北京磷酸化蛋白纯化试剂盒现货供应

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名称：北京磷酸化蛋白纯化试剂盒现货供应
品牌：百奥莱博
产地：国产|进口
编号：BTN130883

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·XTT细胞增殖与细胞毒性检测试剂盒
编号：BTN140635
英文名称：XTT Cell Proliferation And Cytotoxicity Detection Kit
规格：500次
XTT能被活细胞里的线粒体脱*酶降解而产生橙黄色水溶性的甲臜，通过测定甲臜的光谱吸收，进而可以测定细胞的增殖情况。XTT与MTT同属四唑氮衍生物，它们检测细胞活性的反应原理相似，原理图如下：


产品特点：
1．盒灵敏度，可检测低细胞密度样品，检测结果的重复性优于MTT。
2．操作简便、快捷。可直接加入到检测平板。在96-孔板中检测时，无需洗涤或收获细胞，免去溶解步骤。
3．无放射性。不需要配制液闪混合物，也不需要处理废弃物。
4．与MTT相比，使用更安全。不需要使用挥发性的有机溶剂来溶解甲基产物。

试剂盒组成：

 

成分	规格
溶液A	5ml
溶液B	50ml
说明书	1份

储存条件：低温运输、-20℃保存(但溶液B也可以常温运输和保存)，有效期一年。

使用方法：
下面操作是检测细胞毒性的试验，其他应用跟此类似或更简单(如生长曲线试验)，操作步骤可以以此为基础稍作修改即可，故不再赘述。

㈠、接种细胞
1．按常规胰酶消化法消化汇合的单层细胞，收集到含血清的培养基中。
2．200g离心5分钟收集细胞沉淀。
3．用培养基重悬细胞沉淀，制备成单细胞悬浮液并计数。
4．将细胞稀释到2.5×10³个/mL～5×10⁴个/mL之间(需要根据细胞的生长速度决定)，如果不知道生长数度，一般可以稀释到1×10⁴个/mL。
5．将足够量的细胞悬液转移到培养皿中(便于用排枪取样)。一个96孔板的MTT检测需要约20mL的细胞悬液。
6．用排枪在96孔板除的第2-11列各孔正中央加入200μL细胞悬液(对正常细胞)。如果是肿瘤细胞，则加入100μL肿瘤细胞悬液和100μL培养基(总体积为200μL)。
 注意：一定要把细胞加在孔的正中，否则细胞会聚集在孔的角落处，影响试验。
7．用排枪在96孔板除的第1和第12各孔中加入跟细胞悬液等体积的培养基。第1 列各孔将作为+培养基-细胞+MTT对照(用于测OD时调零)，第12列加培养基的作用是减少边缘效应对第11列反应的影响。
8．按常规细胞培养方法在37℃和5% CO2条件下孵育1-3天，使细胞进入指数生长期。

㈡、药物处理
9．用培养基将药物稀释到8个待测浓度(如果不知道待测浓度，则需要预试验确定)，一般一种药物需要做3块平行板。
10．去除第2到第11列(共10列)各孔中的培养基(不要触动细胞)，保留第1 列和第12列各孔中的培养基。
11．在第2和第11列(共2列)的各孔中加入200μL新鲜培养基，这些孔将作为+培养基+细胞-药物的对照。
12．在第3到第10列(共8列)各孔中加入8个浓度梯度的待测药物，每列加入一个浓度的药物。
13．按常规方法把96孔板继续放在37℃和5% CO2条件下孵育一定的时间，此段时间即为药物处理细胞的时间，由用户自己决定。
14．处理结束后去除第2到第11列(共10列，均含细胞)所有孔中的培养基，并再加入100μL新鲜培养基。
15．每天换培养使细胞数量扩增2-3倍(所需时间随细胞不同而不同)。

