新型植物基因组DNA提取试剂盒说明书

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北京百奥莱博科技有限公司专业生产供应新型植物基因组DNA提取试剂盒说明书，产品信息：

类别：DNA纯化

英文名：NewPurify Plant Genomic DNA Extraction Kit

产品名	产品编号	包装规格
新型植物基因组DNA提取试剂盒	WE0174	50次|200次

编号：WE0174

品牌：百奥莱博

产地：国产|进口

  本试剂盒采用高效、专一结合核酸的离心吸附柱和独特的缓冲系统，适合从各种不同的植物新鲜或冻存组织中提取基因组DNA，并可最大限度地去除植物组织中的杂质。本试剂盒无需使用酚/*仿抽提，操作安全。提取的基因组DNA片段大、纯度高、质量稳定可靠，适用于PCR、荧光定量PCR、分子标记、文库构建等实验。

 

试剂盒组成：

 

组份	50次	200次
Buffer LP1	25ml	100ml
Buffer LP2	10ml	40ml
Buffer LP3(浓缩液)	21ml	84ml
Buffer GW2(浓缩液)	15ml	75ml
Buffer GE	15ml	60ml
RNase A(10 mg/ml)	300μl	1.25ml
吸附柱DM及收集管	50套	200套

 

自备试剂：无水乙醇

 

实验前准备及重要注意事项/strong>：

1、样品应避免反复冻融，否则会导致提取的DNA片段较小且提取量下降。

2、第一次使用前应按照试剂瓶标签的说明在Buffer LP3和Buffer GW2中加入无水乙醇。使用前请检查Buffer LP1和Buffer LP2是否出现结晶或者沉淀，如有结晶或者沉淀，请将Buffer LP1和Buffer LP2于56℃水浴重新溶解。

 

操作步骤：

1、取植物新鲜组织100 mg左右或干重组织约20 mg，加入液氮充分研磨。

2、将研磨后的粉末收集到离心管(自备)中，加入400μl Buffer LP1和6μl RNase A(10 mg/ml)，涡旋振荡1分钟，室温放置10分钟，使其充分裂解。

注意：

1)使用涡旋振荡或移液器吹打，充分裂解组织，组织裂解不完全会影响最终的DNA得率。

2)请勿在使用前将Buffer LP1与RNase A混合。

3、加入130μl Buffer LP2，混匀，涡旋震荡1分钟。

4、12000rpm(~～13400×g)离心5分钟，将上清移至新的离心管(自备)中。

5、加入1.5倍体积的Buffer LP3(使用前检查是否已加入无水乙醇)，充分混匀(如500μl滤液加入750μl Buffer LP3)。

注意：加入Buffer LP3后应立即混匀，可能会产生沉淀但不影响后续实验。

6、将上步所得溶液和沉淀全部加入到已装入收集管的吸附柱DM中，若一次不能加完溶液，可分多次转入。12000rpm离心1分钟，倒掉收集管中的废液，将吸附柱重新放回收集管中。

7、向吸附柱中加入500μl Buffer GW2(使用前检查是否已加入无水乙醇)，12000rpm离心1分钟，倒掉收集管中的废液，将吸附柱重新放回收集管中。

注意：如吸附膜呈现绿色，向吸附柱中加入500μl无水乙醇，12000rpm离心1分钟，倒掉收集管中的废液，将吸附柱重新放回收集管中。

8、重复步骤7.

9、12000rpm离心2分钟，倒掉收集管中的废液。将吸附柱置于室温数分钟，以彻底晾干。

注意：这一步的目的是将吸附柱中残余的乙醇去除，乙醇的残留会影响后续的酶促反应(酶切、PCR 等)。

10、将吸附柱放到一个新离心管(自备)中，向吸附膜的中间部位悬空滴加50-100μl Buffer GE或灭菌水，室温放置2-5分钟，12000rpm离心1分钟，收集DNA溶液。-20℃保存DNA。

注意：

1)如果下游实验对pH值或EDTA敏感，可以用灭菌水洗脱。洗脱液的pH值对洗脱效率有很大影响，若用水做洗脱液应保证其pH值在7.0-8.5(可以用NaOH将水的pH值调到此范围)，pH值低于7.0时洗脱效率不高。

2)离心之前室温孵育5分钟可以增加产量。

3)如果要提高DNA的终浓度，可以将步骤10所得的DNA洗脱液重新加至吸附膜上，重复步骤10；若洗脱体积小于100μl，可以增加DNA的终浓度，但可能会减少DNA的总产量。如果所得DNA的量小于1μg，推荐用50μl Buffer GE进行洗脱。

4)因为保存在水中的DNA会受到酸性水解作用的影响，如需长期保存，推荐用Buffer GE洗脱并于-20℃保存。

 

储存条件：室温(15～30℃)。

新型植物基因组DNA提取试剂盒说明书专业优质供应商：北京百奥莱博科技有限公司

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编号	类别	名称
WE0381	二抗	Cy3标记山羊抗兔IgG(H+L)
WE0103	核酸扩增(PCR)	Bes Taq DNA Polymerase
WE0301	蛋白质研究	X光暗盒(12.7cm×17.8cm)
WE0150	核酸扩增(PCR)	一步法逆转录实时荧光定量PCR试剂盒(高含量ROX校正染料)
WE0272	蛋白质研究	Ni琼脂糖凝胶
WE0390	二抗	AP标记山羊抗小鼠IgG(H+L)
WE0351	一抗	抗His标签多克隆抗体
WE0104	核酸扩增(PCR)	2×Bes Taq MasterMix(含染料)
WE0161	核酸扩增(PCR)	寡聚核苷酸Oligo(dT)15
WE0387	HRP标记抗体	HRP标记兔抗山羊IgG(H+L)
WE0389	生物素化抗体	生物素化兔抗山羊IgG(H+L)
WE0286	蛋白质研究	SDS-PAGE浓缩胶缓冲液(4×)
WE0333	一抗	HRP标记抗c-Myc标签单克隆抗体
WE0337	一抗	抗Flag标签单克隆抗体
WE0240	基因结构和功能	二代测序接头引物试剂盒(Illumina平台 Index Primer13-24)
WE0159	核酸扩增(PCR)	dNTP混合溶液(10 mM)
WE0162	DNA纯化	高纯质粒小提试剂盒
WE0127	核酸扩增(PCR)	全血Taq DNA聚合酶
WE0115	核酸扩增(PCR)	尿嘧啶DNA糖基化酶(UDG酶)
WE0309	蛋白质研究	TMB底物显色试剂盒(可溶型，20×)
WE0195	RNA纯化	miRNA提取试剂盒
WE0391	二抗	AP标记山羊抗兔IgG(H+L)
WE0306	蛋白质研究	Western Blot封闭液Ⅰ(BSA)
WE0158	核酸扩增(PCR)	miRNA荧光定量检测试剂盒
WE0400	DNA纯化	口腔拭子DNA样本保存管
WE0226	其他分子生物学试剂	人类基因组DNA

 

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