北京RIPA裂解液(强)价格厂家

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北京百奥莱博专注于生命科学和生物技术领域，致力于为客户提供包括北京RIPA裂解液(强)价格厂家在内的一系列分子生物学试剂产品，并提供一系列相关的技术服务。

名称：北京RIPA裂解液(强)价格厂家
规格：100ml
品牌：百奥莱博
产地：国产|进口
英文名：RIPA Lysis Buffer
本品是一种传统的细胞组织快速裂解液。RIPA裂解液裂解得到的蛋白样品可以用于常规的Western、IP等。RIPA的本意是Radio Immunoprecipitation Assay。RIPA裂解液的配方有很多种，根据其裂解液的强度大致可以分为强、中、弱三类。RIPA裂解液(强)的主要成分为50mMTris (pH 7.4)，150mMNaCl，1% Triton X-100，1% sodiu*(代"m") deoxycholate，0.1% SDS，以及sodiu*(代"m") orthovanadate，sodiu*(代"m") fluoride，EDTA，leupeptin等多种抑制剂。可以有效抑制蛋白降解。用RIPA裂解液裂解得到的蛋白样品，可以用BCA蛋白浓度测定试剂盒测定蛋白浓度。由于含有较高浓度的去垢剂，不能用Bradford法测定由本裂解液裂解得到样品的蛋白浓度。

使用方法：
对于培养细胞样品：
1、融解RIPA裂解液，混匀。取适当量的裂解液，在使用前数分钟内加入PMSF，使PMSF的最终浓度为1mM。
2.1、 对于贴壁细胞：去除培养液，用PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍(如果血清中的蛋白没有干扰，可以不洗)。按照6孔板每孔加入150-250微升裂解液的比例加入裂解液。用枪吹打数下，使裂解液和细胞充分接触。通常裂解液接触细胞1-2秒后，细胞就会被裂解。
2.2、对于悬浮细胞：离心收集细胞，用手指把细胞用力弹散。按照6孔板每孔细胞加入150-250微升裂解液的比例加入裂解液。再用手指轻弹以充分裂解细胞。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量较多，必需分装成50-100万细胞/管，然后再裂解。
3、充分裂解后，10000-14000g离心3-5分钟，取上清，即可进行后续的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。
裂解液用量说明：通常6孔板每孔细胞加入150微升裂解液已经足够，但如果细胞密度非常高可以适当加大裂解液的用量到200微升或250微升。

对于组织样品：
1、把组织剪切成细小的碎片。
2、融解RIPA裂解液，混匀。取适当量的裂解液，在使用前数分钟内加入PMSF，使PMSF的最终浓度为1mM。
3、按照每20毫克组织加入150-250微升裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以适当添加更多的裂解液，如果需要高浓度的蛋白样品，可以适当减少裂解液的用量。)
4、用玻璃匀浆器匀浆，直至充分裂解。
5、充分裂解后，10000-14000g离心3-5分钟，取上清，即可进行后续的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。
6、如果组织样品本身非常细小，可以适当剪切后直接加入裂解液裂解，通过强烈涡旋使样品裂解充分。然后同样离心取上清，用于后续实验。直接裂解的优点是比较方便，不必使用匀浆器，缺点是不如使用匀浆器那样裂解得比较充分。

注：RIPA裂解液的裂解产物中经常会出现一小团透明胶状物，属正常现象。该透明胶状物为含有基因组DNA等的复合物。在不检测和基因组DNA结合特别紧密的蛋白的情况下，可以直接离心取上清用于后续实验；如果需要检测和基因组结合特别紧密的蛋白，则可以通过超声处理打碎打散该透明胶状物，随后离心取上清用于后续实验。如果检测一些常见的转录因子，例如NF-kappaB、p53等时，通常不必进行超声处理，就可以检测到这些转录因子。

