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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
常温运输,4℃保存
- 保质期:
一年
- 英文名:
96 Microwell Plate Vrial RNAOUT
- 库存:
大量
- 供应商:
联迈生物
- 规格:
1次
本产品是在柱式病毒RNA纯化试剂的基础上开发的直接从液体病毒样品中提取 病毒RNA的96孔板高通量升级产品,本产品特点如下:
1. 高通量,一次可以同时处理96个样品,每个样品0.15 mL。
2. 操作简单,整个过程只需要20分钟左右。
3. 灵敏度高,RT-PCR检测病毒的最终灵敏度可以达到50拷贝/mL。
4. 安全无毒,不需要使用苯酚和氯等有机溶液。
5. 每个样品最多可以处理1.5 mL(但需要加上离心富集病毒的步骤)。
6. 与RT-PCR和荧光RT-PCR兼容。
7. 价廉物美,性价比远低于国外同类产品。
8. 适用于各种材料,包括血清、血浆、脑脊液、尿液、粪便、培养细胞上清液等 无细胞材料。
96孔板病毒RNAOUT(离心法)使用及效果
将0.1-0.15 mL液体样品加入到收集板的微孔中,再加入0.5 mL溶液A,充分 混合均匀,室温放置10分钟,将混合液全部转移到96孔板的吸附板中,套上收集 板后室温静置2分钟,离心1分钟,用500 μL通用洗柱液洗两次,干甩一次,将吸附 板套在另一新的收集板上,加50-100 μL RNA洗脱液,离心半分钟,即得纯化后的 RNA样品。
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文献和实验慢病毒简介慢病毒(Lentivirus)载体是以人类免疫缺陷I型病毒为基础发展起来的基因治疗载体。区别一般的逆转录病毒载体,它对分裂细胞和非分裂细胞均具有感染能力。在转染遗传物质到细胞基因组中的工作中,重组慢病毒载体是一个强大和有效的工具,该载体可以将外源基因有效地整合到宿主染色体上,从而达到持久性表达。在感染能力方面可有效地感染包括几乎所有的哺乳动物细胞、干细胞和原代培养的细胞,目前慢病毒系统已经被广泛应用到各种细胞系的基因过表达、RNA干扰、microRNA研究以及活体动物实验中,从而达到
分析实验。 解决方案 1. 血液越新鲜越好,在血液收集管中使用 RNA 稳定试剂来保存 RNA。 2. 血液 RNA 提取本质上是白细胞 RNA 提取,使用 Ficoll-Hypaque 密度梯度离心法回收单核细胞。 3. 去除抗凝剂和酶抑制剂。 4. 可采用专门用于血液样本的 RNA 提取试剂盒(如:QIAamp RNA Blood Mini Kit,货号:52304),其中含有高效的红细胞裂解液,在有效裂解细胞的同时也能防止其中释放出的大量 RNase 对后续 RNA 提取的影响。
为recA+,质粒DNA易发生突变,DH5α或JM109,XL1-blue菌株为重组缺陷性菌株,可稳定扩增已鉴定的重组质粒),扩增细菌并纯化质粒。 三、重组病毒质粒转导293细胞 1、293细胞培养:转导24小时前,以方瓶为例,接种2×106 293细胞于25cm2方瓶,使生长密度约50-70%.(也可以使用6孔或96孔板) 2、以PacI单酶切重组病毒质粒(转导25cm2方瓶约需4ugDNA),完全线性化后,乙醇沉淀,再以20 ul ddH2O溶解。 3、脂质体包裹质粒
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