蛋白磷酸酶抑制剂混合液Ⅱ(国产,进口)

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

北京百奥莱博供应的蛋白*(代"磷")酸酶抑制剂混合液Ⅱ(国产,进口)用于科研目的生化试验项目，本产品质量好，且极具价格优势，深为用户称道，了解更多蛋白*(代"磷")酸酶抑制剂混合液Ⅱ等蛋白质研究产品请联系我司咨询订购。

名称：蛋白*(代"磷")酸酶抑制剂混合液Ⅱ(国产,进口)
编号：BTN130525
规格：1mL
产地：国产|进口
英文名：Phosphotase Inhibitor Cocktail 2
品牌：百奥莱博
组织/细胞裂解时会释放出大量内源性蛋白*(代"磷")酸酶，以各种方式催化磷酸化蛋白的去磷酸化，导致不同于正常生理状态的差异，影响实验结果。因此，加入外源性蛋白*(代"磷")酸酶抑制剂，抑制磷酸化蛋白的去磷酸化，维持蛋白质的磷酸化状态，是Western Blotting、免疫共沉淀检测磷酸化蛋白质和蛋白激酶活性测定等研究不可缺少的一步。本产品就是针对这一用途开发。

产品特点：
1. 即开即用，不需要单独购买每个成分然后再配制。
2. 由多种蛋白*(代"磷")酸酶抑制剂组成，各成分的浓度经过精心优化。
3. 抑制谱广，能特异性地抑制酪*酸磷酸酶、酸性磷酸酶和碱性磷酸酶，最大限度保持蛋白质磷酸化。
4.与各种动物细胞裂解液兼容。
5. 使用简单，在细胞裂解液中按一定比例加入即可(根据蛋白*(代"磷")酸酶决定，一般按1/100的体积比)。
6.适用于Western blot、免疫共沉淀检测磷酸化蛋白质、蛋白激酶活性测定和信号传导等试验。

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

使用方法：
1.在临用前溶解本产品，并按1/100的比例加入到细胞裂解液中(1mL细胞裂解液中加入10μL)。注意：对蛋白*(代"磷")酸酶含量特别丰富的组织，可以将加入比列提高到1/20-1/50。
2.后续动物细胞提取和蛋白组学处理按常规方法进行即可。

注意：避免反复冻融本产品，所以第一次溶化后，如果还有剩余，可将其分装成小份冻存，每次用多少取多少。

关于蛋白*(代"磷")酸酶抑制剂混合液Ⅱ(国产,进口)的更详细说明，请致电我公司咨询，我们将以最饱满的热情为您提供解答，此外，我公司专业供应下列产品：

·超纯水
编号：BTN100935
英文名称：Ultrapure Water
规格：250mL
本品是指将水中的导电介质几乎全部去除，又将水中不离解的胶体物质、气体和有机物均去除至很低程度的水。可以用于各种分子生物学实验。

储存条件：常温运输和保存、有效期两年。

·氧钒核糖核苷复合物(RVC/VRC)
编号：BTN3110
英文名称：Ribonucleoside Vanadyl Complex
规格：10mL
本品是一种能抑制多种RNase活性的过渡态化合物，适用于加入到RNA提取、FISH和Microdissection等缓冲液中保护RNA分子的完整性。RVC 尤其适合于抑制植物中的RNase。

产品特点：
1. 抑制RNase活性，RVC 能抑制动物、植物和真菌的各种RNase的活性，Ki 值为10 微摩尔，加入到RNA提取液中能明显改善RNA提取效果。
2.与蛋白质的RNase inhibitor相比，其保存不需要DTT。
3. 性价比高于RNase inhibitor。

储存条件：低温运输，-20℃运输及保存，有效期一年。

使用方法：
将RVC 原液(200mM)在65℃融化，然后按1/10-1/20的比例直接加入各种缓冲液中即可使用(RVC的工作浓度在10-20mM之间)。可以加入的缓冲液包括各种RNA提取液、FISH和Microdissection缓冲液等。

注意事项：
1. RVC不稳定，不能预先加入缓冲液中，必须即配即用。
2.溶液中最好不要有EDTA，否则RVC复合物容易分解。
3. RVC会抑制体外转译系统。
4.在浓度高达2mM时，可以抑制AMV催化的逆转录反应。
5. RVC不抑制DNase，故可以与DNase一起使用去除RNA样品中的DNA污染。
6.反应后如果需要去除RVC，可加入10倍浓度的EDTA，然后用乙醇沉淀RNA。


