动物组织细胞DNA提取试剂盒哪里买

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北京百奥莱博专注于生命科学和生物技术领域，致力于为客户提供包括动物组织细胞DNA提取试剂盒哪里买在内的一系列分子生物学试剂产品，并提供一系列相关的技术服务。

名称：动物组织细胞DNA提取试剂盒哪里买
规格：50次|100次
产地：国产|进口
英文名：Animal tissue cell DNA Extraction Kit
品牌：百奥莱博
编号：RFT035
本试剂盒采用可以特异性结合DNA的离心吸附柱和独特的缓冲液系统，能提取多种细胞/组织中的基因组DNA。离心吸附柱可以高效、专一吸附DNA，可最大限度去除杂质蛋白及细胞中其他有机化合物。提取的基因组DNA片段大，纯度高，质量稳定可靠。使用本试剂盒回收的DNA可适用于各种常规操作，包括酶切、PCR、文库构建、Southern杂交等实验。

提取效率：
动物细胞培养液(样本量10^6～10^7)：5～30 μg
动物组织(样本量30mg)：10～30μg

试剂盒组分;

 

组份	50次	100次	贮存方式
缓冲液GA	15 ml	30 ml	室温
缓冲液GB	15 ml	30 ml	室温
去蛋白液GD(浓缩液)	18 ml	36 ml	室温
漂洗液PW(浓缩液)	25 ml	25ml	室温
洗脱缓冲液EB	15 ml	15 ml	室温
蛋白酶K(20 mg/ml)	1ml	2×1ml	-20℃
RNase A(10 mg/ml)	0.5 ml	1 ml	-20℃
吸附柱CG	50个	100个	室温
收集管(2 ml)	50个	100个	室温
说明书	1份	1份

准备工作：
1. 准备55℃和70℃水浴；无水乙醇；1.5ml灭菌离心管。
2. 按照标签所示在去蛋白液GD和漂洗液PW中加入无水乙醇，混匀后盖紧瓶盖后室温贮存备用。
3. 每次使用前请检查缓冲液GA，缓冲液GB和去蛋白液GD是否有沉淀生成，如果出现沉淀，37℃温浴至沉淀溶解后再使用。

操作步骤：
如非指出，所有离心步骤均为使用台式离心机在室温下离心。

1、处理材料：
a. 培养细胞：贴壁培养的细胞应先处理为细胞悬液(如用PBS缓冲液或类似缓冲液)，10,000 g离心1分钟，倒尽上清，加入200μl缓冲液GA，振荡至彻底悬浮。
b. 组织：取约30mg动物组织(脾组织用量应少于10 mg)加入到事先盛有200μl 缓冲液GA的1.5ml离心管中，用研磨杵彻底将组织研碎。
2、加入20μl蛋白酶K (20 mg/ml)溶液。
a. 提取细胞基因组时，加入蛋白酶K混匀后，55℃放置5-10分钟。
b. 提取组织基因组时，加入蛋白酶K混匀后，在55℃放置，直至组织溶解。
注：不同组织裂解时间不同，通常需1-3小时即可完成(鼠尾需要消化过夜),期间间歇颠倒混匀样品。
3、加入10μl RNaseA(10 mg/ml)溶液，混匀后室温放置2分钟。
4、加入220μl缓冲液GB，充分颠倒混匀，70℃放置10分钟，溶液应变清亮，简短离心以去除管盖内壁的水珠。
注：加入缓冲液GB时可能会产生白色沉淀，一般70℃放置一段时间后会消失。如溶液未变清亮，说明细胞裂解不彻底，会影响DNA的纯度和得率，而且可能导致步骤6中离心柱堵塞。
5、加入220μl 无水乙醇，颠倒混匀，简短离心以去除管盖内壁的水珠。
注：加入乙醇后会产生絮状沉淀，可用枪头反复抽打1-2次将沉淀弄碎后再上柱。如果絮状物未做处理，容易导致步骤6中离心柱的堵塞。
6、将上一步所得溶液和絮状沉淀都加入一个吸附柱CG中(吸附柱放入收集管中)，11000g离心2分钟，倒掉废液，吸附柱CG放回收集管中。
注：如果出现吸附柱堵塞现象，可将离心时间延长到5分钟。
7、向吸附柱CG中加入500μl去蛋白液GD(使用前请先检查是否已加入无水乙醇)，11000g离心1分钟，倒掉废液，吸附柱CG放入收集管中。
8、向吸附柱CG中加入700μl 漂洗液PW(使用前请先检查是否已加入无水乙醇)，11000g离心1分钟，倒掉废液，吸附柱CG放入收集管中。
9、向吸附柱CG中加入500μl 漂洗液PW(使用前请先检查是否已加入无水乙醇)，11000g离心1分钟，倒掉废液。
10、将吸附柱CG放回废液收集管中，11000g离心2分钟。
注：此步骤非常重要，目的是将吸附柱中残余的漂洗液去除。漂洗液中乙醇的残留会影响后续的酶反应(酶切、PCR等)实验。
11、将吸附柱CG转入一个干净的离心管中，向吸附膜的中间部位悬空滴加100μl经70℃水浴预热的洗脱缓冲液EB，室温放置2分钟，11000g离心2分钟。
注意：
a.洗脱缓冲液体积最好不少于100μl，体积过小影响回收效率。
b.洗脱液的pH值对于洗脱效率有很大影响。若用水做洗脱液应保证其pH值在7.0-8.5范围内，pH值低于7.0会降低洗脱效率。
12、DNA产物-20℃保存。

