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- 详细信息
- 技术资料
- 保存条件:
干冰运输、-80℃保存
- 保质期:
长期
- 英文名:
E.coli Rosetta(DE3)plysS Rosetta Competent Cell
- 库存:
706
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产销*(代"售")大肠杆菌Rosetta(DE3)plysS感受态细胞厂家现货,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:大肠杆菌Rosetta(DE3)plysS感受态细胞厂家现货
产地:国产|进口
规格:0.1mL*10
编号:BTN130558
Rosetta(DE3)pLysS是Rosetta(DE3)的衍生菌株,为高度严紧表达宿主菌,一般用于毒性含真核蛋白靶蛋白表达,lac透性酶突变,可以控制表达水平,提供稀有密码子tRNAs。抗性为*霉素(34μg/ml)。
基因型:F-ompT hsdSB(rB- mB-)gal dcm lacY1(DE3)plysS pRARE(CmR)。
储存条件:干冰运输、-80℃保存,有效期半年。
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大肠杆菌Rosetta(DE3)plysS感受态细胞厂家现货关键词:大肠杆菌Rosetta,DE3,E.coli Rosetta(DE3)plysS Rosetta Competent Cell,大肠杆菌Rosetta(DE3)plysS感受态细胞,BTN130558
·膦酰二肽溶液(10mg/mL)
编号:BTN130545
英文名称:Phosphoramidon Solution
规格:10mL
本品为10mg/mL的膦酰二肽水溶液,工作浓度为4-330μg/mL。膦酰二肽(N-(α-鼠李吡喃糖基膦酰胺)-L-亮*酸-L-色*酸),分子量是579.6,可溶于水,是一种来自微生物的蛋白酶抑制剂。可以特异性抑制*嗜热蛋白酶、胶原酶和微生物来源的金属内切蛋白酶。

储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期三个月。
·一站式DNA尿素-PAGE电泳套装
编号:BTN90317
英文名称:One-Stop DNA Urea-PAGE Pack
规格:30次
本品是专门用于DNA 尿素-PAGE电泳的一站式试剂盒。
产品特点:
1.一站式,即开即用,用户不需单独准备各种成分,十分方便。用户不需要单独准备各种成分。
2.可用于DNA 测序、AFLP、DDRT、TGGE和RNase 保护实验等。
3. 安全,免去了实验人员接触粉末状的剧毒物品丙*(代"烯")酰胺。
4.电泳后可直接用于银染、EB染色等实验。
产品组成:
| 成分 | 规格 | 保存 |
| 电泳级尿素 | 210g | 常温 |
| 电泳级丙*(代"烯")酰胺 | 77.34g | 常温 |
| 电泳级甲叉双丙*(代"烯")酰胺 | 2.67g | 常温 |
| 10×TBE电泳液 | 250ml | 常温 |
| 电泳级TEMED | 1.5ml | 4℃,避光 |
| 电泳级过硫*(代"酸")铵 | 1g | 常温 |
| 2×尿素-PAGE上样液 | 1ml | -20℃ |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:常温运输,保存条件见上表,有效期一年。
使用方法:
一、PAGE浓度和交联度的选择指南
尿素-PAGE一般推荐用29:1(丙*(代"烯")酰胺:甲叉双丙*(代"烯")酰胺)的交联度,
在此条件下,DNA片段和最适PAGE浓度对应关系如下:
| 单链DNA长度 | 最佳PAGE浓度 | 二甲*青FF迁移率 对应的长度 |
*酚蓝的迁移率 对应的长度 |
| 50-400nt | 8% | 160nt | 45nt |
| 200-1000nt | 5% | 260nt | 65nt |
| 750-2000nt | 3.5% | 460nt | 100nt |
二、制备尿素-PAGE胶
1. 配制尿素-PAGE胶(这是配制100mL胶的用量,配制更大体积的胶则需以此用量为基础按比例增加)
A:新鲜配制10%的APS(过硫*(代"酸")铵):按每0.1 克过硫*(代"酸")铵干粉加1mL超纯水的比例将水加到装有硫*(代"酸")铵干粉的1.5mL EP 管中,摇晃到粉末全部溶解。配制好的10%的APS溶液可以在4℃存放一周。
B:新鲜交联度为29:1的40%的丙*(代"烯")酰胺-甲叉双丙*(代"烯")酰胺溶液(AB溶液,下同):在装有77.34 g电泳级丙*(代"烯")酰胺干粉的瓶中加入约120mL自备的去离子水,然后将全部甲叉双丙*(代"烯")酰胺加入到同一塑料瓶中(可以加少量丙*(代"烯")酰胺溶液冲洗出来以避免粉末有毒粉末飘出。甲叉双丙*(代"烯")酰胺溶解度低,不会溶解在这少量溶液中)。充分摇晃混匀后所得溶液即40%的AB溶液。配制40%而非30%的原因是这样可以在下步留出足够空间加尿素。
C:配尿素-PAGE胶:在一个250mL的三角瓶中,先按下表的用量加入去离子水、40%AB溶液和10×TBE缓冲液。丙*(代"烯")酰胺单体溶液具有神经毒性,一定要戴手套操作。
| PAGE胶浓度 | 各成分用量(尿素为克,其余单位是mL) | 补水到(mL) | ||
| 尿素 | 40%AB溶液 | 10×TBE缓冲液 | ||
| 5% | 42 | 12.5 | 5.0 | 100 |
| 6% | 42 | 15.0 | 5.0 | 100 |
| 7% | 42 | 17.5 | 5.0 | 100 |
| 8% | 42 | 20.0 | 5.0 | 100 |
| 9% | 42 | 22.5 | 5.0 | 100 |
| 10% | 42 | 25.0 | 5.0 | 100 |
| 11% | 42 | 27.5 | 5.0 | 100 |
| 12% | 42 | 30.0 | 5.0 | 100 |
D:搅拌溶解,然后用滤纸过滤。最好能抽真空10-15分钟以去除溶液中的氧气(氧气能抑制丙*(代"烯")酰胺聚合反应),无条件也可以不脱氧。
E:加入500μL 10%APS和100μL TEMED,迅速摇匀后倒胶。
F:在胶的液面距离达到顶部时停止灌胶,插入梳子。
G:室温聚合30-60分钟(低温抑制聚合反应)。
H: 拔出梳子,用0.5×TEB液冲洗加样孔。
三、样品准备
2. 对一般样品、测序样品、微卫星DNA、AFLP样品、DDRT样品、RPA样品:将样品跟上样液1:1 混合,95℃ 3分钟变性,然后放冰上待用。
3. 对TGGE样品:可以直接上样。
四:电泳
4. 将凝胶板固定在电泳装置上,往上槽和下槽中加入足够0.5×TEB电泳液。
5.预电泳5-30分钟将冰上放置的样品上样。
6.连接电源线,打开电源开关。根据胶的大小选择功率(固定功率可以固定产热,这样不容易发生过热而使胶板破裂的现象。如果固定电流或电压,产热都将随电泳时间而变化,不好控制)。对小胶一般用5-6W 固定功率,大胶用15-25W 固定功率。
7. 终止电泳,取出凝胶进行后续的处理(如银染)。注意:如果银染,必须延长固定时间以便让洗出尿素,否则残留尿素会干扰后面的银染。
大肠杆菌Rosetta(DE3)plysS感受态细胞厂家现货关键词:大肠杆菌Rosetta,DE3,E.coli Rosetta(DE3)plysS Rosetta Competent Cell,大肠杆菌Rosetta(DE3)plysS感受态细胞,BTN130558
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