北京DNA Marker IV(500～7000bp)厂家

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

北京DNA Marker IV(500～7000bp)厂家是高品质的核酸电泳和回收产品，由北京百奥莱博供应，用于科研实验，本产品质量好，且极具价格优势，深为用户称道，了解更多DNA Marker IV(500～7000bp)等核酸电泳和回收产品请联系我司咨询订购。

名称：北京DNA Marker IV(500～7000bp)厂家
产地：国产|进口
规格：100T(2×250μl)
编号：RFT021
本产品是由6条精准定量的带状双链DNA条带组成DNA Marker，适用于琼脂糖凝胶电泳中DNA条带的定量分析。含有1×loading buffer，可根据实验需要，直接取2-5μl电泳，使用方便，电泳图像清晰。6条带大小包括500bp，1000bp，1500bp，3000bp，5000bp，8000bp，其中3000bp条带最亮，含量为100ng/5μl，其余条带浓度为50ng/5μl。



使用方法：
1. 取2-5μl本产品加入到琼脂糖凝胶的加样孔中(每1mm×1mm加样孔加1μl，如果加样孔宽于5mm，可以适当增加上样量)就行电泳。
2. 建议电泳条件：凝胶浓度为1.0％，凝胶长度5-7cm，电泳电压4-10v/cm，电泳时间30-35分钟。
3. 通过EB染色后紫外灯下观察条带。

注意事项：
1. 琼脂糖的质量对DNA的电泳有很大影响，电泳时请尽量使用质量优等的琼脂糖。
2. 请使用新鲜配制的电泳缓冲液和新鲜配制的琼脂糖凝胶进行电泳，以保证Marker良好的分离效果。

储存条件：-20℃，有效期1年。

欲了解更多北京DNA Marker IV(500～7000bp)厂家的品牌、产地、价格及说明书等产品信息，请致电北京百奥莱博科技有限公司，我们将竭诚为您服务，另外，以下产品正在火爆促销:

·新霉素溶液(50mg/ml)
编号：RFT180
英文名称：Neomycin solution
规格：5×1ml

·即用型PMSF溶液(100mM)
编号：RFT193
英文名称：Phenylmethanesulfonyl fluoride
规格：10ml
PMSF是一种不可逆的丝*酸蛋白酶抑制剂，如胰凝乳蛋白酶、胰蛋白酶、凝血酶等，作用原理是特异性识别并磺化决定酶活性的丝*酸残基活性位点。此外，其对半胱*酸蛋白酶(如木瓜蛋白酶)和哺乳动物来源的乙酰胆碱酯酶也有抑制效果。PMSF常在细胞或组织裂解之前加入到裂解液中以预防蛋白的降解。PMSF可以单独使用，也常与其他蛋白酶抑制剂如胃抑肽酶A或者磷酸酶抑制剂如正钒酸*混合使用。

本产品配备有PMSF溶解液，可以方便配制成100mMPMSF储备液。由于PMSF不溶于水，有毒性，不稳定的缺点，另有PMSF的无毒替代物，AEBSF(货号：AE1020)，活性和功能与PMSF相同，具有毒性低，稳定，溶于水的优点。在蛋白提取中，PMSF推荐使用终浓度为0.1-1 mM，由于PMSF在水系缓冲液中极其不稳定，必须现用现加。

配制使用方法：
取一管PMSF晶体全部加入到PMSF溶解液中，彻底溶解后即配成100mMPMSF溶液。在蛋白提取缓冲液中稀释100倍使用，如500μl提取缓冲液中加入5μl。
注：PMSF溶液在水系缓冲液中极其不稳定，必须现用现加。

储存条件：-20℃，有效期6个月。


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·SDS-PAGE凝胶制备及电泳试剂盒
编号：RFT076
英文名称：SDS-PAGE gel preparation and electrophoresis Kit
规格：50次
本公司提供的SDS-PAGE蛋白电泳试剂盒包含凝胶制备以及蛋白电泳所需的全部试剂。本试剂盒可配制至少50块常规大小的PAGE胶。

