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- 详细信息
- 技术资料
- 保存条件:
阴凉干燥
- 保质期:
一年
- 英文名:
TMB Color Development Solution for IHC or Blotting
- 库存:
816
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专业生产销*(代"售")TMB显色液批发,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:TMB显色液批发
编号:RFT084
品牌:百奥莱博
英文名:TMB Color Development Solution for IHC or Blotting
产地:国产|进口
TMB是HRP的常用底物。在辣根过氧化物酶或其他适当过氧化物酶的催化下,TMB 会产生蓝色产物。TMB 显色液(沉淀型,组化或膜HRP显色用,TMB Color Development Solution for IHC or Blotting)采用最新的单一溶液的 TMB 显色技术,用于 Western 或免疫组化等 HRP的显色检测,简化了操作步骤,并且使检测结果更加稳定可靠。本显色液具有高灵敏性,与 HRP反应后产生蓝紫色沉淀,沉淀吸附于印迹膜上,不会脱落,方便显色结果的保存和观察。用于免疫组化检测时,如果每个样品的显色液用量为0.1ml,则可以检测1000个样品;对于膜的显色检测,如果每次使用2.5 ml显色液,则可以检测40次。
本品主要适用于免疫组化或原位杂交时HRP的显色检测,以及Western、Southern、Northern等HRP的膜显色检测;本显色液也可以用于原位检测细胞或组织内源性的过氧化物酶。由于产生的是沉淀型蓝色产物,不适用于ELISA检测。
使用方法:
如果发现TMB显色液出现混浊或颜色变成蓝色,应该停止使用。
一、免疫组化检测:
1、参考免疫组化的实验步骤,在与辣根过氧化物酶标记的抗体孵育后,用适当洗涤液洗涤3-5次,每次3-5分钟。
2、洗涤完毕后,去除洗涤液,滴加约100微升TMB显色液。
3、室温避光孵育3-30分钟或更长时间(可在湿盒中显色过夜),直至显色至预期深浅。
4、去除染色液,加入重蒸水孵育10分钟以终止反应。
5、拍照记录或适当封片后拍照记录。如果有必要,可以使用中性红染色液进行复染后再进行拍照记录或适当封片后拍照记录。
二、膜的HRP显色检测:
1、参考相应的实验步骤,在与辣根过氧化物酶标记的抗体孵育后,用适当洗涤液洗涤3-5次,每次5分钟左右。
2、洗涤完毕后,去除洗涤液,
3、滴加约适量TMB显色液充分覆盖膜。
4、室温避光孵育3-30分钟或更长时间(可长达数小时),直至显色至预期深浅。
5、直接拍照记录。
常见问题:
一、背景显色太深。
1、如果背景显色太深,一方面需考虑使用适当的封闭液进行封闭,例如选购适当的封闭液或使用和一抗相同来源的血清(10%)进行封闭。另一方面,请选购经过适当吸附的二抗,以减小二抗的非特异性吸附。
2、可以考虑缩短显色时间,或降低二抗浓度。另外,选择适当强度的洗涤液,或延长洗涤时间也会有所帮助。
二、没有显色或显色太弱。
1、适当提高一抗或二抗的浓度。在离心管内用稀释的二抗与染色液反应,检测二抗是否可以被正常显色。
2、可以考虑使用更加灵敏的放大检测体系,例如使用生物素检测体系。
3、可以适当延长显色时间。
4、如果上述改进不能获得预期效果,对于免疫组化或Western,可以考虑更换效果更好的一抗;对于Southern、Northern或原位杂交,则可以考虑更换探针。
储存条件:2~8℃,避光,有效期一年。
除TMB显色液批发外,我公司正在打折促销以下产品:
SJ0663 凝胶回收试剂盒
ARB13937 猪细胞间粘附分子2(ICAM-2/CD102)酶标法分析 Porcine intercellular adhesion molecule 2,icam-2 ELISA KIT
D-色*酸 BOC-L-Alanine 153-94-6
002010 EDTA抗凝马血 100ml|500ml
BTN70908 DNA PAGE胶回收试剂盒 PAGE DNABACK
72-19-5 L-Threonine L-苏*酸
HC0024 (正方斜口)细胞培养瓶
PY02-178A 亮绿琼脂 250克
672-15-1 L-Homoserine L-高丝*酸
ARB10594 人血小板相关补体3(PAC3)酶免分析 Human platelet-associated complement 3,pac3 ELISA KIT
*三乙酸 Aspartic aminotransferase 139-13-9
对硝基*(代"*")基-α-D-吡喃半乳糖苷 Peptidase 7493-95-0
TMB显色液批发关键词:RFT084,TMB Color Development Solution for IHC or Blotting,TMB显色液
