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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
常温运输及保存,保存期为两年
- 保质期:
运输及保存,保存期为两年
- 英文名:
Acid-Washed Glassbeads(200μm)
- 库存:
461
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产供应酸洗玻璃珠(200μm)批发,我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂,价格优惠,欢迎广大科研工作者垂询订购。
名称:酸洗玻璃珠(200μm)批发
产地:国产|进口
编号:BTN100307B
英文名:Acid-Washed Glassbeads(200μm)
规格:10g
本品是用浓酸充分洗涤后的玻璃珠,它是玻璃珠法破碎细菌和真菌的必备成分,主要用于从具有坚硬外壁的微生物细胞(如真菌孢子、酵母细胞、结核细胞等)中提取DNA、RNA和蛋白质大分子,因为用其他方法,包括酶解方法都很难沉底破碎具有坚硬外壁的微生物细胞。
产品特点:
1. 经过充分的酸洗,免去用户接触具有腐蚀性的浓酸。
2. 用本产品破碎具有坚硬外壁的微生物细胞,属于物理方法,不但比温和的化学破壁法普适性更好、重复性更好,同时不需要使用酶,因此不容易被酶中的外源核酸或蛋白质污染。
3. 用玻璃珠破碎法提取一个样品只需要10余分钟时间,非常快捷。注意:本产品需要跟本公司提供的裂解液、上柱液、离心吸附柱等配合使用才能用于核酸纯化。
4.一次可以处理5mL的微生物样品。
5. 本系列产品有各种规格、适用于不同材料。具体请参考下表:
| 编号 | 玻璃珠直径 | 最适用途 |
| BTN100307A | 100μm | 作为超声破碎细菌时的添加物 |
| BTN100307B | 200μm | 破碎细菌 |
| BTN100307C | 400μm | 破碎酵母(如酿酒酵母) |
| BTN100307D | 800μm | 破碎霉菌、孢子等 |
储存条件:常温运输及保存,保存期为两年。
使用方法:
以我公司玻璃珠法柱式真菌DNA提取试剂盒(BTN100303)为例:离心收集1-5mL过夜培养的真菌细胞,加入0.5mL溶液A和体积相当于0.5mL的、直径为400μm玻璃珠(大约0.5克),振荡器上以最高速度振荡10分钟,,再加入0.5mL溶液B,震荡2分钟,2000rpm离心2分钟,在上清中加入3倍体积的溶液C,上柱,用通用洗涤液洗两次,干甩一次,最后用50-100μL DNA洗脱液洗脱基因组DNA待用。
使用效果:
图注:使用本产品C型(BTN100307C)提取3mL过夜培养的毕赤酵母菌液,最后用50μl DNA洗脱液洗脱,5μl用于琼脂糖电泳。电压300V,电泳时间5分钟,染料为绿如蓝,缓冲液为SuperBuffer。
关于酸洗玻璃珠(200μm)批发的更详细说明,请致电我公司咨询,我们将以最饱满的热情为您提供解答,此外,我公司专业供应下列产品:
·柱式藻类RNA大量提取试剂盒
编号:BTN120504
英文名称:Algae RNA Column large-scale extraction kit
规格:5次
本试剂盒是在本公司柱式藻类RNA提取试剂盒(BTN120503)的大提升级产品,跟柱式藻类RNA提取试剂盒相比,它具有下列特点:
1.样品处理量大,最多可以处理50mL液体藻类培养物。
2. 操作简单快捷,整个过程只需要约30分钟。
3. RNA 纯度高,OD260/280一般都在2.0左右,可直接用于RT-PCR、Northern杂交、microarray hybridization、cDNA 合成等。
4. RNA产量高,一般在20-70μg/mL液体藻类培养物(约2.0×107个细胞)。非酶细胞破裂法,适用于各种形态的藻类和各个种属的藻类。
试剂盒组成:
| 成分 | 规格 |
| 溶液A | 50ml |
| 溶液B | 50ml |
| 溶液C | 150ml |
| 溶液D | 50ml |
| 大提离心吸附柱 | 5套 |
| 通用洗柱液 | 100ml |
| RNA 洗脱液 | 10ml |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:常温运输,4℃保存,有效期一年。
使用方法:
1. 将50mL液体藻类培养物在塑料离心管中5000-7,000rpm 4℃离心1分钟,并弃尽液体培养基(可以分多次离心)。
2. 加入10mL溶液A并充分吹打混匀。注意:溶液A存放时容易产生沉淀,如果有沉淀,用前请置于65℃融化并充分摇晃均匀。
3. 加入10mL溶液B,剧烈振荡30秒。
4. 65℃保温5分钟。注意:不要超过5分钟,否则RNA 容易降解。
5. 5000-7,000rpm 4℃离心3~5分钟,转移上清到一自备的、干净的50mL塑料离心管中。
6.在上清液中加入2mL自备的*仿,充分振荡30秒混匀。
