Western湿转转膜液说明书

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

Western湿转转膜液说明书由专业试剂供应商北京百奥莱博提供，用于生化研究，本产品质量好，且极具价格优势，深为用户称道，了解更多Western湿转转膜液等蛋白质研究产品请联*(代"系")我司咨询订购。

名称：Western湿转转膜液说明书
编号：RFT080
规格：10×1L
英文名：Western wet membrane fluid
品牌：百奥莱博
产地：北京
本Western转膜液是一种安全无毒的转膜液，没有使用剧毒的甲醇，也没有使用其它的有毒试剂。本Western转膜液配制便捷，无需调节pH值，用于Western时湿法电转膜。本Western转膜液可以回收，回收后可以再使用2-3次。

使用方法：
1、取一袋可以配制1升Western转膜液的粉剂，倒入到一洁净的烧杯中，加入蒸馏水到约700毫升，溶解。
2、再加入200毫升无水乙醇或210毫升95%乙醇，混匀。
3、然后在量筒中用蒸馏水定容到1升。混匀后即可使用。没有用完的转膜液可室温保存，通常两周内使用没有任何问题。当转膜液颜色变为浅棕色或黄褐色时，应该丢弃。

储存条件：室温，有效期2年。

除Western湿转转膜液说明书外，我公司正在打折促销以下产品：

·2×Taq plus MasterMix
编号：RFT096
规格：500μl|5×500μl
本产品包含Taq plus DNA聚合酶、dNTPs、MgCl2、反应缓冲液、PCR反应的增强剂和优化剂以及稳定剂，浓度为2×。使用时，只需补加实验所需的引物和模板后即可进行PCR反应，可最大限度的减少人为误差，具有快速简便、稳定性好等优点。适用于常规PCR反应、复杂模板(如GC含量高，有二级结构)的扩增以及大规模基因检测。使用该产品得到的PCR扩增产物末端含有一个A碱基，可以直接用于TA克隆。以50μl PCR反应体系为例，每次使用25μl 2×MasterMix，500μl可做20次 50μl PCR反应。

质量控制：经检测无外源核酸酶活性；PCR方法检测无宿主残余基因组DNA；能有效地扩增人基因组中的单拷贝基因。

使用方法;
1、冰浴中彻底融化2×MasterMix，混匀后Minispin将溶液收集到管底。
2、按照下表在0.2ml PCR管中制备反应体系：

 

	50μl反应体系	终浓度
2×MasterMix	25μl	1×
上游引物 10μM	1-5μl	0.2-0.8μM
下游引物 10μM	1-5μl	0.2-0.8μM
模板	×μl	10pg-1μg
水	补至50μl

3、快甩离心将反应液收集到管底。
4、PCR仪如果没有热盖加热的话，补加25μl矿物油。
5、PCR仪上执行以下程序：

步骤	温度	时间	循环数
初始变性	94℃	5 min	1
变性	94℃	30 sec	25-40*
退火	Tm-5℃*	30 sec
延伸	72℃	1 min/kb
最后延伸	72℃	5 min	1

注：PCR 反应条件视模板、引物等的结构条件不同而各异。在实际操作中需根据模板、目的片段的大小、碱基序列和引物的长短等具体情况，设定最佳的反应条件(温度、时间等)。
6、电泳检测。
注：使用含染料的2×MasterMix可以直接上样；不含染料的2×MasterMix要与6×loading buffer混合后上样。

储存条件：-20℃，避免反复冻融。


Western湿转转膜液说明书关键词：Western wet membrane fluid,Western湿转转膜液,RFT080


·λDNA/HindIII+EcoRI(564～21226bp)
编号：RFT027
规格：100次(2×25μg/2×250μl)
本产品是由λDNA经HindIII和EcoRI完全双酶切而成，适用于琼脂糖凝胶电泳中DNA条带的分析。产品浓度为0.1μg/μl，已含有1×loading buffer，可直接取2-5μl上样，使用方便。12条带的大小分别为564，831，947，1375，1584，1904，2027，3530，4268，4973，5148，21226bp。



使用方法：
1.65℃加热5分钟，立即冰浴3分钟，取2-5μl本产品加入到琼脂糖凝胶的加样孔中就行电泳。
注：根据梳子的厚度和宽度进行上样。每1mm×1mm(厚度×宽度)加样孔上样1μl。窄齿梳子(一般为1mm×2mm)上样2μl；宽齿梳子(一般为1mm×5mm)上样5μl。如果使用厚齿梳子或宽于5mm的梳子，可以适当调整上样量。
2. 建议电泳条件：凝胶浓度为1.0％，凝胶长度8-10cm，电泳电压4-10v/cm，电泳时间45分钟。
3. 通过EB染色后紫外灯下观察条带。

注意事项：
1. λ DNA酶切Marker的末端容易由COS末端结合在一起，电泳前65℃预热5分钟能解开结合的COS末端，得到更清晰的电泳图像。如果不预热，21226bp和3530bp会结合形成24756bp的额外片段，同时电泳后3530bp亮度会明显弱于其他片段。
2. 琼脂糖的质量对DNA的电泳有很大影响，电泳时请尽量使用质量优等的琼脂糖。
3. 请使用新鲜配制的电泳缓冲液和新鲜配制的琼脂糖凝胶进行电泳，以保证Marker良好的分离效果。

储存条件：-20℃，有效期1年。


Western湿转转膜液说明书关键词：Western wet membrane fluid,Western湿转转膜液,RFT080

SV0961 DNA 聚合酶 I，（Klenow）大片段
BTN101204 1M Tris-HCl(pH7.0)(DNA级)
KFS094 10×CAPS电转移缓冲液(不含甘*酸，适合大分子量蛋白转移)
SY0322 预活化正钒酸*溶液 Sodium Orthovanadate (Vanadate) Solution, Pre-activated
YT410 SP6 RNA聚合酶 SP6 RNA Polymerase
BTN131048 胆酸* Sodium Cholate
HR0125 甲醛固定组织蛋白提取试剂盒 Formalin fixed tissue protein extraction kit
YT913 结晶紫染色液 Crystal Violet Staining Solution
YT057 考马斯亮蓝染色液(常规法) Coomassie Blue Staining Solution
BTN60706 一管式琼脂糖凝胶DNA回收试剂 One-tube DNA agarose gel recovery reagent
SV1472 T7 表达晶体 E. coli 感受态细胞 ( 高效级 )
YT258 STAT5凝胶迁移探针(1.75μM) STAT5 Probe For EMSA(1.75μM)
说"
SY0583 线粒体膜通透性转换孔检测试剂盒(流式分析) Mitochondrial Permeability Transition Pore Assay Kit ( flow cytometry)
SV0730 SspI-HF限制性内切酶 SspI-HF Restriction Endonuclease
BTN130639 核酸内切酶III(Nth) Endonuclease III(Nth)
HR0940 辅酶Q10(Co10)检测试剂盒 Coenzyme Q10 (Co10) ELISA Kit
SY0218 HNF1-GFP报告基因质粒 HNF1 GFP Reporter Plasmid

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