㈢、存活细胞计数
16．在生长末期，去除第1到第11列各孔中的培养基后，再加入100μL新鲜培养基和10μL溶液A(含MTT成分)，用锡箔包裹住96孔板后放在37℃和5% CO2条件下继续培养4-8小时。
 注意：溶液A在低温情况下会凝固，使用前请室温放置或20-25℃水浴至全部溶解，摇匀后使用。MTT有致癌性，一定要带手套操作。
17．小心吸弃孔内培养基(含溶液A)。由于培养基可能会影响光吸收，最好尽可能去除。
18．每孔加入100μL溶液B，置摇床上低速振荡10分钟，使MTT形成的formazan结晶物充分溶解。
19．由于产物不稳定，故需要立即在酶联免疫检测仪上选择490nm测定吸光度。
 注意：用第1 列各孔(+培养基-细胞+MTT对照)调零。
20．计数同样处理的各次重复的平均值。
21．以药物浓度为横轴，以吸光度为纵轴绘制曲线。由于各处理吸光度绝对值差别很大，一般需将其转化成生长抑制率(以不加药物的第2和第11列各孔数据的平均数作为100%)，这样便于计算出IC50，用于各种药物处理效果的比较。
 注意：如果测生长曲线，则以时间为横轴。正常生长曲线一般呈现S型，具有促进作用的则斜率加大。


北京磷酸化蛋白纯化试剂盒现货供应关键词：Phosphorylated proteins purification kit ,BTN130883,磷酸化蛋白纯化试剂盒

L-天冬*酸 Indigo 56-84-8
BTN131210 耐热型MMLV逆转录酶(H-) Thermal Stable MMLV Reverse Transcriptase(H-)
2,4-二甲基吡*(代"咯") Maleic hydrazide potassiu*(代"m") salt 625-82-1
D-组*酸 D-Phenylalanine 351-50-8
BL0819 HRP标记兔抗牛IgG抗体
ARB11948 大鼠I型前胶原N端前肽(PINP)含量检测 Rat procollagen i n-terminal Peptide,pinp ELISA KIT
玉米浆 NAC 66071-94-1
PY02-054  高盐察氏培养基  250克  
酸性品红 DL-Pyroglutamic acid 3244-88-0
ARB11791 人碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)含量测试 Human basic fibroblast growth factor,bfgf ELISA KIT
SJ0346 HydroxyquinolineHcl 8-羟基喹*(代"啉")硫*(代"酸")盐
塔格糖 Rnasin Inhibitor 87-81-0
BTN70804 一步法单菌落质粒 DNAOUT One-Step Single Colony Plasmid DNAOUT
2,5-二羟基*甲*(代"酸") Fmoc-D-Ala-OH 490-79-9
ARB13800 豚鼠免疫球蛋白G2(IgG2)含量检测 Guinea pig immunoglobulin g2,igg2 ELISA KIT
2,2"-联吡*(代"啶") DTPA 366-18-7
北京磷酸化蛋白纯化试剂盒现货供应关键词：Phosphorylated proteins purification kit ,BTN130883,磷酸化蛋白纯化试剂盒

3-(4-(二甲基*基)*基)-2-丙*(代"烯")醛 Luminol sodiu*(代"m") salt 6203-18-5
72-18-4 L-Valine  L-缬*酸
PY02-170  支原体琼脂培养基基础  50克  
BTN131017 乙酰化牛血清白蛋白 Bovine Serum Albumin, Acetylated
ARB10331 人内脏脂肪特异性丝*酸蛋白酶抑制剂(vAspin)含量测试 Human visceral adipose-specific serine protease inhibitor,vaspin ELISA KIT
ARB10266 人儿茶酚胺(CA)酶标法分析 Human catecholamine,ca ELISA KIT
ARB11275 人骨桥蛋白(OPN)ELISA检测服务 Human osteopontin,opn ELISA KIT
L-异亮*酸 Parafuchsin hydrochloride 73-32-5
ARB13490 鸡热休克蛋白70(HSP-70)Elisa分析 Chicken heat shock protein 70,hsp-70 ELISA KIT
L-甲状腺素 GGTP 51-48-9
ARB10385 人可溶性CD30配体(sCD30L)酶联免疫定量检测 Human soluble cluster of differentiation 30 ligand,scd30l ELISA KIT
BTN3674 一管式病毒DNAOUT One-Tube Viral DNAOUT
ARB11562 人流感病毒抗体IgG(FLU)elisa检测说明书 Human influenza viruses igg,flu ELISA KIT
ARB13022 小鼠谷胱甘肽-过氧化物酶(GSH-PX)尿液中含量检测 Mouse glutathione peroxidase,gsh-px ELISA KIT
ARB12629 大鼠趋化因子(frActAlkIne/CX3CL1)Elisa分析 Rat fractalkine/cx3cl1 ELISA KIT
ARB10675 人血管紧张素Ⅵ(ANGⅥ)ELISA检测服务 
BTN51206 Taq DNA聚合酶 Taq DNA Polymerase

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