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一站式miRNA柱式提取试剂盒 RNA纯化

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  • ¥190 - 2460
  • 百奥莱博
  • 北京
  • BTN80104-FHZ
  • 2025年07月05日
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      常温运输

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      一年

    • 英文名

      One-stop miRNA column extraction kit

    • 库存

      530

    • 供应商

      北京百奥莱博科技有限公司

    特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

    百奥莱博专业生产销*(代"售")一站式miRNA柱式提取试剂盒 RNA纯化,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。


    名称:一站式miRNA柱式提取试剂盒 RNA纯化
    产地:国产|进口
    规格:50次
    编号:BTN80104
    英文名:One-stop miRNA column extraction kit
    本试剂盒是目前国内外市场上最快速最简单的小RNA分离纯化产品。

    试剂盒特点:
    1.一步法直接分离纯化小RNA,比两步法(先分离总RNA和再纯化其中的小RNA)和PAGE电泳回收法更简单。得到的小RNA长度大部分在200nt以下,包括5S RNA、tRNA、miRNA、Pre-miRNA、pri-miRNA、siRNA、shRNA和snRNA等。
    2. 柱式操作,比miRNA提取试剂盒更加简单快捷,整个过程只需要十多分钟。
    3.适用范围广,可以用于动物组织、血液及部分植物组织等实验材料。
    4.小RNA 纯净,OD260/280一般都在1.9以上。
    5.产率一般为20-40μg/100mg动物组织。
    6. 无基因组DNA的污染。
    7.可用于RT-PCR、miRNA 标记、microarray等后续实验。

    试剂盒组成:

     
    成分 规格
    溶液A 25ml
    溶液B 25ml
    溶液C 50ml
    离心吸附柱 100套
    通用洗柱液 50ml
    RNA洗脱液 10ml
    说明书 1份


    储存条件:常温运输,4℃保存,有效期一年。

    使用方法:
    由于离心吸附柱的吸附量限制,本产品每次提取只能处理100mg左右的各种组织,可以在1.5mL塑料离心管中。如果处理样品量大,请分成很多相当于微量提取的量进行,最后再收集在一起。

    1. 新鲜配制裂解液。将溶液A和溶液B按1:1的比例混合,然后根据组织细胞类型的不同分为下面及种情况使用。注意:溶液A和溶液B混合后必须立即使用,不要放置,否则会产生沉淀。
    a)对贴壁细胞:吸尽培养液,在每10平方厘米细胞中加入1mL新鲜配制的裂解液,用枪轻柔吹打数次,确保细胞全部裂解。
    b)对悬浮细胞:离心收集细胞,吸尽液体,在每1-5×106 悬浮细胞中加入1mL新鲜配制的裂解液,用枪轻柔吹打数次,确保细胞全部裂解。如果是fibroblasts或carcinoma cell,1mL 新鲜配制的裂解液的细胞使用量不要超过1×106个细胞。
    c)对新鲜的动物组织:先将剪切成小块新鲜组织或液氮保存的组织放入10mL或15mL塑料离心管中,每50-100mg 组织加1mL 新鲜配制的裂解液,用匀浆器匀浆30秒左右。对肝、脾、胰、肾等细胞分裂十分旺盛的组织(细胞中含大量正在复制的DNA),建议组织的使用量不要超过50mg/mL裂解液,否则十分容易产生DNA污染。
    d)对新鲜的植物组织:先将剪切成小块新鲜组织或液氮保存的组织放入10mL或15mL塑料离心管中,每50-100mg 组织加1mL 新鲜配制的裂解液,用匀浆器匀浆30秒左右。
    e)对 RNAhold 保存动物或植物组织:先用纸吸去RNAhold液体后再剪切成小块,放入10mL或15mL塑料离心管中,每50-100mg组织加1mL新鲜配制的裂解液,用匀浆器匀浆30秒左右。
    2. 将裂解物转移至一个干净的1.5mL塑料离心管中,然后加入0.2倍体积的自备*仿(1mL裂解物需0.2mL *仿),振荡器上充分振荡混均30秒。
    3. 12000~15000g室温离心3~5分钟。
    4. 将上清液(约0.6-0.8mL)转移到一根离心吸附柱中以去除大RNA(最好标记以跟后面要用的专门吸附小RNA的另一离心吸附柱区别开来,本试剂盒提供的离心吸附柱之间没任何区别,可以随机选一个做大RNA 吸附,另一个做小RNA 吸附)。注意:离心后下层有机相和中间层含有DNA和蛋白质,避免触及,否则将产生蛋白质和DNA污染。为保险起见,可以留下100μL上清液不取。同时吸取上清时最好缓慢进行,否则容易吸出交界面的不可见的丝状DNA。
    5. 12000~15000g室温离心半分钟,收集管中的穿透液。大RNA 及DNA将与离心吸附柱的膜结合,小RNA 将存在于穿透液中。但由于离心吸附柱的最大吸附能力为40μg动物RNA,20μg植物RNA,如果样品中的大RNA含量高于上面数值,则穿透液中将同时含有大RNA和小RNA,在此情况下,穿透液需要再次重复上柱以去除大RNA。由于此时离心吸附柱已经吸附了大RNA,所以需要预处理(具体步骤见本手册最后的附录)。
    6.在最后得到的不含大RNA的穿透液中加等体积的溶液C,混匀。此时溶液的总体积约1.5mL。
    7. 先转移约0.75mL 到一新的离心吸附柱中。注意:不要使用已经使用过的、用来吸附大RNA的离心吸附柱。12000~15000g室温离心半分钟,弃收集管中的穿透液。
    8. 将上步上柱剩余的样品转移到离心吸附柱中,12000~15000g室温离心半分钟,弃收集管中的穿透液。
    9. 加 0.7mL 通用洗柱液到离心吸附柱中,12000~15000g室温离心半分钟,弃穿透液。
    10. 加 0.3mL 通用洗柱液到离心吸附柱中,12000~15000g室温离心半分钟,弃穿透液。此步一般可以省略。
    11. 12000~15000g室温离心半分钟以甩出残联液体。此步十分重要,否则残留的通用洗柱液会影响miRNA的使用。
    12. 将离心吸附柱转移到一自备的RNase-free 收集管中,加入50-100μLRNA 洗脱液。
    13. 12000~15000g室温离心半分钟,离心管中溶液即为miRNA样品,可以立即使用或存放于-80℃待用。

