核酸外切酶III供应

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核酸外切酶III供应由专业试剂供应商北京百奥莱博提供，用于生化研究，本产品质量好，且极具价格优势，深为用户称道，了解更多核酸外切酶III等工具酶产品请联系我司咨询订购。

名称：核酸外切酶III供应
产地：国产|进口
英文名：Exonulease III
品牌：百奥莱博
编号：BTN120420
规格：2500U
核酸外切酶 III具有从双链DNA的3´-OH末端降解生成5´-单核苷酸的3´→5´外切酶活性。本酶对双链DNA具有高度特异性，能降解平滑末端、3´凹陷末端及有切口的DNA，但是不能降解3´-突出末端。所以，可以用产生不同末端的限制酶通过双重降解后，利用Exonuclease III的3´→5´的外切酶活性，从一端降解，得到互补的单链DNA和5´-P单核苷酸。与核酸酶相比，本酶的碱基特异性较小，如在富含GC的位置上，由于反应停止的机率较低，可用于DNA的Deletion制作。

产品用途：
➤ 通过部分降解双链DNA片段，产生一部分单链DNA片段，作DNA聚合酶的底物(生成的DNA可用于双脱氧法序列分析)。
➤与单链特异性核酸酶(S1 Nuclease或Mung Bean Nuclease)合用制作DNA缺失片段。本酶对双链结构DNA具有高度特异性，对于双酶切DNA片段(例如Eco R I-Pst I Fragment)能制作单向(Eco R I方向)缺失的DNA。
➤ DNA-蛋白质相互作用分析。

产品组成：

 

成分	规格
核酸外切酶200U/μL	12.5μL
10×Buffer	1ml
使用手册	1份

储存条件：低温运输，-20℃保存，半年以上长期保存时请在-80℃冷冻保存。

贮存Buffer：Tris-HCl(pH8.0)25mM，KCl 50mM，DTT 0.5mM，Glycerol 50%

反应Buffer(10×)：Tris-HCl(pH8.0)500mM，MgCl2 50mM，DTT 10mM。

活性定义：以限制酶处理的小牛胸腺DNA为底物，在37℃、pH8.0的条件下，30分钟内产生1nmol酸可溶性物质所需要的酶量定义为1个活性单位(U)。

纯度
1．50U的本酶和1μg的Closed circular(RF I)pBR322 DNA在37℃下反应1小时，DNA的电泳谱带不发生变化。
2．50U的本酶和1μg的pBR322-Pst I分解物在37℃下反应30分钟，DNA的电泳谱带不发生变化。

除核酸外切酶III供应外，我公司正在打折促销以下产品：
BTN120415 终点显色法内毒素定量试剂盒 Chromogenic End-point TAL Kit
对*基*甲*(代"酸")* H-Pro-OBzl?HCl 555-06-6
PY06-006  大肠菌群显色培养基  1000ml，用于大肠菌群的快速计数(平板计数法)
1637-39-4 Trans-Zeatin  反玉米素
ARB11587 人基质裂解素(ST3)Elisa方法检测 Human stromelysin-3,st3 ELISA KIT
ARB13666 兔白细胞介素1(IL-1)ELISA代测服务 Rabbit  interleukin 1,IL-1ELISA KIT
三磷酸脱氧核糖核苷酸 Z-L-Alanine
ARB10613 人血红蛋白β亚基(HB-β)酶免分析 Human β-subunits of hemoglobin,hb-β ELISA KIT
4-甲氧基肉桂酸 Propyl gallate 830-09-1
ARB13570 兔子白介素1(IL-1)免费代测 Rabbit interleukin 1,IL-1 ELISA KIT
L-羟基脯*酸 Gatifloxacin 51-35-4
PY04-034  *啶酮酸(I)  3.0mg/支×10支  每支添加于100 ml脑心浸液培养基中，用于猪链球菌的增菌培养
ARB10501 人白细胞介素10(IL-10)含量测试 Human interleukin 10,IL-10 ELISA KIT
ARB11747 人嗜酸性白血球相关之RNA水解酵素家族成员1(EAR1)elisa检测说明书 Human eosinophIL-associated ribonuclease a family member 1,ear1 ELISA KIT
PY02-142  玉米粉琼脂  250克  
ARB11827 人横纹肌辅肌动蛋白α(sm ActInIn-α)Elisa定量检测 Human skeletal muscle actinin-α,sm actinin-α ELISA KIT
水杨酸肟酸 Salicylaldoxime 89-73-6
核酸外切酶III供应关键词：Exonulease III,BTN120420,核酸外切酶III


