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上海禾午生物科技有限公司
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5334-31-6
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0.97
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文献和实验固相多肽合成就是不断地在固相载体上加入α-氨基和侧链基团被保护的氨基酸。FMOC基团是用来保护α-氨基中的N的,去除保护基团后,再加入第二个氨基酸。产生的多肽通过一个连接臂将C端连接在树脂上,它可以被裂解下来。通常情况下,在多肽从树脂上裂解下来的同时去除侧链保护基团,一般采用哌啶去FMOC保护基团,肽树脂的裂解和侧链保护基团去除一般用强酸,比如三氟乙酸,N,N-二甲基甲酰胺(DMF)是树脂去保护、氨基酸反应和洗涤的首选溶剂。1. 合成步骤: 步骤溶液或溶剂循环数时间1DMF2次30s2含20
底物范围较广,包括二氨基联苯胺 (DAB)、氯萘酚和氨乙基咔唑等。 二氨基联苯胺/金属盐 DAB 是辣根过氧化物酶最敏感、常用的底物。它产生强烈的棕色产物,在水和醇中不溶解。多数情况下,推荐在 DAB 中加入不同的金属离子。当加入金属盐如钴、镍至底物液中,辣根过氧化物酶可以更加敏感。此类反应产物呈暗蓝灰色至黑色,且在水及醇中稳定。DAB/金属盐染色应用的组织染色范围较广。 1. 需要的溶液和特殊设备 DAB,0.05 mol/L Tris 缓冲液 (pH7.6), 0.3% (W
1.3.1.偶联时间:2h 1.3.2.封闭时间:1h 1.4. 封闭要求:封闭时间不宜小于1h。 2. 偶联流程 2.1. 配制偶联实验所用的缓冲液,分别有以下几种: 2.1.1 偶联液:100mM MES pH4.8 2.1.2 封闭液:3M Ethanolamine,1%BSA,0.5%T-20,pH8.0 2.1.3 保存液:0.05%proclin-300的PBS缓冲液或者根据自己的需求配制其他缓冲液。 2.2. 先将磁珠用旋涡
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