北京dUTP溶液，100mM品牌

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

百奥莱博专业生产销*(代"售")北京dUTP溶液，100mM品牌，我公司供应的分子生物学试剂品类齐全，且具有优势价格，欢迎新老客户垂询订购。

名称：北京dUTP溶液，100mM品牌
品牌：百奥莱博
英文名：dUTP Solution，100mM
产地：国产|进口
编号：BTN131038
dUTP(2"-脱氧-5´-三磷酸尿苷)在PCR和RT-PCR反应中替代dTTP，从而可以防止前面扩增的干扰。PCR反应中dUTP替代dTTP，导致产物中含有尿嘧啶，这种掺入适用于很多应用。将尿嘧啶-N-糖基酶 UNG(有时称为UDG)加入到PCR反应中，可切除任何污染PCR产物的尿嘧啶，从而避免假阳性的形成。

储存条件：低温运输和-20℃保存、有效期一年。

北京dUTP溶液，100mM品牌极具性价比，此外，我公司正火爆促销以下产品：

·5M异硫*酸胍溶液(RNase-free)
编号：BTN100883
规格：250mL

·重组蛋白L
编号：BTN131082
英文名称：Peptostreptococci protein L
规格：1mg
本品为重组蛋白L，纯度大于90%，带6×HIS标签，分子量为40kD。

储存条件：-20℃保存，有效期1年。

·Oligo(dT)再生溶液
编号：BTN130976
英文名称：Oligo(dT) Recharger
规格：250mL
本产品是针对Oligo(dT)纤维素再生的溶液，可有效去除亲和基质中的残留RNA和其他杂质，恢复Oligo(dT)纤维素基质的结合能力。

储存条件：常温运输和保存、避光。有效期一年。

·中pH缓冲液套装
编号：BTN100829
英文名称：Medium pH Buffer Set
规格：30次
Native-PAGE，非变性聚丙*(代"烯")酰胺凝胶电泳是目前电泳法分离非变性蛋白质的主要方法，实验过程杜绝变性剂接触目的蛋白质，常用于同工酶的鉴定和提纯。本产品可快速制备分离胶，不含SDS，并确保配制分离胶的精确pH值。

产品组成：

 

成份	规格(30次*)
4×浓缩胶配胶液(pH5.5)	100ml
4×分离胶配胶液(pH7.5)	200ml
中pH电泳液(pH7.0)	10L(干粉)
5×中pH上样液	1ml
使用手册	1份

*注：1次是指的一次mini-Gel电泳

储存条件：常温运输及保存(5×中pH上样液需要-20℃保存)，有效期为一年。


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·3´RACE试剂盒
编号：BTN101104
英文名称：3´-RACE Kit
规格：10次
研究真核基因的最基础的工作之一就是确定其转录终止位点，目前最通用的方法是3´-RACE法，RACE(Rapid Amplification of cDNA Ends)是Frohman发明的、通过PCR快速克隆cDNA末端的技术，它在不建立cDNA文库的前提下，利用已知cDNA序列设计引物，通过往两端延伸和扩增获得其3´-端序列。本试剂盒就是根据3´-RACE原理而开发。RACE的原理如下图：


产品特点：
1. 即开即用，客户不需要单独准备各种材料。
2.反应条件经过精心优化，包括使用无RNase H活性的MMLV和优化的引物。

试剂盒组成：

成分	规格
MMLV逆转录酶-RI混合物(RNase H-，200U/μL)	10μl
MMLV Buffer(含dNTP)	50μl
PCR MagicMix 2.0(含酶和染料)	1.5ml
3´-RACE引物A(10μM)	10μl
3´-RACE引物B(10μM)	100μl
3´-RACE引物C(10μM)	100μl
RNase-Free水	1ml
说明书	1份

储存条件：低温运输、-20℃保存、有效期一年。

使用方法：

一、利用含Oligo(dT)的3´-RACE引物A进行逆转录
 注意：MMLV酶使用前必须短暂离心，因为它含50%甘油，及其粘稠，否则将取不到所需体积。
1.在一个PCR管中，加入以下组分：

成分	用量
Poly(A)RNA(或总RNA)	0.2-2μg(5μg)
3´-RACE引物A(10μM)	1μL
MMLV Buffer(含dNTP溶液)	5μL
RNase-Free水	补至19μL
合计	19μL

 注意：如果可能，最好使用Poly(A)RNA作为模板。
  65℃保温5分钟，展开RNA的二级结构，立即冰浴待用。
2. 再在上述PCR管中加入1μl MMLV逆转录酶-RI混合物(200U/μL)。
3. 37℃保温60分钟，42℃保温30分钟进行逆转录反应；然后50℃保温10分钟终止反应。
4. 加入0.5mL RNase-free水稀释上步得到的cDNA，冰浴待用。长期放置需要放-20℃保存。

二、利用基因专一性引物A和3´RACE引物B进行第一轮PCR
5. 用不同量的RT反应液(稀释后的cDNA)设置PCR(样品组最好设置用量梯度，单位：μL)。

成分	梯度1	梯度2	梯度3	梯度4
稀释后的cDNA	1	5	10	15
基因专一性引物A(10μM)	2.5	2.5	2.5	2.5
3´RACE引物B(10μM)	2.5	2.5	2.5	2.5
98℃ 5分变性RNA-cDNA杂交链，短暂离心后再加入下列成分
PCR MagicMix 2.0	25	25	25	25
RNase-free水	19	15	10	5
合计	50	50	50	50