7. 4℃ 5000-7,000rpm离心3~5分钟,转移上清液到一自备的、干净的50mL塑料离心管中。
8. 加入相当于上清液(约10mL左右)3倍体积的溶液C和1倍体积的溶液D,充分混匀。如果上清为10mL,则加入30mL溶液C和10mL溶液D。
9. 将混合液分多次转移到离心吸附柱中,每次转移后需要室温放置2-3分钟以让RNA跟吸附膜充分结合,然后5000-7,000rpm室温离心30-60秒,弃收集管中的穿透液,然后再加入后一批混合液,重复操作,直到混合液全部挂柱。
10. 第一次洗涤:将10mL 通用洗柱液加到离心吸附柱中,室温离心半分钟,弃收集管中的穿透液。
11. 第二次洗涤:一次洗涤一般足够去除杂质,但如果样品OD260/280 比值不高,可以再用10mL 通用洗柱液重复上步洗涤一次。
12.室温离心空柱子(带收集管)半分钟。此步十分重要,否则残留的通用洗柱液会影响RNA的使用。
13. 将离心吸附柱转移到一自备的RNase-free 50mL塑料离心管中,加入1mL RNA 洗脱液。
14.室温离心半分钟,离心管中溶液即为RNA样品,可以立即使用或存放于-80℃待用。
15. RNA完整性的电泳检测:
注意:普通DNA上样液不含变性剂,更没经过去RNase处理,所以最好不要用于RNA电泳。
16. RNA产量和纯度产率测定:
将5-10μL RNA 溶于TE缓冲液中(pH7.5-8.2 之间)检测其在OD260的光吸收。通过光吸收可以得出RNA浓度(1 OD260的RNA=40μg/mL),进而计算出RNA的产量(浓度×体积)和产率(RNA产量/细菌用量)。注意不要将RNA 稀释在DEPC 水中检测OD260和OD280,否则光吸收比在TE中测得的低10%-15%;也不要稀释过度,使OD读数在仪器的有效范围之外,这样得到的OD 比值没有意义。
疑难解答:
Q:上样孔里的红色荧光物一定是污染的基因组DNA 吗?
A:不是。用TAE或TBE电泳液和非变性胶电泳RNA时容易产生此现象,百奥莱博初步研究发现大部分红色荧光物是变性不充分的单链RNA 通过碱基互补或通过硼*(代"酸")络合(如果使用TBE作电泳液的话)形成的复合物,加RNase处理后,这些红色荧光物一般会消失。为避免此现象,建议最好使用甲醛变性胶电泳。如果需要使用非变性胶,也必须在上样前使RNA变性。使用百奥莱博优化的上样/变性/染色三用溶液RNAload可以使RNA在非变性胶上电泳时也有较好分辨率。使用非变性胶时,可以使用TAE或超快电泳液SuperBuffer-2,最好不要使用TBE缓冲液,因为TBE中的硼*(代"酸")能与RNA的多羟基形成复合物,RNA 很难形成锐利的条带。
Q:如何确认和去处除污染的基因组DNA?
A:如果怀疑有DNA污染,可以用RNase处理RNA样品,然后再电泳。如果上样孔里的红色荧光物不消失,则表示是基因组DNA污染。进一步确认可以使用PCR扩增法。去除污染的DNA可以使用5分钟柱式DNA 清除剂、非酶的DNA 去除剂DNA Scavenger或RNase-free DNase,由于RNase-free DNase一般都有残留的RNase污染,所以必须严格按照厂家提供的使用说明书进行操作。
酸洗玻璃珠(200μm)批发关键词:酸洗玻璃珠(200μm),BTN100307B,Acid-Washed Glassbeads(200μm)
CYB164054 兔抗大鼠IgG(1:500~2000)-HRP
莫能菌酸* CMS 22373-78-0
CBZ-L-异亮*酸 DL-Homocysteine 3160-59-6
ARB10149 人Rho关联含卷曲螺旋蛋白激酶2(Rock-2)ELISA检测服务 Human rho-associated coiled-coil containing protein kinase 2,rock-2 ELISA KIT
ARB12337 大鼠间羟去甲肾上腺素(NMN)酶免分析 Rat normetanephrine ,nmn ELISA KIT
SJ0679 Marker Ⅴ
ARB10810 人抗丝集蛋白抗体(AFA)ELISA代测服务 Human anti-filaggrin antibody,afa ELISA KIT
二十七烷 L-Asparagine Monohydrate 593-49-7
F030511 FITC标记羊抗乙肝核心抗原抗体 Polyclonal Goat Anti-HBcAg*FITC
ARB12616 大鼠淋巴细胞趋化因子(Lptn/LTN/XCL1)elisa测定使用说明书 Rat lymphotactin,lptn/ltn ELISA KIT
ARB12858 小鼠分泌型免疫球蛋白A(sIgA)含量检测 Mouse secretory immunoglobulin a,siga ELISA KIT
F030626 FITC标记兔抗大鼠IgG抗体 Rabbit Anti-Rat IgG*FITC
PY01-165 亚甲基蓝 ind 25克
SJ0329 GTP xNa 5"-三磷酸鸟苷*盐
ARB10961 人免疫反应性生长激素(IrGH)含量测试 Human immunoreactive growth hormone,irgh ELISA KIT
