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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
常温运输
- 保质期:
一年
- 英文名:
Cibacron Blue Agarose
- 库存:
709
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
蓝胶琼脂糖 蛋白质研究由专业试剂供应商北京百奥莱博提供,用于生化研究,本产品质量好,且极具价格优势,深为用户称道,了解更多蓝胶琼脂糖等蛋白质研究产品请联系我司咨询订购。
名称:蓝胶琼脂糖 蛋白质研究
英文名:Cibacron Blue Agarose
规格:5mL
编号:BTN130417
品牌:百奥莱博
本产品琼脂糖亲和介质(蓝胶)通常简称为蓝胶,是一种染料亲和介质,其配基(蓝色染料Cibacron Blue 3-GA)是一种多芳香环的磺化物,具有与NAD相似的空间结构。其分子结构式如下:

本产品能与各种激酶、脱*酶、血清白蛋白、DNA聚合酶等产生亲和吸附作用,从而达到分离纯化的目的。
产品特点:
1.机械强度高、流速高,非特异性吸附少,配基泄漏低。
2.使用方便,应用广泛,可广泛用于蛋白纯化生产领域,如,用于纯化磷酸激酶、水解酶、DNA和RNA 核酸酶或聚合酶、合成酶、羟化酶、糖分解酶、磷酸二酯酶、脱羧酶以及血清白蛋白、血清脂蛋白、铁传递蛋白、干扰素等蛋白分子。
储存条件:常温运输,4℃保存,有效期一年。
想要了解更多关于蓝胶琼脂糖 蛋白质研究的价格、品牌、厂家、说明书、促销信息,请和我们联系。此外我公司还销*(代"售")下面的产品:
BTN130535 APMSF溶液 APMSF Solution
F030705 BIOTIN标记兔抗牛血清白蛋白抗体 Rabbit Anti-BSA*BIOTIN
D-*甘*醇 IBA-K 56613-80-0
CYB164020 羊抗大鼠IgG(1:500~2000)-HRP
ARB12909 小鼠白介素27(IL-27)Elisa方法检测 Mouse interleukin 27,IL-27 ELISA KIT
ARB10961 人免疫反应性生长激素(IrGH)elisa检测说明书 Human immunoreactive growth hormone,irgh ELISA KIT
PY02-356 2216E 250克
18883-66-4 链脲佐菌素 Streptozocin (STZ)
ARB10843 人抗肺泡基底膜抗体(ABM-Ab)含量测试 Human alveoli basement membrane zone antibody,abm-ab ELISA KIT
5-腺苷三磷酸二*盐三水物 DNHP 34369-07-8
ARB11954 大鼠Ⅱ型胶原(Col Ⅱ)含量检测 Rat collagen type Ⅱ,col Ⅱ ELISA KIT
高范围RNA Ladder Uniconazole
PC4901 miRNA 荧光定量PCR检测试剂盒
ARB13112 小鼠骨胶原交联(Cr)Elisa定量检测 Mouse crosslaps,cr ELISA KIT
ARB11501 人脂肪型脂肪酸结合蛋白(FABP4)elisa检测操作说明书 Human fabp4 ELISA KIT
分子筛3A型 DL-Alanine 308080-99-1
PY02-044 庆大霉素培养基基础 250克
20325-40-*(代"0") O-Dianisidine dihydrochloride 邻联茴香胺(固蓝B盐)
ARB10704 人多巴胺D2受体(D2R)Elisa分析 Human dopamine d2 receptor,d2r ELISA KIT
酚酞单磷酸环己*(代"胺")盐 Besmarck brown Y 14815-59-9
蓝胶琼脂糖 蛋白质研究关键词:BTN130417,Cibacron Blue Agarose,蓝胶琼脂糖
·非酶多糖清除剂(RNA样品专用)
编号:BTN60204
英文名称:Non-enzymatic Polysaccharide Scavenger
规格:10mL
用Trizol等方法提取的总RNA样品中经常会含有多糖(Polysaccharide,PS)污染,这些污染会影响下游的RT-PCR和Northern杂交等实验。目前没有十分有效的方法去除这一污染。我公司开发的非酶法PS清除剂能够比较好的解决这一问题。
产品特点:
1.高效,能有效地去除总RNA中的PS污染,使RNA溶液不再粘稠。
2. 不含RNase污染,RNA分子完整性不会受到任何影响。
3.快速,全部操作在样品管中完成,只需要二十多分钟。
4. 稳定,本产品为非酶产品,可以常温运输和4℃长期保存。
储存条件:低温运输,4℃保存,有效期一年。
使用方法:
1. 将十分粘稠的总RNA样品用RNase-free水稀释到100-500μl左右,加入等体积的65℃预热10分钟后的PS Scavenger,振荡器上充分振荡1分钟。
