包涵体蛋白溶解及复性套装北京现货促销

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

包涵体蛋白溶解及复性套装北京现货促销由专业试剂供应商北京百奥莱博提供，用于科研实验，本产品质量好，且极具价格优势，深为用户称道，了解更多包涵体蛋白溶解及复性套装等蛋白质研究产品请联系我司咨询订购。

名称：包涵体蛋白溶解及复性套装北京现货促销
英文名：Inclusion Body Protein Solubilization & Refolding Pack
规格：100次
编号：BTN100302
产地：国产|进口
本产品用E.coli作为宿主表达得到的重组蛋白往往会形成包涵体，其中的重组蛋白质只完成部分折叠，还没形成最后的正确空间结构，所以没有生物活性，要得到有活性的重组蛋白，还需要后续的溶解和复性(重折叠)处理。目前最常用的溶解包涵体的方法是用尿素，Sarkosyl，盐*(代"酸")胍等强变性剂，其缺点是包涵体中的重组蛋白质被彻底变性，使后续的蛋白质复性处理效率降低。本产品根据包涵体中的重组蛋白质已经完成了部分折叠这一实事设计。

产品特点：
1.一站式，提供包涵体洗涤、溶解和蛋白质复性的所有试剂。
2. 采用温和法溶解包涵体，释放的包涵体蛋白质不彻底变性，还能保持其部分折叠的结构，使后续的复性处理效率提高。
3. 所用复性液基于稀释复性，经过精心优化，有利于大部分蛋白的复性。
4.还提供五种不同的添加剂，它们可以单独加入复性液，也可以按一定比例进行自由组合，以适应不同的蛋白质折叠需求。
5. 本试剂盒提供实惠的小规格，用于做预实验用，用户如果选择到合适的溶液组合后，可以单独购买其中的溶液以用于大量制备。
6. 本试剂盒足够100次小规模(1mL规模)的蛋白质复性实验。

试剂盒组成：

 

成分	规格
包涵体洗涤液	250mL
包涵体温和溶解液(10种各一套)	10×10ml
包涵体蛋白质复性液	250ml
说明书	1份

储存条件：常温运输和保存，有效期一年。

自备试剂：去离子水、BCA蛋白浓度测定试剂盒、0.22μm注射器式滤膜。

使用方法：

一、洗涤包涵体
 说明：用常规方法得到的包涵体常常含有去污剂和细胞碎片，因此需要经过充分的洗涤才能用于本实验。
1．将10mg包涵体沉淀溶解在5mL包涵体洗涤液中，超声波处理8次或充分吹打混匀。可以适当留取10-30μL作为SDS-PAGE电泳样品待用。
2．4℃ 12000rpm离心20分钟后弃上清。
3．重复上面的洗涤步骤3次，每次留取10-30μL作为SDS-PAGE电泳样品待用。
4．将包涵体沉淀溶解在1mL包涵体洗涤液中，超声波处理8次或充分吹打混匀。
5．检查包涵体的纯度：将上步得到的包涵体溶液和前几步得到的预留样品一起用于SDS-PAGE电泳，检查每次洗涤去除杂带的情况。
6．检查包涵体的浓度：用自备的BCA蛋白检测试剂盒测试第4步得到的包涵体溶液的蛋白质浓度。
7．将第4步得到的包涵体溶液的蛋白质浓度调到5-10mg/mL(如果低于此范围，则离心后用适量的洗涤液再溶解；如果高于此范围，则用洗涤液稀释)，然后均分到10个1.5mL塑料离心管中，每管100μl。
8．4℃ 12000rpm离心20分钟后弃上清。
9．所得沉淀即纯化的待用的包涵体。

二、确定溶解包涵体的最佳条件
1．标记上步得到的10个离心管，并分别加入10种包涵体温和溶解液，每种1mL。注意：准确记录它们的对应关系。
2．充分振荡后，室温放置30分钟。
3．450nm检测浑浊度并记录下数据。
4．4℃ 12000rpm离心10分钟后收集上清，此即包涵体溶解液。
5．用0.22μm注射器式滤膜过滤包涵体溶解液。
6．280nm检测包涵体溶解液的光吸收。
7．溶解液溶解包涵体能力跟包涵体溶液浊度跟成反比，跟包涵体溶解液中OD280数值成正比。根据上面的数据即可确定哪种溶解液对实验中所用包涵体具有最佳溶解能力，并将在此溶解液中溶解的包涵体溶解液用于下面的复性实验。大量处理需要从本公司单独大量订购包涵体温和型溶解液10种中的1种。