ARB10846 人抗组织转谷*酰胺酶抗体IgA(tTG-IgA)ELISA代测服务 Human anti-tissue transglutaminase iga,ttg-iga ELISA KIT
CYB165012 生物素化羊抗人IgA
ARB12811 小鼠乙型肝炎e抗原(HBeAg)含量测试 Mouse hepatitis b virus e antigen,hbeag ELISA KIT
9036-06-0 PronaseE 链霉蛋白酶E
23491-45-4 Bis Benzimide Hoechst NO33258 荧光染料
酸洗玻璃珠(200μm)批发关键词:酸洗玻璃珠(200μm),BTN100307B,Acid-Washed Glassbeads(200μm)
ARB11560 人流感病毒A(FLU A)Elisa分析 Human influenza viruses a,flu a ELISA KIT
ARB10717 人色*酰tRNA合成酶(WARS)Elisa方法检测 Human tryptophanyl-trna synthetase,wars ELISA KIT
ARB11851 人凝胶原蛋白(gelson)酶免分析 Human gelson ELISA KIT
150-25-4 BICINE N,N-双(2-)甘*酸
ARB14055 猴载脂蛋白B100(Apo-B100)尿液中含量检测 Monkey apoprotein b100,apo-b100 ELISA KIT
ARB13651 兔子雌二醇(E2)Elisa分析 Rabbit estradiol,e2 ELISA KIT
ARB10765 人抗IVIgG抗体ELISA代测服务 Human anti-ivigG antibody ELISA KIT
28718-90-3 4",6-二脒基-2-*基吲哚 DAPI
ARB10244 人乙型肝炎病毒X蛋白相互作用蛋白(HBXIP)含量测试 Human hepatitis b virus x interacting protein,hbxip ELISA KIT
BTN100539 胰凝乳蛋白酶抑制剂溶液 Chymostatin Solution
N-乙基-N-(3-磺丙基)-3-甲氧基**(代"胺")*盐 PPO 82611-88-9
ARB12296 大鼠抗甲状腺过氧化物酶抗体(TPO-Ab)血清中含量检测 Rat anti-thyroid-peroxidase antibody,tpo-ab ELISA KIT
PY01-069 β-环状糊精 250克
CYB162004 兔抗人纤维蛋白原(抗血清) 0.5ml
硫*(代"酸")* 2′-Azido-2′-deoxyuridine 10102-25-7
ARB12239 大鼠血管内皮细胞生长因子D(VEGF-D)定量分析 Rat vascular endothelial cell growth factor d,vegf-d ELISA KIT
BL0863 羊抗人IgA免疫血清 0.5ml
PY08-057 十六烷三甲基*化铵琼脂平板 9CM 10皿/盒,用于绿脓杆菌的选择性分离培养
我公司正在优惠促销DNA纯化等系列产品,期待您的咨询选购酸洗玻璃珠(200μm)批发。
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文献和实验1. 10ml菌液过夜培养至饱和(OD600值为2-3) 2. 离心沉降细胞(Sorvall中以2000rpm的速度),然后以冷的、等体积的无菌蒸馏水洗涤 3. 将细胞沉淀在200μl 裂解缓冲液中重悬浮,然后加入约300μl 玻璃珠和200μl的1:1苯酚:氯仿混和液 4. 漩涡摇匀1-2min 5. 加入200μl的 TE缓冲液,倒置混合6-10次。注意:从这步开始漩涡摇匀可能会剪切DNA 6. 在微型离心机中以13000rpm的速度离心样品5min
-100kDa蛋白。样品准备:需要准备Breaking 缓冲液(P60)及酸洗0.5mm玻璃珠。 细胞洗涤准备:(胞内或分泌表达) 1) 快速融化细胞沉淀,置于冰上。 2) 每1ml样品,加入100ul裂解缓冲液(细胞 上清)。 3) 加入等量的酸洗玻璃珠(0.5mm),通过置换来估算相等体积。 4) 涡旋30s,冰上孵育30s,重复8次。 5) 4度最大转速离心10min,将上清转移至干净的微量离心
裂解必需充分且操作迅速。裂解不完全会降低最后得率,因为一部分 RNA 会残留在未裂解的细胞中。细胞裂解之后要看不见颗粒状物质(结缔组织和骨除外)。在清洗和裂解细胞时最好在低温下操作,防止在操作过程中释放的内源 RNase 降解了 RNA。 4. 酵母和一些细菌由于细胞壁的特别结构,可以加入 Trizol 试剂同时加入无 RNase 的玻璃珠并剧烈振荡,使细胞裂解充分。2-8℃ 避光保存一年。 三、预备工作 RNA酶(Rnase)是导致 RNA 降解最主要的物质。此酶非常稳定,在一些极端
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