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- 详细信息
- 技术资料
- 保存条件:
常温运输和保存
- 保质期:
一年
- 英文名:
Octyl-β-Glucoside
- 库存:
296
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产销*(代"售")辛甲基β葡糖苷销*(代"售"),我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:辛甲基β葡糖苷销*(代"售")
品牌:百奥莱博
规格:1g
产地:国产|进口
英文名:Octyl-β-Glucoside
本产品是一种广泛用于溶解膜蛋白的非离子型去垢剂。低分子量,可通过透析去除。
储存条件:常温运输和保存,有效期一年。
想要了解更多关于辛甲基β葡糖苷销*(代"售")的价格、品牌、厂家、说明书、促销信息,请和我们联系。此外我公司还销*(代"售")下面的产品:
·dGTP溶液(2.5mM)
编号:BTN130914
英文名称:dGTP Solution(2.5mM)
规格:2mL
dGTP分子式为C10H13N5O13P3Na3,分子量是507.2,消光系数为13.7×103 M-1×cm-1(pH7.0)。λmax为253nm。
储存条件:低温运输和-20℃保存、有效期一年。
·植物RNA柱式提取试剂盒2.0
编号:BTN90404
英文名称:Plant RNA Column extraction kit 2.0
规格:50次
本试剂盒是柱式植物RNA提取试剂盒(BTN71203)与柱式DNA清除剂(BTN90318)整合后得到的升级产品,它解决了提取的植物总RNA中出现基因组DNA污染这一难题,提取的RNA通过PCR验证不含基因组DNA污染。
试剂盒特点:
1. 操作简单快速,处理一个样品只需要约十几分钟。
2. RNA纯度更高,平均 OD260/280一般都在2.0左右,能够有效去除大多数植物中的多糖污染。
3. 所提取RNA不含基因组DNA污染(电泳及PCR均检测不到)。
4. 得到的RNA可直接用于RT-PCR、Northern杂交、cDNA合成等实验。
5. 性价比高于进口的柱式植物RNA提取产品。
6. 本试剂盒方法提取不到总RNA中的miRNA。
试剂盒组成:
| 成分 | 规格 |
| 溶液A | 50ml |
| 溶液B | 15ml |
| 溶液C | 50ml |
| 离心吸附柱 | 50套 |
| 通用洗柱液 | 100ml |
| 膜反应液 | 2.5ml |
| RNase-free DNase(1U/μL) | 0.5ml |
| RNA洗脱液 | 10ml |
储存条件:常温运输,4℃保存(DNase 需要-20℃保存),有效期一年。
使用方法:
1. 估算组织细胞的用量。每次微量提取一般需要100-200mg植物叶片、或50-100mg植物种子、或200-500mg植物果实。
2. 先将新鲜植物组织剪切成小块(保存在RNAhold中的植物组织需用纸吸去RNAhold液体后再剪切成小块),放入10-15mL塑料离心管中,加入1mL 65℃预热的溶液A(用前需要摇晃混匀),然后用匀浆器匀浆5-20秒。匀浆时会产生泡沫,但不影响提取效果。也可以使用液氮研磨法破碎植物组织,研磨完后加入1mL溶液A,但效果比较差,因为研钵本质是二氧化硅,在溶液A存在时会吸附RNA。
3. 将匀浆物或研磨物转移至干净的1.5mL塑料离心管中(可以不必转移非液体的细胞碎片)。有的植物组织(比如果实)含有大量水份,匀浆液会多于1mL,转移时也只取1mL。
4.在离心管中加入0.3mL的溶液B和0.2mL自备*仿,在振荡器上振荡30秒混匀,此时溶液呈均匀的乳浊状。振荡器振荡时必须使管底溶液震荡起来。
5.室温12000rpm离心3~5分钟,两相间将有约5毫米厚的细胞破碎物。
6. 将上清液(约0.6mL)转移到另一干净的1.5mL塑料离心管中,下层有机相和中间层含有DNA、蛋白质和其他杂质,避免触及或吸取。最好留下100μL上清液不取。
7. 加入跟上清液等体积的溶液C,充分颠倒混匀。如果有沉淀产生(对某些植物,属于正常现象),千万不要去掉沉淀,一定要把所有的混合物上柱。
8. 将一半的混合液(含沉淀物,如果有的话)转移到离心吸附柱中,12000rpm室温离心半分钟,弃穿透液。
9. 将剩下的一半的混合液(含沉淀物,如果有的话)转移到同一离心吸附柱中,12000rpm室温离心半分钟,弃穿透液。