试剂盒组成：

 

组份	规格	保存条件
40%PAA(29:1)	100 ml	4℃
4×Tris/SDS分离胶缓冲液 pH8.8	100 ml	4℃
4×Tris/SDS浓缩胶缓冲液 pH6.8	50 ml	4℃
APS(干粉)	0.5 g	RT
TEMED	0.5ml	4℃，避光
4×蛋白电泳上样缓冲液(含还原剂)	1 ml	-20℃
5×Tris-甘*酸电泳缓冲液(干粉)	1 L	RT

使用方法：
一、配制分离胶(各试剂使用量请参考表二)
根据目的蛋白的分子量大小选择合适的凝胶浓度(表一)，再按照下面的分离胶配方表(表二)配制SDS-PAGE的分离胶(即下层胶)。

表一：不同浓度的SDS-PAGE分离胶的最佳分离范围：

SDS-PAGE分离胶浓度	最佳分离范围
6%	50-150kD
8%	30-90kD
10%	20-80kD
12%	12-60kD
15%	10-40kD

配制分离胶前，根据以下配方准备10% APS：
10% APS配制-5 ml：将0.5 gAPS干粉溶于5 ml灭菌水中，彻底溶解后分装，1 ml/支，-20℃备存，每次取一管使用。10% APS应尽量减少室温存放时间，以防失效。10%APS在4℃有效期为一周，-20℃有效期6个月。若发现凝胶聚合时间延长，应考虑更换使用-20度保存的10%APS。

制备分离胶步骤：
1、参照凝胶模具说明书，装配好凝胶模具。
2、按照表二将不同体积的成分在小烧杯或试管中混合；加入10%APS和TEMED，轻轻搅拌使其混匀，避免产生气泡。
3、在凝胶模具中灌入适量分离胶溶液(对于mini-gel，凝胶液加至约距前玻璃板顶端1.5 cm或距梳齿约0.5 cm即可)，然后在分离胶溶液上轻轻覆盖一层1-5 cm的水层，使凝胶表面保持平整。
4、静置30-60分钟，待分离胶和水层之间出现一个清晰的界面后，说明凝胶已聚合

表二：SDS-PAGE分离胶配方表

组份	不同凝胶体积对应各组份的取样量(ml)
	5ml	10ml	15ml	20ml
8％胶
H2O	2.7	5.4	8.1	10.8
4×Tris/SDS分离胶buffer pH8.8	1.25	2.5	3.75	5
40％ PAA(29:1)	1	2	3	4
TEMED	0.005	0.01	0.015	0.02
10％ APS	0.05	0.1	0.15	0.2
10％胶
H2O	2.45	4.9	7.35	9.8
4×Tris/SDS分离胶buffer pH8.8	1.25	2.5	3.75	5
40％ PAA(29:1)	1.25	2.5	3.75	5
TEMED	0.005	0.01	0.015	0.02
10％ APS	0.05	0.1	0.15	0.2
12％胶
H2O	2.2	4.4	6.6	8.8
4×Tris/SDS分离胶buffer pH8.8	1.25	2.5	3.75	5
40％ PAA(29:1)	1.5	3	4.5	6
TEMED	0.005	0.01	0.015	0.02
10％ APS	0.05	0.1	0.15	0.2
15％胶
H2O	1.825	3.65	5.475	7.3
4×Tris/SDS分离胶buffer pH8.8	1.25	2.5	3.75	5
40％ PAA(29:1)	1.875	3.75	5.625	7.5
TEMED	0.005	0.01	0.015	0.02
10％ APS	0.05	0.1	0.15	0.2

