- ￥750
- 盖宁生物
- 上海
- GN1334
- 2025年10月30日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
常温
- 保质期：
三年
- 英文名：
pGAPZ伪 C
- 库存：
现货
- 供应商：
上海盖宁生物
| 别名: | pGAPZalpha C,pGAPZ alpha C |
|---|---|
| 质粒类型: | 毕赤酵母表达载体 |
| 表达水平: | 高拷贝 |
| 启动子: | GAP |
| 克隆方法: | 多克隆位点，限制性内切酶 |
| 载体大小: | 3152 bp |
| 5' 测序引物及序列: | alpha-Factor-F: 5´-TACTATTGCCAGCATTGCTGC-3´; pGAP-F:5´-GTCCCTATTTCAATCAATTGAA-3´ |
| 3' 测序引物及序列: | 3´ AOX1:5´-GCAAATGGCATTCTGACATCC-3´ |
| 载体标签: | C-Myc, C-His |
| 载体抗性: | Zeocin (博莱霉素) |
| 备注: | 插入基因是必需包含起始密码子ATG。 |
订购信息
| 产品编号 | 产品名称 | 规格 | 价格 |
|---|---|---|---|
| 1334 | pGAPZα C | 5ug质粒 |
¥1000.00 |
质粒图谱
载体描述
甘油醛-3-磷酸脱氢酶（GAPDH）的酶在许多生物细胞中包括毕赤酵母，稳定高水平表达。 最近，GAPDH蛋白编码基因启动子（GAP）被深入研究，并在毕赤酵母中能够高水表达重组蛋白，这取决于使用的碳源（Waterham等 人，，1997）。GAP启动子（PGAP）的重组蛋白表达水平略高于AOX1启动子。 pGAPZ A，B，和C载体（2.9 KB）和pGAPZα，B，和C（3.1 KB）载体使用GAP启动子在毕赤酵母中稳定表达重组蛋白。重组蛋白表达为为带有C-末端myc抗原表位和C端His标签的融合蛋白。此外，pGAPZα 表达的融合蛋白在N-端带有酿酒酵母（Saccharomyces cerevisiae）的α-因子分泌信号肽。这两个系列的载体都提供三个不同读码框的载体，以方便克隆的带有C-端标签和/或N-末端分泌信号肽的载体 中。 这些载体是基于显性选择标记，Zeocin（博莱霉素）的筛选标记可以同时使用于毕赤酵母和大肠杆菌。
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*发表【英文论文】请标注：From Shanghai Gaining Biotechnology Co., Ltd.
加热灭活酶。通过凝胶提取试剂盒纯化消化的pET-32α（+）载体骨架和从pMD18-T载体切下的基因片段。用T4 DNA连接酶在23℃下用pET-32α（+）载体骨架连接基因片段1小时，载体末端和插入末端的比例为1：3（fmol）。将10μl连接反应与100μl感受态大肠杆菌 BL21（DE3）在冰上混合10分钟，并将混合物在42℃下孵育90秒。加入800μlLB并在37°C下孵育40分钟。涂在含有100μg/ ml氨苄青霉素的LB平板上。在37°C孵育过夜。通过菌落PCR筛选插入物的存在或制备
广义的细胞色素 c是含有血红素 c的细胞色素之总称。通常是指主要存在于高等动植物、酵母、霉菌等线粒体中的细胞色素 c，起着传递电子的作用。为分子量约 1.3万的碱性蛋白质，还原型的吸收带为 550、 520、 415毫微米，氧化型为 407毫微米。α 因此很早便被研究，并获得结晶。不仅一级结构而且立体结构也已清楚（图 1）。其结构基本上是生物界共有的。由细胞色素 c氧化酶〔细胞色素（ a＋ a3 ）复合体〕氧化。在呼吸链中从细胞色素 c开始接受电子，各种还原酶都已清楚
α-酮戊二酸脱氢酶 α-ketoglutarate dehy-drogenase
三羧酸循环中的一种酶。是一种催化α -酮戊二酸琥珀酰 CoA反应的复合酶，需要 NAD和 CoA为辅基。 EC． 1． 2． 4、 2 α -酮戊二酸 CoA NAD 琥珀酰 CoA NADH H 此外，尚有 TPP、核酸、 FAD参予反应。整个反应机制与丙酮酸脱氢酶催化的反应极为相似。分子量约 250万。 主要为 3种单位酶组成：α -酮戊二酸酶（硫辛酰胺）（ EC1． 2． 4． 2产生琥珀二氢核糖酸，分子
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