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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
低温运输、-20℃保存
- 保质期:
长期
- 英文名:
Southern Blocking Buffer (NC)
- 库存:
739
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产销*(代"售")Southern封堵液(NC专用)哪里卖,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:Southern封堵液(NC专用)哪里卖
英文名:Southern Blocking Buffer (NC)
产地:国产|进口
编号:BTN120676
规格:100mL
本产品为专门针对NC膜的核酸杂交封堵液,用于降低检测时的非特异性信号,降低背景,增强信噪比。经过反复优化配方,即开即用,方便快捷。
储存条件:低温运输、-20℃保存,有效期一年。
我公司的Southern封堵液(NC专用)哪里卖,性价比高,货期短,送货上门,欢迎您来电咨询购买,另外,我公司还生产供应销*(代"售")下列产品:
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Southern封堵液(NC专用)哪里卖关键词:Southern Blocking Buffer (NC),BTN120676,Southern封堵液,NC专用,Southern封堵液(NC专用)
·姬姆萨染色液(吉姆萨染液)
编号:BTN170502
英文名称:Giemsa Staining Solution
规格:250mL
本产品由溶液A(Giemsa Stain 储存液,10×)和溶液B(磷酸盐缓冲液)组成,溶液A:溶液B=1:9混合成工作液后使用;亦可以分开使用,即先用Giemsa Stain染色,再经磷酸盐缓冲液处理,亦可以得到满意的染色效果。
姬姆萨色素(又称吉姆萨色素)是由天青Ⅱ与伊红混合而成,Giemsa染色原理和结果与瑞氏染色基本相同,姬姆萨染色液对胞浆着色力较强,能较好的显示胞浆的嗜碱性程度,特别是对血液和骨髓细胞中的嗜天青、嗜酸性、嗜碱性颗粒,着色清晰,但是对胞核着色偏深,核结构显色不佳,故姬姆萨染液常与瑞氏染液联合使用。本产品以进口的姬姆萨色素、甲醇为主要原料,含本公司特有衬染剂,经研磨配制而成,能呈现出清晰的细胞染色效果,经常用于组织切片、血液和细胞涂片、细菌、染色体显带、原生动物寄生虫等染色。嗜酸性颗粒为碱性蛋白质,与酸性染料伊红结合,染粉红色,称为嗜酸性物质;细胞核蛋白和淋巴细胞胞浆为酸性,与碱性染料美蓝或天青结合,染紫蓝色,称为嗜碱性物质;中性颗粒呈等电状态与伊红和美蓝均可结合,染淡紫色,称为中性物质。
产品组成:
| 成分 | 规格 |
| 溶液A | 10ml |
| 溶液B | 100ml |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:常温运输,室温避光保存,有效期一年。
使用方法:(仅供参考)
一、一步法涂片染色
1. Giemsa工作液的配制:
按照溶液A:溶液B=1:9 混合,即取1 份溶液A(Giemsa Stain储存液,10×)加入到9份溶液B(磷酸盐缓冲液)中充分混匀,即成Giemsa工作液(此工作液不易保存,现配现用)。
2. 常规方法制备血液涂片或骨髓涂片,待涂片自然干燥后,用甲醇固定1~3min。
3. 将血液涂片或骨髓涂片放置染色架上,滴加Giemsa工作液覆盖涂片,室温滴染15~30 min。
4. 用自来水或蒸馏水从玻片一端缓慢的轻轻冲洗。
5.(可选)0.1%乙酸分化数秒。
6.干燥,镜检。
染色结果:
| 嗜酸性颗粒 | 粉红色 |
| 嗜碱性颗粒 | 紫蓝色 |
| 中性颗粒 | 淡紫色 |
二、两步法涂片染色
1. Giemsa工作液的配制:
按照溶液A:溶液B=1:4混合,即取1份溶液A(Giemsa Stain储存液,10×)加入到4份溶液B(磷酸盐缓冲液)中充分混匀,即成Giemsa工作液(此工作液不易保存,现配现用)。
2. 常规方法制备血液涂片或骨髓涂片,待涂片自然干燥后,用甲醇固定1~3min。
3. 将血液涂片或骨髓涂片放置染色架上,滴加Giemsa工作液覆盖涂片,室温滴染10~15min。