储存条件：室温，有效期12个月。

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·Flag标签抗体
编号：RFT170
英文名称：Anti-Flag antibody
规格：20μl
小鼠抗DYKDDDDK标签单克隆抗体，浓度为1mg/ml，采用蛋白A纯化，Western Blot推荐稀释比例1:1000～1:2000。

应用举例：

第一道：30ng DYKDDDDK融合蛋白
第二道：50ng DYKDDDDK融合蛋白
第三道：75ng DYKDDDDK融合蛋白.
电泳：15% SDS-Urea-PAGE
转膜：NC膜印记一小时.
封闭：5%脱脂奶室温一小时
一抗：1:2000稀释4℃过夜
二抗：HRP标记羊抗小鼠IgG(H&L)1:5000稀释
检测: 化学发光底物，CCD摄像机采集图像


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BTN90402 蛋白胶微量回收试剂盒 Protein Gel Mini-Extraction Kit
SJ0856 脱纤维绵羊血
BTN101123 PVDF膜 PVDF Membrane(Millipore)
诺*沙星 Nystatin 70458-96-7
D-对羟基*甘*酸 Complex amino acid 22818-40-2
DN2901 中量/大量酵母基因组DNA提取试剂盒(溶液型)
NF-267 HBS阳性对照
BTN130655 热敏磷酸酶 Antarctic Phosphatase
2-*胺-1-磺酸 Potassium sorbate 81-16-3
ARB11156 人周期素依赖性激酶2(CDK-2)免费代测 Human cyclin-dependent kinase 2,cdk-2 ELISA KIT
C0601 山羊血清(无菌过滤) 100ml/200ml/500ml/500ml*20瓶
ARB12122 大鼠可溶性凋亡相关因子(sFAS/Apo-1)含量分析 Rat soluble factor-related apoptosis,sfas/apo-1 ELISA KIT
SJ0821 蛋黄粉
ARB13645 兔子基质金属蛋白酶抑制因子1(TIMP-1)elisa检测说明书 Rabbit tissue inhibitors of metalloproteinase 1,timp-1 ELISA KIT
PY02-318  3%*化*赖*酸脱羧酶试验培养基  5克  
ARB10416 人可溶性髓系细胞触发受体-1(sTREM-1)酶联免疫定量检测 Human soluble triggering receptor expresses on myeloid cells-1,strem-1 ELISA KIT
2′-脱氧肌苷-5′-单磷酸二*盐 Bismuth subnitrate 14999-52-1
ARB11654 人蛋白酪*酸磷酸酶(PTP/PTPAse/CD148)酶标法分析 Human protein tyrosine phosphatase,ptp/ptpase ELISA KIT
ARB10247 人乙*(代"胺")碘呋酮(AD)含量测试 Human amiodarone,ad ELISA KIT
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·QuickLan蛋白染色液
编号：RFT053
英文名称：QuickLan protein staining solution
规格：500ml
本蛋白染色液是以考马斯亮蓝G-250为主要成分，采用新配方配置而成。可用于SDS-PAGE或非变性PAGE胶(native gel)的快速染色。