三、包涵体蛋白的复性
1．在2.5mL 4℃预冷的、处于轻柔搅拌中的复性缓冲液中，逐滴加入上步得到的包涵体溶解液。
2．待所有包涵体溶解液都加完后，将包涵体蛋白复性溶液用孔径为0.22μm注射器式滤膜过滤，除去包涵体(直径一般在0.5-0.8μm)和大的聚合物。
3．将得到的溶液用于活性检测或离子交换柱层析和分子筛层析。

除包涵体蛋白溶解及复性套装北京现货促销外，我公司正在打折促销以下产品：

·电泳级β-巯基乙醇
编号：BTN100841
英文名称：b-Mercaptoethanol，EG
规格：1.5mL
本产品是电泳级的b-巯基乙醇原液，专门用于SDS-PAGE蛋白质变性电泳。在过量b-巯基乙醇存在时(一般为5%)，它能够打开蛋白质的二硫键，使蛋白质的在SDS-PAGE胶中的泳动速度只取决于分子大小。如果没有足够的b-巯基乙醇，具有二硫键的蛋白质在SDS-PAGE电泳中的分辨率将会出现鬼带。本产品可以用于制备SDS-PAGE和Tricine-SDS-PAGE上样液，也可以用于补充上样液中挥发的巯基乙醇。

SDS和b-巯基乙醇在SDS-PAGE蛋白变性电泳中的作用：


储存条件：常温运输及保存，有效期一年。

β巯基乙醇还原反应示意图：


·甲叉双丙稀酰胺(电泳级)
编号：BTN100877
英文名称：Bis-Acrylamide
规格：25g
N,N"-甲叉双丙*(代"烯")酰胺(Bis-Acrylamide)，又名亚甲基双丙*(代"烯")酰胺，次甲基双丙*(代"烯")酰胺，N,N"-甲撑双丙*(代"烯")酰胺。CAS号是110-26-9。它是一种白色白色或微黄色晶体粉末，无味，吸湿性极小。遇高温或强光则自交联，微溶于水、乙醇，溶于丙*(代"酮")，微溶于*。是一种用于制备聚丙*(代"烯")酰胺凝胶的交联试剂。

储存条件：常温运输及保存、防潮，有效期两年。
注：本产品属于中等毒性物质，主要引起神经系统毒性。


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632-69-9 虎红(孟加拉红)
PY01-066  硫代乙醇酸*  25克  
9012-36-6 Agarose 琼脂糖(西班牙原装)
919-30-2 3-*丙基三乙氧基硅烷
64-72-2 CTC 盐*(代"酸")金霉素
F040201 人类丙型肝炎病毒重组抗原 HCV
BL0820 HRP标记兔抗山羊IgG抗体
ARB11648 人蛋白二硫化物异构酶A3(PDIA3)Elisa方法检测 Human protein disulfide-isomerase a3,pdia3 ELISA KIT
73-32-5 L-Isoleucine   L-异亮*酸
CYB162028 羊抗人IgG(全分子)(抗血清) 0.5ml
PY08-016  四号琼脂平板 9CM  10皿/盒，用于霍乱弧菌的选择性分离培养
虾青素 Fluconazole 472-61-7
ARB13585 兔子血小板因子4(PF-4/CXCL4)含量测试 Rabbit　platelet factor 4,pf-4 ELISA KIT
BL1208 鞭毛染色液(试剂盒)
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ARB12510 大鼠载体蛋白B(Apo-B)代做ELISA实验 
次黄嘌呤 NHS-Biotin 68-94-0
ARB11009 人补体片断3b(C3b)Elisa方法检测 Human complement fragment 3b,c3b ELISA KIT
ARB12939 小鼠血小板因子3(PF-3)elisa检测说明书 Mouse platelet factor 3, pf3 ELISA KIT
PY02-290  麦氏培养基(醋酸*培养基)  250克  
BL0634 Q-琼脂糖凝胶FF Q Sepharose FF
ARB10816 人抗肌内膜抗体IgA(EMA IgA)含量测试 Human anti-endomysial antibody iga,ema iga ELISA KIT
ARB11366 人前列环素(PGI)含量分析 Human prostacycline,pgi ELISA KIT
1405-87-4 杆菌肽 Bacitracin
F040303 人IgM抗原 Human IgM
ARB10254 人乙*(代"醛")脱*酶(ALDH)定量分析 Human aldehyde dehydrogenase,aldh ELISA KIT
BL1343 PH值标准液(PH6.86)
芥子酸 GSH-Px 530-59-6

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