6. 按下列条件进行PCR(注：应根据实际情况选择适当的退火温度)。
 第1次循环：52-60℃ 2分，72℃ 40分(此步的目地是合成第二链的cDNA，复性温度需要根据自备基因专一性引物A的Tm值进行优化，一般可以从55℃开始)。
 第2-30次循环：94℃ 1分钟，52-60℃ 1分，72℃ 3分(此步为PCR扩增，复性温度需要根据自备基因专一性引物A的Tm值进行优化，一般可以从55℃开始)。
 最后延伸：72℃ 15分
7. 取5μl的PCR反应液进行琼脂糖凝胶电泳以确认PCR扩增产物。若得到目的扩增产物需要用于后续实验，请于-20℃保存；若没有得到目的扩增产物，可按下列步骤进行巢式PCR反应。

三、利用基因专一性引物B和3´RACE引物C进行巢式PCR反应
8. 将上轮PCR产物(4管)均用水稀释稀释20倍，然后每管均用巢式PCR进行扩增。巢式PCR反应设置如下：

成分	用量
PCR MagicMix 2.0	25μl
上步得到的PCR反应液(稀释20倍后)	1μl
基因专一性引物B(10μm)	2.5μl
3´RACE引物C(10μm)	2.5μl
超纯水	补至50μL

9. PCR反应。按下列条件进行PCR：
第1-30次循环：94℃ 1分钟，52-60℃ 1分，72℃ 3分(复性温度需要根据自备基因专一性引物B的Tm值进行优化，一般可以从55℃开始)最后延伸：72℃ 15分
10.电泳检测。然后根据实验结果进行DNA测序或TA克隆。

注意事项：
1. 如果两轮PCR得到的非特异产物多，可以在RT反应是继续降低3´-RACE引物A的用量。
2.自备的基因专一性引物的GC含量最好跟3´-RACE引物B和引物C的一致，后者长度均为18nt，均含11个G(或C)，7个A(或T)。


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·生物素化的β-半乳糖苷酶
编号：BTN131097
英文名称：Biotin-β-Galctosidase
规格：100U
本产品为生物素标记的β-半乳糖苷酶，在免疫组化和免疫印迹应用中与ONPG一起使用。

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

活性单位定义：一个单位等于每分钟在37℃，pH7.3时水解1μmol ONPG。

·抑*肽酶溶液(5mg/mL)
编号：BTN130536
英文名称：Bestatin Solution
规格：5mL
本产品为5mg/mL抑*酶的甲醇溶液，工作浓度为40μg/mL(130μM)。抑*肽酶(Bestatin)，又称*肽酶抑制剂、乌*美司(ubenimex)，分子量是308.4，是一种竞争性的蛋白酶抑制剂，可抑制*肽酶B、白*酸*基肽酶、三肽*肽酶和哺乳动物细胞表面的*基肽酶等蛋白酶的活性，不能抑制羧肽酶。

储存条件：低温 运输，-20℃保存，有效期一年。

·液体样品RNA和DNA提取试剂盒
编号：BTN80929
英文名称：Liquid sample nucleic acids extraction kit
规格：50次
本试剂盒是专门用于从各种微量和痕量样品中提取DNA和RNA的试剂盒。

试剂盒特点：
1. 核酸的回收率高，可以达到90%以上，可以跟QIAGEN的同类产品媲美。
2.一管式操作，减少了样品污染的可能。
3.一站式套装，除样品外客户不需要准备任何试剂，降低了实验误差。
4. 安全无毒，不需要使用*酚和*仿等有机溶液。
5.可以处理各种形态的样品，包括液体样品，单个或少量的细胞，微小胚胎等等。
6.与PCR、荧光PCR、RT-PCR、荧光RT-PCR等后续反应兼容。
7. 试剂稳定，可以长期放置。

试剂盒组成：

成分	50T
溶液A	15ml
溶液B	25ml
溶液C	50ml
溶液D	5ml
说明书	1份

储存条件：常温运输，溶液A和溶液D需要4℃保存，溶液B和溶液C室温保存，有效期一年。溶液B和溶液C具有挥发性，使用后需要将瓶盖拧紧。

使用方法：
1. 将不超过0.1mL的样品转移到自备的1.5mL 旋盖塑料离心管中。
2. 加入0.3mL溶液A，盖上盖子后振荡3-5秒。
注意：溶液A用前需37℃-65℃水浴融化并充分摇匀后方可使用。
3.室温静置10分钟。
4. 加入0.4mL溶液B，盖上盖子后振荡3-5秒。
5. 15000g室温离心15分钟。强烈建议在离心管管壁上用记号笔做简单标记以区别离心面和向心面。
6.小心移弃上清。注意不要触及离心面管底的核酸沉淀。
7. 加入1.0mL溶液C，振荡数秒后15000g室温离心5分钟。
注意：将离心管放入离心机时一定要将离心面向外。
8.小心移弃上清。
注意不要触及离心面管底的核酸沉淀。
9. 短暂离心数秒。
注意：将离心管放入离心机时一定要离心面向外。
10.小心移弃残留上清(残留的溶液C会影响后续反应)。此时管壁(离心面方向)上将有可见的膜状沉淀。
11. 加入100μl溶液D，用移液枪仔细吹打离心管管底和管壁的膜状沉淀，使其溶解。溶解液如果混浊或有少量不溶物是正常现象，不溶沉淀物中就裹含有核酸。
12. 直接取适量样品用于PCR或RT-PCR，也可短期保存于-20℃或-80℃。

北京百莱博科技有限公司是核酸扩增(PCR)产品的专业生产供应销*(代"售")商，恭候您的咨询选购北京dUTP溶液，100mM品牌。