10. 加0.7mL通用洗柱液,12000rpm室温离心半分钟,弃穿透液。再加0.3mL通用洗柱液,12000rpm室温离心半分钟,弃穿透液。一般样品如此洗涤两次即可,但对于在第7步加入溶液C后有沉淀产生的样品,则需要洗三次,每次加入的通用洗涤液的量分别为0.4、0.3和0.3mL,其他操作不变。
11. 12000rpm室温离心10秒以便去除残留液体。此步很重要,否则残留的通用洗柱液会抑制后续反应中DNase的活性。
12. 将10μL(10 U)的RNase-free DNase加入到50μL 37℃预热的DNA膜反应液中,吹打混匀配制成DNase工作液。
13. 将DNase工作液在37℃预热1分钟,然后全部加入到离心吸附柱中,室温放置5分钟。注意:5分钟一般足够降解大多数情况下的DNA污染。如果DNA没有彻底降解(可能由于样品中残留的杂质抑制了DNase的活性),此步的保温时间可以适当延长到10分钟或15分钟。
14. 直接在离心吸附柱中加0.7mL通用洗柱液,盖上盖后颠倒数次混匀。
15. 12000rpm室温离心半分钟,弃穿透液。
16. 再加0.3mL通用洗柱液到离心吸附柱中,12000rpm室温离心半分钟,弃穿透液。
17. 12000rpm室温离心半分钟。此步十分重要,否则残留的乙醇(通用洗柱液中的成分)会影响RNA的使用。
18. 将离心吸附柱转移到RNase-free收集管中,加入30-50μL RNA洗脱液,室温放置1-2分钟。
19. 12000rpm室温离心半分钟,离心管中溶液即为RNA样品。本产品提供的离心吸附柱吸附力较强,一次洗脱不能全部将膜上RNA洗下,如有必要,可以再加入30-50μL RNA洗脱液一次。
20. 所得RNA溶液可以立即使用或存放于-80℃待用。如果要进行甲醛变性电泳检测。如果使用非变性胶电泳,则必须使用RNAload上样液。千万不能使用DNA上样液(因为它一般没经过去RNase处理)。
辛甲基β葡糖苷销*(代"售")关键词:BTN131044,Octyl-β-Glucoside,辛甲基β葡糖苷
·5M异硫*酸胍溶液
编号:BTN100902
规格:250mL
·EDTA溶液
编号:BTN131181
英文名称:EDTA Solution
规格:1mL
本产品是0.2M EDTA溶液,专用于终止各种需要*离子的酶反应。
储存条件:低温运输和-20℃保存、有效期一年。
·链霉亲和素
编号:BTN131021
英文名称:Streptavidin
规格:1mg
本产品为通过亲和层析纯化获得高纯度链霉亲和素。链霉亲和素是四聚体蛋白,大小为66KDa,一条完整的SA肽链中有159个*基酸残基,一分子链霉亲和素可以高度特异性地与四分子生物素结合,两者之间的亲和力极为强烈,链霉亲和素-生物素复合物的解离常数处于10 mol/L 数量级,这一性质常用于分子生物学用途。
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
·一站式RNA电泳套装
编号:BTN60904
英文名称:One-Stop RNA Electrophoresis Pack
规格:10次
本品是包括琼脂糖、去离子甲醛、RNA上样液、电泳液等在内的RNA电泳套装,专门用于RNA电泳分析。可以进行至少10次mini变性胶电泳。
产品特点:
1. 即开即用,用户不需要自己进行RNase 灭活、高压灭菌、pH调节等操作。
2.与Northern杂交等后续反应兼容。
产品组成:
| 成分 | 规格 |
| 琼脂糖 | 5g |
| 超纯水 | 250ml |
| 甲醛 | 60ml |
| RNAload(含EB) | 0.5ml |
| RNAep,10× | 100ml |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:常温运输和保存,但收到货后RNAload 需要4℃保存,RNAep,10×一旦打开需要-20℃保存,有效期一年。
使用方法:
注意:所有器皿(三角瓶,电泳槽,枪头等)均需去除RNase。强烈推荐使用本公司的超强无毒的固相RNase 清除剂。
一、配制琼脂糖甲醛变性胶(1.2%,100mL)
1.在三角瓶中加入下列成份:琼脂糖 1.2-1.5g;DEPC水 87mL
2. 将琼脂糖加热融化后,加入10mL 10×RNAep(10×RNAep 就是10×MOPS缓冲液,其瓶子一旦打开,就很容易产生污染细菌,细菌大量繁殖后会释放大量 RNase,所以剩下的10×RNAep 最好-20℃放置)。
3. 待胶冷却至 60℃左右,再加下列成份:甲醛 3.0mL;自备EB(10mg/mL)2-4μL
