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- 详细信息
- 技术资料
- 保存条件:
常温运输及保存
- 保质期:
一年
- 英文名:
Column Humic Acid Scavenger
- 库存:
824
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产供应北京现货BTN60801型柱式腐殖酸清除剂怎么卖,我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂,价格优惠,欢迎广大科研工作者垂询订购。
名称:北京现货BTN60801型柱式腐殖酸清除剂怎么卖
英文名:Column Humic Acid Scavenger
品牌:百奥莱博
规格:30次
用绝大多数文献报道的方法从土壤或湖海沉积物中提取的DNA都含有棕黑色或黑色的腐殖酸的污染,用百奥莱博的土壤DNA提取试剂盒从泥碳(腐殖酸含量超过50%)等腐殖酸丰富的土壤样品中提取的DNA也有腐殖酸污染,它们往往对PCR等后续反应有极大的抑制作用。本产品专门用于从土壤DNA样品中清除腐殖酸污染。
产品特点:
1.去污染效果好,能使腐殖酸的浓度降低10倍以上。
2.DNA回收率高,一般都在80%以上。
3.操作过程简单快速,只需要10分钟。
4.扩容性好,可小规模操作,也可以大规模操作。
5.处理后的样品原液或稍微稀释后即可用于PCR。
试剂盒组成:
| 成分 | 规格 |
| 专用上柱液 | 9ml |
| 离心吸附柱 | 30套 |
| 通用洗柱液 | 30ml |
| DNA洗脱液 | 10ml |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:常温运输及保存,有效期一年。
使用方法:
1.将0.3mL专用上柱液与50μl或50μl以下的含腐殖酸的DNA溶液轻柔混匀。如果DNA溶液体积超过50μl,专用上柱液的体积需按1:6(DNA溶液:专用上柱液)的比例相应增加。不要剧烈震荡,否则DNA容易断裂。
2. 将离心管中的溶液转移到离心吸附柱中,套上收集管,放于离心管架上,静置3~5分钟,12000~15000g离心1分钟并倒掉收集管中的液体。若一次加不完,可分两次加入并离心。
3. 加入0.5mL通用洗柱液于离心柱中,12000~15000g离心1分钟,倒弃收集管中的废液。
4. 重复第3步操作1次。
5. 12000~15000g离心1分钟以去除离心柱中的残留液体。
6. 将离心柱置于一新的干净的离心管(自备)中,加入50μl通用洗脱液,静置3~5分钟,12000~15000g离心1分钟。
7.离心管底部所得溶液即为纯化的DNA溶液,可立即用于后续实验或者放冰箱长期保存。
使用效果:
图注:从泥碳(腐殖酸含量大于60%)中提取的DNA用本产品处理前(B)和处理后(A)的颜色对比。处理前OD340为4.0(4为所用分光光度计的上限,实际读数可能远高于4),处理后降低到0.3。处理前的原液、10倍和100倍稀释液均无PCR扩增,而处理后均可以扩增。
疑难解答:
Q: 如何判断提取的DNA没有腐植酸污染?
A:方法一是目测法,即看得到的溶液是否无色。如果呈淡棕黑色或淡黄色,说明可能是少量残留的未除尽的腐植酸。方法二是检测最大光吸收。注意:有腐植酸污染并不表示DNA不能使用,有的腐殖酸并不抑制PCR扩增。
Q: 腐殖酸的最大吸收波长是多少?
A:腐植酸(humic acid)是一大类呈棕黑色或黑色的物质,其结构千差万别,土壤中腐殖酸的组成和特点随土壤不同而不同,所以其最大吸收波长也各不相同。有的土壤的腐殖酸的最大吸收波长在260nm(见Appl. Environ. Microbiol.,63:4993,1997),有的则在340nm,所以用特定的波长测定OD值时波长的选定要根据土壤而决定。Sigma,Fluka等公司出售的腐植酸产品成分一般比较简单,其最大吸收波长不能推广到成分更为复杂的土壤腐殖酸样品。
Q:是否腐植酸都会抑制后续的DNA反应?
A:否,因为腐植酸是一大类物质的统称,他们的结构和特性各不相同,所以是否对后续反应有影响最好通过实验来验证。如果用提取的DNA溶液原液进行反应而反应没发生,而对照样品(已知的不含污染的DNA)能够发生,说明可能有抑制作用。
Q:除本方法外,还有什么有效方法去除DNA样品中的腐植酸?
A:可以先电泳,然后用超大片段胶回收试剂Magic Gel DNArc(BTN60706)纯化DNA,如此得到的DNA原液一般可以直接扩增。
Q:本产品与柱式DNArc有何区别?
A:本产品由柱式DNArc改进而来,主要区别一是使用了不同的上柱液,减少了硅胶膜对DNA的非特异吸附,更适用于微量DNA样品;二是上柱液中含有腐殖酸去除试剂,适合于土壤DNA样品。
Q:在用土壤DNA进行细菌专一性PCR时,为何没加DNA模版的阴性对照有扩增产物出现?
A:这是由于使用的Taq DNA聚合酶一般从E.coli表达菌株中提取,提取过程中污染了E.coli的基因组DNA,而使用的广谱细菌专一性引物可以识别所有细菌DNA基因组DNA模版,所以会产生扩增。建议使用高质量的Taq DNA聚合酶。
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