·即用型潮霉素B溶液
编号:RFT173
英文名称:Hygromycin B solution
规格:20ml
潮霉素B是一种由链霉菌产生的*基糖甙抗生素,通过抑制蛋白合成杀死细菌、真菌和高等真核细胞。
CAS号:31282-04-9
分子式:C20H37N3O13
分子量:527.5
浓度:50 mg/ml
纯度:80% (HPLC)
储存条件:4℃
·SDS-PAGE凝胶制备及电泳试剂盒
编号:RFT076
英文名称:SDS-PAGE gel preparation and electrophoresis Kit
规格:50次
本公司提供的SDS-PAGE蛋白电泳试剂盒包含凝胶制备以及蛋白电泳所需的全部试剂。本试剂盒可配制至少50块常规大小的PAGE胶。
试剂盒组成:
| 组份 | 规格 | 保存条件 |
| 40%PAA(29:1) | 100 ml | 4℃ |
| 4×Tris/SDS分离胶缓冲液 pH8.8 | 100 ml | 4℃ |
| 4×Tris/SDS浓缩胶缓冲液 pH6.8 | 50 ml | 4℃ |
| APS(干粉) | 0.5 g | RT |
| TEMED | 0.5ml | 4℃,避光 |
| 4×蛋白电泳上样缓冲液(含还原剂) | 1 ml | -20℃ |
| 5×Tris-甘*酸电泳缓冲液(干粉) | 1 L | RT |
使用方法:
一、配制分离胶(各试剂使用量请参考表二)
根据目的蛋白的分子量大小选择合适的凝胶浓度(表一),再按照下面的分离胶配方表(表二)配制SDS-PAGE的分离胶(即下层胶)。
表一:不同浓度的SDS-PAGE分离胶的最佳分离范围:
| SDS-PAGE分离胶浓度 | 最佳分离范围 |
| 6% | 50-150kD |
| 8% | 30-90kD |
| 10% | 20-80kD |
| 12% | 12-60kD |
| 15% | 10-40kD |
配制分离胶前,根据以下配方准备10% APS:
10% APS配制-5 ml:将0.5 gAPS干粉溶于5 ml灭菌水中,彻底溶解后分装,1 ml/支,-20℃备存,每次取一管使用。10% APS应尽量减少室温存放时间,以防失效。10%APS在4℃有效期为一周,-20℃有效期6个月。若发现凝胶聚合时间延长,应考虑更换使用-20度保存的10%APS。
制备分离胶步骤:
1、参照凝胶模具说明书,装配好凝胶模具。
2、按照表二将不同体积的成分在小烧杯或试管中混合;加入10%APS和TEMED,轻轻搅拌使其混匀,避免产生气泡。
3、在凝胶模具中灌入适量分离胶溶液(对于mini-gel,凝胶液加至约距前玻璃板顶端1.5 cm或距梳齿约0.5 cm即可),然后在分离胶溶液上轻轻覆盖一层1-5 cm的水层,使凝胶表面保持平整。
4、静置30-60分钟,待分离胶和水层之间出现一个清晰的界面后,说明凝胶已聚合
表二:SDS-PAGE分离胶配方表
| 组份 | 不同凝胶体积对应各组份的取样量(ml) | |||
| 5ml | 10ml | 15ml | 20ml | |
| 8%胶 | ||||
| H2O | 2.7 | 5.4 | 8.1 | 10.8 |
| 4×Tris/SDS分离胶buffer pH8.8 | 1.25 | 2.5 | 3.75 | 5 |
| 40% PAA(29:1) | 1 | 2 | 3 | 4 |
| TEMED | 0.005 | 0.01 | 0.015 | 0.02 |
| 10% APS | 0.05 | 0.1 | 0.15 | 0.2 |
| 10%胶 | ||||
| H2O | 2.45 | 4.9 | 7.35 | 9.8 |
| 4×Tris/SDS分离胶buffer pH8.8 | 1.25 | 2.5 | 3.75 | 5 |
| 40% PAA(29:1) | 1.25 | 2.5 | 3.75 | 5 |
| TEMED | 0.005 | 0.01 | 0.015 | 0.02 |
| 10% APS | 0.05 | 0.1 | 0.15 | 0.2 |
| 12%胶 | ||||
| H2O | 2.2 | 4.4 | 6.6 | 8.8 |
| 4×Tris/SDS分离胶buffer pH8.8 | 1.25 | 2.5 | 3.75 | 5 |
| 40% PAA(29:1) | 1.5 | 3 | 4.5 | 6 |
| TEMED | 0.005 | 0.01 | 0.015 | 0.02 |
| 10% APS | 0.05 | 0.1 | 0.15 | 0.2 |
| 15%胶 | ||||
| H2O | 1.825 | 3.65 | 5.475 | 7.3 |
| 4×Tris/SDS分离胶buffer pH8.8 | 1.25 | 2.5 | 3.75 | 5 |
| 40% PAA(29:1) | 1.875 | 3.75 | 5.625 | 7.5 |