注意事项：
1、为取得最佳的使用效果，尽量避免过多的反复冻融。可以适当分装后使用。
2、需自备PMSF。
3、裂解样品的所有步骤都需在冰上或4℃进行。

储存条件：-20℃，有效期一年。

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ARB13112 小鼠骨胶原交联(Cr)ELISA检测服务 Mouse crosslaps,cr ELISA KIT
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北京RIPA裂解液(强)价格厂家关键词：RIPA裂解液,RFT156,RIPA裂解液(强),RIPA Lysis Buffer


·DNA Marker IV(500～7000bp)
编号：RFT021
规格：100T(2×250μl)
本产品是由6条精准定量的带状双链DNA条带组成DNA Marker，适用于琼脂糖凝胶电泳中DNA条带的定量分析。含有1×loading buffer，可根据实验需要，直接取2-5μl电泳，使用方便，电泳图像清晰。6条带大小包括500bp，1000bp，1500bp，3000bp，5000bp，8000bp，其中3000bp条带最亮，含量为100ng/5μl，其余条带浓度为50ng/5μl。



使用方法：
1. 取2-5μl本产品加入到琼脂糖凝胶的加样孔中(每1mm×1mm加样孔加1μl，如果加样孔宽于5mm，可以适当增加上样量)就行电泳。
2. 建议电泳条件：凝胶浓度为1.0％，凝胶长度5-7cm，电泳电压4-10v/cm，电泳时间30-35分钟。
3. 通过EB染色后紫外灯下观察条带。

注意事项：
1. 琼脂糖的质量对DNA的电泳有很大影响，电泳时请尽量使用质量优等的琼脂糖。
2. 请使用新鲜配制的电泳缓冲液和新鲜配制的琼脂糖凝胶进行电泳，以保证Marker良好的分离效果。

储存条件：-20℃，有效期1年。

·彩色预染超低分子量蛋白Marker(1.2～45kD)
编号：RFT043
英文名称：Rainbow pre dyeing ultra low molecular weight protein
规格：10T(50μl)
本蛋白Marker可以直接观察蛋白电泳及清晰判断Western Blotting的转膜效果。本产品包含3种多肽和3种低分子量蛋白质组成，分子量范围为1.2kD-45kD，分子量大小为 1.2kD，4.6kD，10kD，16kD，27kD，45kD (注：蛋白大小已在18%Tricine-SDS-PAGE中用非预染蛋白Marker标定过。



储存条件：-20℃。


北京RIPA裂解液(强)价格厂家关键词：RIPA裂解液,RFT156,RIPA裂解液(强),RIPA Lysis Buffer


·50bp plus DNA ladder(50～1000bp)
编号：RFT010
规格：100T(2×250μl)
本产品是由11条带状双链DNA条带组成的即用型DNA Ladder，适用于琼脂糖凝胶电泳中DNA条带的分析。含有1×loading buffer，可根据实验需要，直接取2-5μl电泳，使用方便，电泳图像清晰。11条带包括50，100，150，200，250，300，350，400， 500， 600，1000bp，其中300bp条带约为100ng/5μl，其余条带浓度大约50ng/5μl。



使用方法：
1. 取2-5μl本产品加入到琼脂糖凝胶的加样孔中(每1mm×1mm加样孔加1μl，如果加样孔宽于5mm，可以适当增加上样量)就行电泳。
2. 建议电泳条件：凝胶浓度为2.0-2.5％，凝胶长度6-7cm，电泳电压4-10v/cm，电泳时间45-50分钟。
3. 通过EB染色后紫外灯下观察条带。

注意事项：
1. 琼脂糖的质量对DNA的电泳有很大影响，电泳时请尽量使用质量优等的琼脂糖。
2. 请使用新鲜配制的电泳缓冲液和新鲜配制的琼脂糖凝胶进行电泳，以保证Marker良好的分离效果。
3. 如果凝胶中预先加入EB，电泳结束后紫外灯下观察，200bp以下条带亮度较弱，此问题可以通过凝胶后染的方法解决(即溶胶时不加EB，电泳结束后再进行EB染色)。

储存条件：-20℃，有效期1年。

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