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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
常温运输及保存(溶菌酶需要-20℃保存)
- 保质期:
长期
- 英文名:
Bacteria DNA column extraction kit
- 库存:
565
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产销*(代"售")柱式细菌DNA提取试剂盒供应,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:柱式细菌DNA提取试剂盒
编号:BTN60802A
产地:国产|进口
品牌:百奥莱博
规格:50次
本试剂盒可以用于绝大多数革氏阳性和阴性细菌基因组DNA的快速提取。
试剂盒特点:
1. 操作简单,整个过程不到20分钟。
2.产率一般在5-20μg/mL过液培养的饱和菌液(108-109个细胞)。
3. OD260/280一般在1.8以上,可直接用于PCR、酶切、杂交等实验。
4. DNA片段长度一般在40-50 Kb左右。
5. 每次提取可以处理0.1-1.5mL的细菌,也可以使用菌落。
6. 价廉物美,与国外同类产品相比质量相当,但价格便宜。
7. 安全无毒,本试剂盒对人体无害,无腐蚀性和刺激性气味。
8. 本产品分A型(无溶菌酶,适用于革氏阴性细菌)和B型(含溶菌酶,适用于革氏阳性细菌)。
试剂盒组成:
| 成分 | A型 | B型 |
| 溶菌酶干粉 | 无 | 600mg |
| 溶液A | 15ml | 15ml |
| 溶液B | 7.5ml | 7.5ml |
| 溶液C | 30ml | 30ml |
| 离心吸附柱 | 50套 | 50套 |
| 通用洗柱液 | 50ml | 50ml |
| DNA洗脱液2.0 | 10ml | 10ml |
| 说明书 | 1份 | 1份 |
储存条件:常温运输及保存(溶菌酶需要-20℃保存),有效期一年。
使用方法:
注意:溶液A和溶液B容易产生沉淀,溶液B十分粘稠,均需要放置在65℃预热使沉淀溶解、粘稠度降低,用前充分摇匀。
一: 对革氏阴性细菌样品,只需用A型
1. 将0.1-1.5mL过夜培养的菌液转移到1.5mL离心管中,12000rpm室温离心1min沉淀细菌,弃上清。
2. 加入300μL预热的溶液A到细菌沉淀中,充分吹打均匀。
3. 再加入150μL预热的溶液B到离心管中,颠倒数次混匀。此时溶液中可能有白色丝状悬浮物产生。由于溶液B比较粘稠,可以采取称量方法取用,150μL约等于150-160mg。也可以将1mL枪头剪去一截再吸取。
4. 65℃放置3~5分钟。如果室温放置,DNA产量会降低10-20%。
5. 加入200μl自备*仿,震荡混匀10-30秒,此时溶液将呈乳白色。
6. 12000rpm室温离心2分钟。此时上清液将变得透明,中间层有白膜。小心转移上清液到一个新的1.5mL塑料离心管中,避免触及中间层的白膜。
7. 加入1.5倍体积(约0.7mL)的溶液C,颠倒混匀后全部转移到离心吸附柱中,室温放置至少2分钟。
8. 12000rpm室温离心1分钟,DNA将吸附在离心吸附柱的膜上,倒弃收集管中的穿透液。
9. 将0.5mL通用洗柱液加入离心柱中,12000rpm室温离心1分钟,弃穿透液。
10. 重复上步操作一次。
11. 空甩半分钟去除残留液体,将离心吸附柱转移到新的1.5mL离心管中。
12. 加50-100μL通用洗脱液,室温放置3~5分钟。
13. 12000rpm室温离心1分钟即得DNA溶液。
14. 由于本产品使用的离心吸附柱吸附DNA的能力较强,可以重复上步操作一次以便得到更多的DNA。
15. 直接取5-10μL电泳检测DNA,其余放冰箱备用。
二: 对革氏阳性细菌样品,需用B型(含溶菌酶)
1. 将0.1-1.5mL过夜培养的革氏阳性细菌12000rpm室温离心1分钟后,重悬于0.6mL溶菌液中(溶菌液配制:30mL无菌水+600mg溶菌酶,配制后最好分装成小管并放-20℃长期保存,每次只用一小管),颠倒混匀5-10次后放37℃保温至少30分钟(有的革氏阳性菌种可能需更长时间,自己摸索)。
2. 12000rpm室温离心10分钟,小心弃上清。
3.后续处理接上面的革氏阴性细菌提取步骤中的第2步。
三:其他注意事项
1.可以直接使用细菌菌落提取DNA,操作时直接将细菌菌落挑入到溶液A中,后续操作同上。
2.从单个菌落中提取到的DNA较少,所以只用30μL通用洗脱液洗脱。
使用效果:
图注:用本产品提取1.0mL过夜培养的E.coli Tg1细菌,DNA最后溶于100μL TE中,取20μL上样。M表示全长的λDNA,其余均为提取的样品DNA。
关键词:Bacteria DNA column extraction kit,柱式细菌DNA提取试剂盒,BTN60802A
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