二、浓缩胶制备：
1、去除覆盖在分离胶上的水层。
2、按照表三将不同体积成分在一个小烧杯或试管中混合；加入10%过硫*(代"酸")铵和TEMED，轻轻搅拌使其混匀，避免产生气泡。
3、将浓缩胶溶液加至分离胶的上面，直至凝胶溶液到达前玻璃板的顶端。
4、将梳子插入凝胶内，避免产生气泡。
5、静置30-60分钟，等待浓缩胶聚合。

表三：SDS-PAGE浓缩胶(4%)配方表

组份	不同凝胶体积对应各组份的取样量(ml)
	2 ml	4 ml	5 ml	10 ml
H2O	1.17	2.34	2.925	5.85
4×Tris/SDS浓缩胶buffer pH6.8	0.63	1.26	1.575	3.15
40％ PAA(29:1)	0.2	0.4	0.5	1
TEMED	0.002	0.004	0.005	0.01
10％ APS	0.02	0.04	0.05	0.1

三、电泳：

凝胶凝固好后，根据以下配方准备电泳缓冲液。
5×Tris-甘*酸电泳缓冲液的配制-1 L：将一包5×Tris-甘*酸电泳缓冲液干粉全部倒入1L烧杯中，加入约900 ml水彻底溶解，用水定容至1 L，即配成5×Tris-甘*酸电泳缓冲液(此溶液不用调节pH值)。用前再稀释5倍即配成1×Tris-甘*酸电泳缓冲液。在电泳槽的内槽内加入1×Tris-甘*酸电泳缓冲液(让电泳缓冲液漫过加样孔)，轻轻的拨出梳子，随后在电泳槽外槽加入适量的1×Tris-甘*酸电泳缓冲液。上样，电泳，一般是浓缩胶80V，分离胶120V恒压，等指示前沿*酚兰电泳到分离胶下缘后，结束电泳，染色或者进行下一步实验。


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·2.5mM dNTP溶液
编号：RFT163
英文名称：dNTP Mixture(2.5mM)
规格：0.5ml|5×0.5ml
本品为dATP、dGTP、dCTP、dTTP的等摩尔(2.5mM)混合物。dNTP纯度均达到99％以上，不含DNase和RNase，适合多种聚合酶的扩增反应。在PCR反应中，2.5mM dNTP 是50μl反应体系用4μl(终浓度为各200μM)。

储存条件：-20℃。

·10mM dNTP溶液
编号：RFT162
英文名称：dNTP Mixture(10mM)
规格：0.5ml|5×0.5ml
本品为dATP、dGTP、dCTP、dTTP的等摩尔(10mM)混合物。dNTP纯度均达到99％以上，不含DNase和RNase，适合多种聚合酶的扩增反应。在PCR反应中，10mM dNTP是50μl反应体系用1μl(终浓度为各200μM)。

储存条件：-20℃。

·pUC18载体
编号：RFT117
英文名称：pUC18 vector
规格：2μg
pUC18载体适用于双脱氧法对DNA 片段进行测序，它克隆的DNA 片段比使用 M13 phage作载体时克隆的片段长。 由于在 lacZ 领域中含有多克隆位点， 因此可以在含有 IPTG、 X-Gal的平板培养基上通过蓝白筛选判断载体中有无 DNA 片段的插入。同时还可以通过载体上的lac promoter表达外源基因， 使用M13系列的通用引物对插入载体中的DNA片段进行测序。



贮存液：10 mM Tris-HCl(pH8.0) ，1 mM EDTA。
链长：2686 bp。
制备：使用 CsCl-EtBr 密度梯度超离心法纯化。
纯度：
1、含 70%以上的双链 Covalently closed circular DNA(RFI) 。
2、用双脱氧测序法确认多克隆位点。
3、确认 EcoR I，Sac I，Kpn I，Sma I，BamH I，Xba I，Sal I，Pst I，Sph I 和 Hind III只有一个酶切位点。
用途：
1、外源基因的克隆以及使用 lac 启动子进行表达。
2、使用 M13 系列引物进行 DNA测序。

储存条件：-20℃。

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