| TEMED | 0.005 | 0.01 | 0.015 | 0.02 |
| 10% APS | 0.05 | 0.1 | 0.15 | 0.2 |
二、浓缩胶制备:
1、去除覆盖在分离胶上的水层。
2、按照表三将不同体积成分在一个小烧杯或试管中混合;加入10%过硫*(代"酸")铵和TEMED,轻轻搅拌使其混匀,避免产生气泡。
3、将浓缩胶溶液加至分离胶的上面,直至凝胶溶液到达前玻璃板的顶端。
4、将梳子插入凝胶内,避免产生气泡。
5、静置30-60分钟,等待浓缩胶聚合。
表三:SDS-PAGE浓缩胶(4%)配方表
| 组份 | 不同凝胶体积对应各组份的取样量(ml) | |||
| 2 ml | 4 ml | 5 ml | 10 ml | |
| H2O | 1.17 | 2.34 | 2.925 | 5.85 |
| 4×Tris/SDS浓缩胶buffer pH6.8 | 0.63 | 1.26 | 1.575 | 3.15 |
| 40% PAA(29:1) | 0.2 | 0.4 | 0.5 | 1 |
| TEMED | 0.002 | 0.004 | 0.005 | 0.01 |
| 10% APS | 0.02 | 0.04 | 0.05 | 0.1 |
三、电泳:
凝胶凝固好后,根据以下配方准备电泳缓冲液。
5×Tris-甘*酸电泳缓冲液的配制-1 L:将一包5×Tris-甘*酸电泳缓冲液干粉全部倒入1L烧杯中,加入约900 ml水彻底溶解,用水定容至1 L,即配成5×Tris-甘*酸电泳缓冲液(此溶液不用调节pH值)。用前再稀释5倍即配成1×Tris-甘*酸电泳缓冲液。在电泳槽的内槽内加入1×Tris-甘*酸电泳缓冲液(让电泳缓冲液漫过加样孔),轻轻的拨出梳子,随后在电泳槽外槽加入适量的1×Tris-甘*酸电泳缓冲液。上样,电泳,一般是浓缩胶80V,分离胶120V恒压,等指示前沿*酚兰电泳到分离胶下缘后,结束电泳,染色或者进行下一步实验。
TMB显色液批发关键词:RFT084,TMB Color Development Solution for IHC or Blotting,TMB显色液
·2.5mM dNTP溶液
编号:RFT163
英文名称:dNTP Mixture(2.5mM)
规格:0.5ml|5×0.5ml
本品为dATP、dGTP、dCTP、dTTP的等摩尔(2.5mM)混合物。dNTP纯度均达到99%以上,不含DNase和RNase,适合多种聚合酶的扩增反应。在PCR反应中,2.5mM dNTP 是50μl反应体系用4μl(终浓度为各200μM)。
储存条件:-20℃。
·蛋白酶抑制剂混合物(真菌或酵母蛋白提取用)
编号:RFT197
英文名称:Protease inhibitor cocktail for fungal and yeast extracts
规格:1ml|5×1ml
本品是一种用于真菌或酵母蛋白提取的蛋白酶抑制剂混合物(100mM AEBSF,1.5mM E64,2mM Pepstatin A,500mM Phenanthroline in DMSO)。一个包装的本产品通常足够用于100ml裂解液的配制。
真菌或酵母提取物中含有许多内源性的蛋白酶、磷酸酶等,容易导致提取物中的蛋白降解或去修饰,从而影响后续的蛋白检测。因此在提取物中添加适当的蛋白酶、磷酸酶等抑制剂是防止蛋白降解和去修饰的有效方法。
本产品为经优化和测试的用于真菌或酵母蛋白提取的蛋白酶抑制剂混合物,包含了广谱的丝*酸、半胱*酸和酸性蛋白酶抑制剂、以及金属蛋白酶抑制剂。
本产品使用便捷,通常以1:100的比例把蛋白酶抑制剂混合物加入裂解液中,即可用于真菌或酵母蛋白的提取,并有效抑制蛋白降解。
本产品可以有效抑制真菌或酵母提取物中的各种蛋白酶活性,如丝*酸蛋白酶、半胱*酸蛋白酶、苏*酸和天冬*酸蛋白酶、金属蛋白酶等。其中AEBSF是一种水溶性的丝*酸蛋白酶不可逆抑制剂,其抑制常数与PMSF和DFP的抑制常数相似,可以有效抑制胰蛋白酶(trypsin)、糜蛋白酶(chymotrypsin)、纤溶酶(plasmin)、激肽释放酶(kallikrein)和凝血酶(thrombin)等蛋白酶,作为PMSF和DFP的替代物,AEBSF的毒性更低、水溶性和水溶液稳定性更好。E64是半胱*酸蛋白酶不可逆抑制剂;Pepstatin A是天冬*酸蛋白酶可逆抑制剂;Phenanthroline是金属蛋白酶的可逆抑制剂。
使用方法:
1、本蛋白酶抑制剂混合物为100×的储存液,使用时按照1:100的比例加入到裂解液中(例如,1ml裂解液中加入10μl蛋白酶抑制剂混合物),混匀后即可使用。含有蛋白酶抑制剂混合物的裂解液宜现用现配,不宜配制后冻存待后续使用。
2、待所需的抑制剂添加完毕混匀后,就可以开始进行常规细胞或组织的裂解和蛋白提取。
储存条件:-20℃,有效期12个月。
我公司正在火爆促销蛋白质研究系列产品,欢迎您的垂询选购TMB显色液批发。
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