    附录:
    1. 将结合有大RNA和DNA的离心吸附柱中加入0.1mL自备的超纯水,12000~15000g室温离心半分钟,弃收集液。
    2. 再加 0.1mL自备的超纯水,重复上步一次。
    3. 将第5 步的得到、需要进一步去除其中大RNA和DNA污染的穿透液直接上柱,12000~15000g室温离心半分钟,收集穿透液(此穿透液含小RNA)。
    4. 如果大 RNA 已经去干净,可以直接进入第6 步;如果大RNA 没有去除干净,则用本附录1-2的方法处理离心吸附柱,然后再将此穿透液加入(接本附录第3 步)。一般样品只需要额外处理一次就可以去除全部的大RNA污染。

    欲咨询购买一站式miRNA柱式提取试剂盒 RNA纯化,请致电北京百奥莱博科技有限公司,为您提供最全面周到的产品服务,除此之外,我公司正在促销以下产品:

    ·α2巨球蛋白
    编号:BTN130543
    英文名称:α2-Macroglobulin
    规格:25 Inh.U
    α2巨球蛋白(α2-macroglobulin,α2MG或AMG)是存在于脊椎动物血浆中的一种糖蛋白,也是血浆中分子量最大的蛋白质,分子量约为65.2万-80万,具有广谱的蛋白酶抑制活性,可以抑制大部分胞内蛋白酶活性,但是不能抑制组织血管舒缓素、尿激酶、凝血因子Ⅻα、胞内蛋白酶Lys-C。使用过程中应避免添加DTT,DTT会导致α2巨球蛋白发生分解。它对酸敏感,pH4.0以下发生变性。

    活力单位定义:一个抑制单位Inh.U是指抑制9.1μg的胰蛋白酶活性的量。

    储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期半年。

    ·DNA碱性胶上样液
    编号:BTN101222
    英文名称:DNAload for Alkaline Gel
    规格:1.5mL
    本品是6×的DNA碱变性琼脂糖电泳上样液,含有碱溶液、助沉剂、染料等成分。

    产品特点:
    1. 即开即用,不需要制备各种溶液。
    2. 使用简单,电泳时,先将DNA样品与本上样液1:5混合即可直接上样。
    3.还可以用于DNA碱变性琼脂糖电泳。

    储存条件:低温运输和-20℃保存,有效期一年。


    一站式miRNA柱式提取试剂盒 RNA纯化关键词:一站式miRNA柱式提取试剂盒,One-stop miRNA column extraction kit,BTN80104

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