验酶切是否完全。酶切完全，进行下一步。 4. 将酶切处理的后pQE-31和pUC18-CAT 质粒，分别上样跑琼脂糖凝胶电泳（注意加DNA分子量标准）。电泳结束后用DNA琼脂糖胶纯化试剂盒按照试剂盒说明书的方法回收DNA片段。前者回收的片段为3.5kb，后者为650bp。 5. 将回收的pQE-31载体质粒均分为两份，其中一份与酶切后回收的CAT片段混合，做连接；另一份不加CAT片段，做对照。操作如下：
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