特点：
1、方便快捷-不用漂洗，不用加热，不用脱色，不用固定，条带2分钟可见；
2、灵敏度高-检测下限10ng蛋白；
3、兼容性好-适用于变性和非变性胶以及质谱分析；
4、绿色环保-不含甲醇，冰醋酸。

用前必读：
1、使用前如发现瓶中有少许沉淀，请混匀后使用。
2、以下“使用方法”是针对0.75mm厚度，10×10cm凝胶染色程序。

使用方法：
1、将电泳后的PAGE胶取下放入塑料容器中，用适量蒸馏水漂洗一下。
2、弃蒸馏水，加入适量染色液(以刚刚覆盖过胶面为适)，摇床上常温摇动，根据下表确定染色时间。

待检测蛋白量	染色时间
＞1 μg	2分钟
100ng-1μg	10分钟
10ng-100ng	60分钟

3、观察记录结果。

附：质谱处理程序
1、切下待检蛋白条带置于1.5ml离心管中。
2、加入1ml 30%乙醇或30%丙*(代"酮")(也可用30%醋酸，但会导致蛋白N端酰基化)。
3、处理30分钟。
4、重复步骤2，3直到去除所有染料。一般处理2-3次既能完全去除染料。
5、质谱分析。

注意事项：
1、使用方法中的各种参数仅针对面积8×10cm或10×10cm，厚度0.75mm的凝胶，如果使用更大面积或更厚的凝胶，请加入更多的染色液并延长染色的时间。
2、常规染色所需的漂洗，固定，脱色步骤都无必要。
3、本染色液可以重复利用1-2次，敏感性会有轻微下降，请延长染色时间。
4、本染色液有轻微腐蚀性，请带手套操作。使用后，请盖好瓶盖，常温密封保存。

问题分析：
1、QuickLan染胶的最佳温度是多少？
为达到最佳的染色效果，推荐常温(20-25℃)染色。
2、QuickLan溶液需要低温贮存吗？
QuickLan不需要低温贮存，常温贮存(20-25℃)即可。4-8℃贮存，QuickLan会有结晶生产，37℃温浴融化后可继续使用。
3、QuickLan的染色原理是什么？
QuickLan染色原理与经典考马斯亮蓝G250染色原理相同(与蛋白质中碱性*基酸结合)，优点是更加快速和更高的灵敏度。
4、QuickLan染色后，凝胶可以用蒸馏水保存吗？
可以，蒸馏水保存最为简单，也可以保存在稀释的冰醋酸中。
5、QuickLan染色后的凝胶能做质谱分析吗？
可以。请参阅“质谱处理程序”
6、QuickLan染色的凝胶能做Weatern Blot吗？
不可以。蛋白的染色是不可逆的，染色的凝胶不能用作下游的转膜操作。
7、QuickLan能重复使用吗？
QuickLan可以重复使用2-3次，但灵敏度有所下降，可以通过延长染色时间来弥补。
8、为什么凝胶过夜染色后条带出现涂抹状拖尾？
QuickLan过夜染色不会对凝胶过度染色。出现抹涂状拖尾原因是上样量太大，因为QuickLan染色灵敏度较高。另外，分子量较小的蛋白在过夜染色中会有扩散现象，我们推荐染色最好在60分钟内完成。
9、QuickLan有固定凝胶的作用吗？
QuickLan是水系溶液，没有固定凝胶的作用。然而，由于染色会在60分钟内完成，染色前无需对凝胶进行固定。

储存条件：室温，有效期一年。

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