注意:由于本试剂盒提供的RNAload中含EB,所以也可以不加EB,但效果较差。如果使用自备的其他染料,如SYBR Green I,则不能同时使用其他染料,包括含EB的RNAload,用户需要另购不含EB的RNAload)。
4. 混匀后倒胶,凝固半小时后即可以使用。
二、配制电泳液
5. 将RNAep 用DEPC 水稀释十倍后即成电泳液,所需要的体积根据使用的电泳槽决定。
三、变性RNA样品
6.在一干净的离心管中将5-10μL RNA和15μL RNAload 混合,50-60℃保温10分钟后冰浴5-10分钟,直接上样。注意:每一泳道至多可分析30μg RNA,通常用10-20μg 总RNA进行Northern杂交,可以检测高丰度mRNA(占mRNA 总量的0.1%以上);如待测RNA含量极微,每个泳道需加0.5-3.0μg poly(A)+ RNA。
四、电泳
7.电泳时,将凝胶预电泳5 min(电压为5 V/cm)。随后加样品和分子量对照(如果有的话),以3-4 V/cm的电压电泳,直至染料迁移至胶下游的3/4处。
8.电泳结束后,在300nm 紫外灯下拍照。
五、后续处理
9. 按标准方法进行Northern杂交等后续处理。
使用效果:
图注: 用本产品电泳兔全血总RNA效果图。10μL 总RNA与15μL RNAload 混合后在甲醛琼脂糖变性胶上电泳0.5小时,直接在紫外灯下观察并照相。
疑难解答:
Q:RNA电泳为何最好使用RNAep,不要使用DNA电泳液TAE或TBE?
A:一是因为RNAep 经过去RNase处理,而一般实验室使用的TAE或TBE都没有经过去RNase处理,故极有可能含RNase,使样品RNA 降解。即使要灭活TAE或TBE中的RNase 也十分麻烦,因为DEPC 不能处理含Tirs的缓冲液;二是TEB含有硼*(代"酸"),硼*(代"酸")是研究多羟基醇和糖的经典试剂,它能与RNA中含多羟基的核糖反应生成糖硼*(代"酸")络合物,故电泳时RNA 带型十分弥散。在一定浓度范围内,RNA分子间还能通过硼*(代"酸")形成分子间复合物,出现电泳时各种RNA以一条带的形式出现的现象。所以RNA电泳时要避免使用含硼*(代"酸")的缓冲液。使用TAE效果虽然比TBE 稍好,但文献报道(BioTechniques 2000,28:414-415),它不能分离某些大小不同的RNA分子。
Q:上样孔里的红色荧光物一定是污染的基因组DNA 吗?
A:不是。用TAE或TBE电泳液和非变性胶电泳RNA时容易产生此现象,初步研究发现大部分红色荧光物是变性不充分的单链RNA通过碱基互补或通过硼*(代"酸")络合(如果使用TBE作电泳液的话)形成的复合物,加RNase处理后,这些红色荧光物一般会消失。为避免此现象,建议最好使用甲醛变性胶电泳。如果需要使用非变性胶,也必须在上样前使RNA变性。
使用百奥莱博优化的上样/变性/染色三用溶液RNAload可以使RNA在非变性胶上电泳时也有较好分辨率。使用非变性胶时,可以使用TAE或超快电泳液SuperBuffer-2,最好不要使用TBE缓冲液,因为TBE中的硼*(代"酸")能与RNA的多羟基形成复合物,RNA 很难形成锐利的条带。
Q:如何确认和去处除污染的基因组DNA?
A:如果怀疑有DNA污染,可以用RNase处理RNA样品,然后再电泳。如果上样孔里的红色荧光物不消失,则表示是基因组DNA污染。进一步确认可以使用PCR扩增法。去除污染的DNA可以使用非酶的DNA去除剂DNAScavenger或RNase-free DNase,由于RNase-free DNase一般都有残留的RNase污染,所以必须严格按照厂家提供的使用手册进行操作。
Q:为何我的植物RNA样品有4-5 条带?
A:部分植物组织有叶绿体等质体,而叶绿体有核糖体,所以也有其rRNA。
叶绿体的rRNA跟细胞浆里面核糖体的rRNA大小不同,所以一般会多出两条带(共4 条rRNA 条带)。小的tRNA和5S rRNA 有时可见,有时不可见,取决于回收效率。
辛甲基β葡糖苷销*(代"售")关键词:BTN131044,Octyl-β-Glucoside,辛甲基β葡糖苷
二甲*蓝FF Ferene S 4463-44-9
ARB13969 猪胰岛素样生长因子结合蛋白(IGFBP)elisa测定使用说明书 Porcine igfbp ELISA KIT
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BTN130648 Afu 尿嘧啶-DNA糖基化酶 Afu Uracil-DNA Glycosylase
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