蛋白*(代"磷")酸酶抑制剂混合液Ⅱ(国产,进口)关键词：Phosphotase Inhibitor Cocktail 2,蛋白*(代"磷")酸酶抑制剂混合液Ⅱ,BTN130525

酸性铬蓝K DL-Thioctic acid 3270-25-5
ARB10081 人c-myc癌基因产物(c-myc)血清中含量检测 Human c-myc oncogene product,c-myc ELISA KIT
ARB13773 银环蛇毒素α(α-BGT)酶标法分析 α-bungarotoxin,α-bgt ELISA KIT
BTN81201 酵母电转感受态细胞制备试剂盒 Yeast Electro Competent Cell Preparation Kit
9041-08-1 Heparin  肝素*
ARB10110 人ICE蛋白酶激活因子(IRAP)定量分析 Human ice protease-activating factor,irap ELISA KIT
ARB11589 人基质裂解蛋白/基质溶素(MAT)elisa检测说明书 Human matrilysin,mat ELISA KIT
ARB11326 人胆碱磷酸甘油酯(PC/CPG)含量测试 Human choline phosphoglyceride,pc/cpg ELISA KIT
马尿酸-L-*丙*酸 PEP-3CHA 744-59-2
普鲁兰酶 TBAC 9075-68-7
SJ0565 SILWETL-77表面活性剂
盐*(代"酸")吡哆醛 MTX 65-22-5
巴弗洛霉素A1 Rubidium chloride 88899-55-2
L-组*酸盐*(代"酸")盐一水物 L-Asparagine 5934-29-2
ARB10611 人血红蛋白C(HbC)ELISA检测服务 Human hemoglobin c,hbc ELISA KIT
E0615 抗凝裂解小牛血 100ml/500ml
C0901 鸡血清(无菌过滤)
BTN131059 亚*二乙酸介质 IDA(Iminodiacetic Acid)Resin
甜菊糖 Isomaltulose Hydrate 57817-89-7
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·可逆型Taq DNA聚合酶抑制剂
编号：BTN60901
英文名称：Taq DNA Polymerase Inhibitor
规格：0.3mL
Taq DNA聚合酶是进行PCR的最常用工具酶，但是由于它在常温下还是具有部分活性，所以经常会出现非特异的扩增产物，尤其是当PCR反应体系中有大量非特异DNA存在的时候。目前最常见的解决方法是使用抗Taq DNA聚合酶的抗体和使用经过化学修饰的热启动Taq DNA聚合酶(如AmpliTaq Gold)，但前者的缺点是加热后抗体会不可逆失活，后者的缺点是需要预热处理使酶激活。

产品特点：
1.可逆抑制Taq DNA聚合酶的活性，即常温抑制Taq酶活性，在45℃以上抑制功能丧失，当温度降低到45℃以下后，抑制活性又得以恢复。
2. 耐热，产品本身为非蛋白质试剂，远比Anti-Taq抗体稳定，便于保存和运输。
3. 使用简单，在加Taq酶前将本产品按PCR反应体积的1/10直接加入即可。
4.适用范围广，除Taq DNA聚合酶外，还可用于抑制其他DNA聚合酶的活性，如：Tth pol、Stoffel片段、Tfl pol、Tbr pol等。而一种酶的抗体一般对另一种酶的活性没有抑制作用。
5.与后续的RT-PCR兼容。

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

使用方法：
在加入Taq或Tth DNA聚合酶之前，按PCR反应终体积1/10的比例将本产品加入到反应体系中混匀，然后再加入DNA聚合酶，启动PCR反应。

·即用型PCR试剂盒(含染料)
编号：BTN90805
英文名称：Instant PCR MasterMix
规格：1ml×10|5mL×20
本产品内含Taq DNA聚合酶、dNTPs、MgCl2、反应缓冲液、PCR增强剂、上样染料等所有PCR所需要的成分，用户只需加入模板和引物即可进行PCR反应，具有广泛的用途。

产品特点：
1.扩增效率和灵敏度更高。
2. 方便，用户只需准备模板和引物既可以进行PCR实验。
3.快捷，操作步骤已经最大限度地简化，能减少污染，降低实验误差。
4.产物可直接用于T载体克隆，不需要额外的加A反应。
5.染料单独提供，方便客户组合。