·DNA marker(λ-EcoT14 I)
编号：BTN90602J
英文名称：DNA ladder(λ-EcoT14 I)
规格：100μg

·GTP溶液(100mM)
编号：BTN120628
英文名称：GTP Solution，100mM
规格：0.25mL
本产品纯度在98%以上(HPLC检测)，不含DNA内切酶、DNA外切酶、RNA酶和磷酸酶的污染，可以直接用于体外RNA转录合成。

GTP分子式为C10H13N5O14P3Na3，分子量是589.2，消光系数为13.7×103M-1 ×cm-1(pH7.0)，λmax为253nm。

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

·5-*-4-*-3-吲哚磷酸(BCIP)
编号：BTN100831
英文名称：5-Bromo-4-Chloro-3-Indolyl Phosphate
规格：100mg
BCIP分子式为C8H4BrClNO4P·C7H9N，分子量为433.64，CAS号为6578-06-9。本产品为白色结晶，溶解度为20mg/mL。在碱性磷酸酯酶的催化下，BCIP会被水解产生强反应性的产物，该产物会和NBT发生反应，形成不溶性的深蓝色至蓝紫色的NBT-formazan。NBT/BCIP用于蛋白印迹和免疫组化染色等实验。

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

·农杆菌EHA105化学感受态细胞
编号：BTN140383
英文名称：E.coli EHA105 Chemical Competent Cell
规格：10×100μL
 本产品为EHA105农杆菌化学感受态细胞，为C58型背景，核基因中含有筛选标签-利福平抗性基因rif，为了便于转化操作，此菌株携带一无自身转运功能的琥珀碱型Ti质粒pEHA105(pTiBo542DT-DNA)，此质粒含有vir基因(vir基因是T-DNA 插入植物基因组必需的元件，pEHA105(pTiBo542DTDNA)质粒自身的T-DNA转移功能被破坏，但可以帮助转入的双元载体T-DNA顺利转移)。本产品适用于水稻、烟草等植物的转基因操作，经pCAMBIA2301质粒检测转化效率高达103cfu/μg。

储存条件：干冰运输、-80℃保存，有效期一年。

自备试剂：质粒DNA、液氮等

使用方法：

转化前准备
1. 冰水浴和37℃水浴。
2.液氮或干冰/乙醇混合物。
3. 将抗性平板在28℃培养箱中平衡至少15分钟。
转化方法
1. 取-80℃保存的农杆菌感受态细胞于冰水浴中融化。
2. 无菌条件下，向刚刚融化的感受态细胞悬液中加入需要转化的质粒，每100μL感受态细胞加1ug(体积不大于10μl)质粒DNA，轻柔混匀。冰水浴中静置5分钟。
3. 将离心管置于液氮中速冻5分钟(注：也可以用干冰和无水乙醇混合物替代液氮)。
4. 迅速将离心管置于37℃水浴静置中5分钟，不要晃动水面。然后快速转至冰水浴中静置5分钟。
5. 加入800μl 无抗生素的2×YT或LB液体培养基，28-30℃振荡培养2～3小时。使菌体复苏，表达抗性。
6. 5000rpm离心1分钟收菌，保留100μl左右上清，轻轻吹打重悬菌体，均匀涂布到含有相应抗生素的LB 固体培养基平板上，待平板中的液体完全吸收后，倒置平板，28-30℃培养48-72小时。
 注：当平板只含有50μg/mL kan时，28℃培养48 h 即可；平板中同时加入50μg/mL kan、20μg/mL rif时，需28℃培养60 h；如果使用的平板含有50μg/mL rif 则需要28℃培养72-90h。