4. 加入等量磷酸盐缓冲液,轻轻晃动载玻片,室温静置15min。
5. 用自来水或蒸馏水从玻片一端缓慢的轻轻冲洗。
6.干燥,镜检。
染色结果:
| 嗜酸性颗粒 | 粉红色 |
| 嗜碱性颗粒 | 紫蓝色 |
| 中性颗粒 | 淡紫色 |
三、组织切片染色
1.Giemsa工作液的配制:
按照溶液A:溶液B=1:9混合,即取1份溶液A(Giemsa Stain储存液,10×)加入到9份溶液B(磷酸盐缓冲液)中充分混匀,即成Giemsa工作液(此工作液不易保存,现配现用)。
2.新鲜组织立即置于Regaud固定液(按3%重铬酸*:甲醇=4:1 配置,用前混匀,1-2天即失效)固定2天,期间更换1次固定液。
3.3%重铬酸*固定1天。
4.流水冲洗16个小时或过夜。
5.照常规脱水、包埋。
6.切片厚度约为5μm,常规脱蜡至水。
7.蒸馏水清洗2次,每次1~2min。
8.入含Giemsa工作液染缸,浸染18~24h。
9.蒸馏水稍清洗。
10.0.5%乙酸清洗1~2min。
11.自来水稍微冲洗。
12.用无水乙醇迅速脱水3次,每次5~10s。
13.二甲*透明,中性树脂封固。
染色结果:
| 细胞核 | 蓝色至紫色 |
| 细胞质 | 淡蓝色 |
| 嗜铬细胞 | 黄绿色 |
| 结缔组织 | 淡红色 |
注意事项:
1.血液涂片或骨髓涂片应厚薄均匀,否则影响染色效果。
2.涂片染色中Giemsa染色后,请勿先去除染液或直接对涂片用力冲洗。
3.如果染色过深或过浅,应调整染色时间或染色液的浓度。
4.Giemsa涂片染色和组织切片染色中,pH值对染色有一定影响,载玻片应清洁、无酸碱污染,否则影响染色效果。
5.染色液经稀释后液面应金属光泽则表示染液有染色作用,否则染色液可能失效。
6.Giemsa组织切片染色中,染色后需用大量0.1~0.5%乙酸急速冲洗,避免浮面沉淀物污染切片后难以洗脱。
7.0.5%乙酸分化常用于Giemsa组织切片染色,如有必要亦可用于细胞涂片,但其浓度应适量下调。0.5%乙酸分化切片时,切片呈粉红色即可终止。
8.组织切片染色中,无水乙醇脱水要迅速,否则切片亦褪色。
9.本染色液可重复使用,但不能多次重复,若有沉淀物应过滤后使用。
Southern封堵液(NC专用)哪里卖关键词:Southern Blocking Buffer (NC),BTN120676,Southern封堵液,NC专用,Southern封堵液(NC专用)
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文献和实验大于 109 计数/分/μl。六、杂交Southern 杂交一般采取的是液-固杂交方式,即探针为液相,被杂交 DNA 为固相。杂交发生于一定条件的溶液(杂交液)中并需要一定的温度,可以用杂交瓶或杂交袋并使液体不断的在膜上流动。杂交液可以自制或从公司购买,不同的杂交液配方相差较大,杂交温度也不同。下面给出的为一杂交液配方:PEG 6000 10%;SDS 0.5%;6×SSC;50% 甲酰胺。 该杂交液的杂交温度为 42 ℃。1.预杂交NC 膜浸入 2× SSC 中 5 min,在杂交瓶中加入杂交
2×SSC液中5min,在杂交瓶中加入杂交液(8cm×8cm的膜加5ml即可),根膜的背面贴紧杂交瓶壁,正面朝向杂交液。放入42℃杂交炉中,使杂交体系升到42℃。取经超声粉碎的鲑鱼精DNA (已溶解在水或TE中)100℃加热变性5min,迅速加到杂交瓶中,使其浓度达到100ug/ml。杂交4h。鲑鱼精DNA的作用是封闭NC膜上没有DNA转移的位点,降低杂交背景、提高杂交特异性。 2.杂交 倒出预杂交的杂交液,换上等量新的已升温至42℃的杂交液,同样加入变性的鲑鱼精DNA。将探针
。室温或37℃ 1hr。 4. 加50μl 终止缓冲液终止反应。 标记后的探针可以直接使用或过柱纯化后使用。由于a-32P的半衰期只有14天,所以标记好的探针应尽快使用。探针的比活性最好大于109计数/分/μl 六、杂交 Southern 杂交一般采取的是液-固杂交方式,即探针为液相,被杂交DNA为固相。杂交发生于一定条件的溶液(杂交液)中并需要一定的温度,可以用杂交瓶或杂交袋并使液体不断的在膜上流动。杂交液可以自制或从公司购买,不同的杂交液配方相差较大,杂交温度也不同。下面给出
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