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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
99
- 供应商:
江蓝纯
- 规格:
10T
- Sensitive: The maximum intensity of labeling (cell staining) of apoptotic cells is higher than the nick translation method
- Fast: The use of fluorescein-dUTP allows analysis of the samples directly after the TUNEL reaction, but before the addition of the secondary detection system
- Convenient: The direct labeling procedure using fluorescein-dUTP allows verification of the efficiency of the TUNEL reaction during the assay procedure
- Accurate: Identification of apoptosis at a molecular level (DNA-strand breaks) and identification of cells at the very early stages of apoptosis
- Flexible: No substrate included; provides the opportunity to select the staining procedure of choice
Contents
- Enzyme Solution (TdT)
- Label Solution (fluorescein-dUTP)
- Converter POD (anti-fluorescein antibody-POD), ready-to-use
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文献和实验细胞仪检测。 二、荧光显微镜原位检测 注:本方法优点是可以原位观察细胞凋亡,缺点是部分凋亡由于贴壁不牢而检测不到。 如果条件可以,在诱导凋亡后,用多孔板离心机300 g离心5 min。 吸除细胞培养液,用PBS洗涤两次(如果条件允许,在此前做步骤A)。 离心后弃上清,加入500 μL稀释成1 × 的Annexin V Binding Buffer工作液。 加入5 μL的荧光素标记-Annexin V和5μL的细胞核染色液。 移液器轻轻混匀,室温避光孵育15~20 min。 Annexin V Binding
ziweihua 求助高人啊,我想用斑马鱼整体胚胎检测其细胞凋亡情况,选用的Roche的in situ cell death detection kit, POD. 按照其中的贴壁细胞或细胞涂片的方法做了两遍,可是连阳性对照都没有信号。后来查找到一篇论文中的方法,如下: a,收集胚胎后用PBS清洗,转移到1.5ml的EP管内,4%多聚甲醛PBS固定过 夜 b,用PBS配制 25%50%75%的梯度酒精,每次5min将胚胎梯度脱水。
一、DNA聚合酶或Klenow大片段介导的原位缺口平移(ISNT) 1.切片常规脱蜡,梯度乙醇复水化。 2.将切片组织浸入2×SSC液中,80℃,20min,然后蒸馏水冲尽。 3.0.5%胃蛋白酶(pH2.0)37℃消化0~20min,PBS洗尽。 4.用滤纸擦干组织块周边液体放入湿盒组织切片上滴加缓冲液A,5min。缓冲液A:50mmol/L Tris-HCl, 5mmol/L MgCl2, 10mmol/L β-巯基乙醇,0.005%BSA,pH7.5。 5.弃
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