注意事项：
1. 加入质粒时体积不应大于感受态体积的1/10；质粒不纯或存在乙醇等有机物污染，转化效率急剧下降；质粒增大一倍，转化效率下降一个数量级。
2. 混入质粒时应轻柔操作。转化高浓度的质粒可相应减少最终用于涂板的菌量。
3. 平板上阳性克隆密度过大时，由于营养不足，阳性克隆生长变慢，菌落变小，为了获得大的菌落，应减少质粒用量。
4. 利福平浓度不应高于25μg/mL，过高的利福平浓度不利于农杆菌生长，会降低其生长速度和转化效率。本公司感受态计算转化效率时所用平板只含有50μg/mL kan，若所用平板含有20μg/mL rif 则转化效率降低到1/2。
5.培养基中加入利福平的目的是防止杂菌生长、筛选农杆菌；根据所用菌株抗性加入Ti质粒筛选抗生素可防止Ti质粒丢失，但Ti质粒筛选抗生素不利于农杆菌的转基因操作，所以一般培养农杆菌时不考虑这些抗生素，Ti质粒丢失的概率极低(可以忽略)。


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·半干法电转液(干粉)
编号：BTN81207
英文名称：Half-Wet Transfer Buffer Powder
规格：20L
本产品配制的溶液适用于半干法电转PAGE胶上蛋白质，湿润和浸泡电转膜以及垫子。半干法的优点是快捷，最长只需40分钟左右，一般只适合100KD以下的蛋白。

储存条件：常温运输、4℃保存，有效期一年。


·大肠杆菌BL21化学感受态细胞
编号：BTN140428
英文名称：E.coli BL21 Chemical Competent Cell
规格：0.1mL*10
本产品是采用大肠杆菌BL21菌株经特殊工艺处理得到的感受态细胞，可用于DNA的化学转化。本产品用作表达载体的宿主，适用于毒性蛋白的表达，适用于不是基于T7启动子的表达系统。使用pUC19质粒检测，本产品转化效率可达107。
菌株基因型为：BL21 strain E.coli B F- dcm ompT hsdS(rB- mB-)gal。

储存条件：干冰运输、-80℃保存，有效期半年。

自备试剂：目的DNA、SOC或LB培养基等。

使用方法：
1. 取感受态细胞置于冰浴中。一次转化感受态细胞的建议用量为50-100μL，根据实际情况分装使用。
以下实验以50μL感受态细胞为例。
2. 待感受态细胞融化后，向感受态细胞悬液中加入目的DNA(根据实际情况加入适量的DNA，通常100μL感受态细胞能够被1ng超螺旋质粒DNA 所饱和)，用移液器轻轻吹打混匀，冰浴30分钟。
3. 42℃热击45秒，迅速将离心管转移到冰浴中，冰上静置2-3分钟。
4. 每个离心管中加入450μL无菌的SOC或LB培养基(不含抗生素)，混匀后置于37℃摇床，150rpm振荡培养45分钟使菌体复苏。
5. 根据实验需求，取适量已转化的感受态细胞，加到含相应抗生素的SOC或LB固体琼脂培养基上，用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开，将平板置于37℃直至液体被吸收，倒置培养，37℃培养12-16小时。

注意事项：
1. 涂布用量可根据具体实验调整。若转化的DNA总量较多，可取少量转化产物涂布平板；若转化的DNA 总量较少，可取200-300μL转化产物涂布平板。若预计的克隆数较少，可通过离心(4,000rpm，2分钟)后吸除部分培养液，悬浮菌体后将其涂布于平板中。
2. 新制备的固体培养基不易涂干，可将平板正置于37℃直至液体被吸收后再倒置培养
3. 涂布剩余的。

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