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

使用方法：(以30μL的标准PCR反应体系为例)
在一干净的PCR管中，加入下列成分：

 

试剂		加入量
PCR MagicMix		15μl
DNA模板(自备)	哺乳动物基因组DNA	0.5-1μg
	酵母基因组DNA	5-500ng
	细菌基因组DNA	0.5-50ng
	质粒DNA	5-500pg
	PCR回收片段	1-100pg
PCR引物(自备)		10pmol each
补水到		30μL

放入PCR仪中进行PCR,结束后取5-10μL直接上样电泳，按照1.0mL PCR MagicMix加入40μL专用染料的比例将40μL专用染料加入到1mL PCR MagicMix中
注意：
1．如果反应体系不是30μL，各成分需要等按比例增加或减少。
2．如果DNA模板中有PCR不明抑制物(植物、土壤和血液等DNA样品常含此类抑制物)，可以在PCR体系中加入1/10的PCR抑制物清除剂(BTN60804，30μL体系中加3uL)，可能会对PCR有帮助。

PCR反应的影响因素
变性温度与时间：模板变性温度是决定PCR反应中双链DNA解链的温度，达不到变性温度就不会产生单链DNA模板，PCR也就不会启动。变性温度低则变性不完全，DNA双链会很快复性，因而减少产量。变性温度太高，又会影响酶的活性。一般情况下可设为94℃ 20~30秒，高温时间应尽量缩短，以保持耐热DNA聚合酶的活力，最高变性温度不宜超过95℃。
退火温度与时间：退火温度决定PCR特异性与产量。温度高特异性强，但过高则引物不能与模板牢固结合，DNA扩增效率下降；温度低产量高，但过低可造成引物与模板错配，非特异性产物增加。合适的退火温度一般在45~68℃之间。设置特定反应的最适退火温度，可根据引物的(G+C)%含量进行推测，一般实验中退火温度比扩增引物的熔解温度Tm低5℃，退火时间一般为30~60秒，足以使引物与模板之间完全结合，长时间退火没有必要。
延伸温度与时间：PCR反应的延伸温度一般选择在70~75℃之间，延伸时间根据所用聚合酶扩增速度和扩增片段大小设定，如同样扩增2 Kb片段，若使用Taq酶只需1分钟，使用Pfu酶则应设定2分钟以上。延伸时间过长会导致非特异性扩增带的出现，时间太短则可能得不到扩增产物或得到一些短的非特异性片段。
循环次数：可根据模板DNA的量、扩增片段的大小和扩增产物的下步应用等因素，设定20-40个循环。循环次数太少，扩增量不足，如果循环次数太多，错配几率会增加，非特异性背景严重。所以，在保证产物得率的前提下，应尽量减少循环次数。
酶量：50μl反应体系可用0.5-5 U酶，酶量的选择与模板DNA的量，扩增片段大小等有关，酶量过多易发生非特异性反应，而且可能增加突变的机率，尤其在进行高保真扩增时，应尽量减少酶量，但酶量过少时反应性能下降。
模板：模板可以是单链DNA，也可以是双链DNA，质粒DNA的扩增效率略低于线状DNA。模板加量一般不需太多，不超过1μg为宜，因为加量过多可能导致非特异性扩增增加，但是要考虑模板中靶序列的含量。例如，使用基因组为模板扩增单拷贝或低拷贝靶序列，就需要适当加大模板用量。
引物：引物与模板配对的长度应至少为17个核苷酸，最高不宜超过30个核苷酸，最佳长度为20~24个核苷酸，如需插入酶切位点，应在酶切位点5´端多加几个碱基，有利于酶切。引物的(G+C)%含量组成应均匀，尽量避免含有相同的碱基多聚体。两个引物中(G+C)%含量应尽量相似。引物内部应避免形成明显的次级结构，如发夹结构。两个引物之间不应发生互补，特别是在引物3´端。如果可能，引物3´端最好富有GC，这样退火后有利于引物3´端的延伸。人工合成的引物最好经过色谱层析纯化或PAGE纯化，以除去未能合成至全长的短链等杂质。引物的终浓度一般为0.1-2μm左右，浓度太高会导致非特异性扩增，太低则扩增产物太少。

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