2. 加入等体积的*仿,振荡器上充分振荡1分钟。
3. 12000~15000g离心2分钟,转移上清到一新的离心管中,交界处将有白膜样的多糖沉淀。
4. 加入0.1倍体积的3 M NaOAc(pH5.2)和两倍体积的无水乙醇,混匀后12000~15000g离心10-20分钟。小心弃上清。
5. 加入1mL 75%乙醇,振荡器上短暂振荡后12000~15000g离心2分钟,小心弃上清。
6. 短暂离心,用移液枪小心吸去残留液体后,加入适量RNase-free水或具有灭活残留RNase的液相RNase Scavenger。立即使用或-80℃保存。
蓝胶琼脂糖 蛋白质研究关键词:BTN130417,Cibacron Blue Agarose,蓝胶琼脂糖
·改良Lowry法蛋白定量试剂盒
编号:BTN101102
英文名称:Enhanced Lowry Assay Kit
规格:1000次
Folin酚试剂(磷钼酸和磷钨酸混合物)跟蛋白质中含酚*基酸(色*酸和酪*酸)发生颜色反应,可用于测定蛋白质浓度,但灵敏度较低。Lowry在此基础上加入Biuret(双缩脲)反应步骤,即先在碱性条件下使蛋白质和Cu+形成复合物,再使其与Folin酚试剂发生显色反应,产物在750nm检测。
Lowry法使不含酚的蛋白质也能被检测出来,灵敏度是单独使用Folin酚的10倍左右,是双缩脲反应的200倍,因此成为早期检测蛋白浓度的主要方法。传统Lowry法受到很多常用的试剂(如DTT、糖、甘油、Triton等)干扰,步骤繁琐。本公司对Lowry法进行改良。
Lowry检测原理图如下:

产品特点:
1.即开即用,不需要单独购买每个成分再配制。
2.能抵抗部分干扰物(如一定浓度SDS或其他去污剂)的干扰。
3.检测线性范围广,在2-100μg,检测上限比经典Lowry法高30%-40%。
试剂盒组成:
| 成分 | 规格 |
| 溶液A成分一 | 208ml |
| 溶液A成分二 | 16ml |
| 溶液A成分三 | 16ml |
| 溶液B | 80ml |
| 溶液C | 80ml |
| 福林酚 | 10mL(用100mL 棕色瓶) |
| BSA标准品(2mg/mL in水) | 1ml |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:常温运输和保存(但BSA 标准品需要-20℃保存),有效期一年。
使用方法:
一、准备工作
1.制备溶液A:将16mL溶液A成分二和16mL溶液A成分三加入到装溶液A成分一的塑料瓶中,混合均匀得到240mL溶液A。注意:溶液A各成分分开提供更加稳定。
2.制备 Lowry工作液:将溶液A、溶液B和溶液C按3:1:1的体积比混合得到Lowry工作液。此工作液可以室温放置2-3周,所以最好用多少配多少。如果发现溶液B或溶液C有沉淀,需37℃溶解并摇匀后再使用。
3.制备福林酚工作液:在装有10mL 福林酚的棕色塑料瓶中加入90mL 去离子水,摇晃混匀待用。此工作液在避光条件下可以放置6个月。
二、试管法
4.先用去离子水将BSA 标准(2mg/mL)稀释到50μg/mL,然后在标记的试管中加入下列成分(单位:μL)。注意:每个样品最好做三个稀释度,每个稀释度最好设置三次重复,阴性对照和标准品也最好做三次重复。
| 标准品(每个做三次重复,此处只列出一个) | |||
| 编号 | BSA 标准(50μg/mL) | 水 | 总体积 |
| 阴性对照 | 0 | 0 | 200 |
| 1 | 0 | 200 | 200 |
| 2 | 25 | 175 | 200 |
| 3 | 50 | 150 | 200 |
| 4 | 100 | 100 | 200 |
| 5 | 150 | 50 | 200 |
| 6 | 200 | 0 | 200 |
| 样品(以1个样品、3个稀释度为例,每个稀释度三个重复,此处只列出一个) | ||
| 编号 | 样品 | 总体积 |
| 1 | 200(稀释度1) | 200 |
| 阴性对照1 | 200(用稀释度1稀释的溶解蛋白样品的缓冲液) | 200 |
| 2 | 200(稀释度2) | 200 |
| 阴性对照2 | 200(用稀释度2稀释的溶解蛋白样品的缓冲液) | 200 |
| 3 | 200(稀释度3) | 200 |
| 阴性对照3 | 200(用稀释度3稀释的溶解蛋白样品的缓冲液) | 200 |
5.每管中加入200μl Lowry工作液,振荡混匀后室温反应10分钟。
6.每管中加入100μl 福林酚工作液,振荡混匀后室温反应30分钟。
7.用容量为0.5mL、光径为1 cm的玻璃比色杯或聚*乙*(代"烯")比色杯测定750nm的光吸收。测定时,先空白(即阴性对照)后样品,测定样品和BSA标准品时,先低浓度后高浓度。测定未知样品前需要将杯子清洗干净,必要时可以用甲醇清洗吸附到比色杯壁上的染料。
8.根据标准品三个重复的平均值绘制标准曲线,然后根据未知样品的光吸收从标准曲线中查得其对应的浓度。
三、96微孔板法
9.同上,只是反应用96 微孔板设置,用酶标测试仪750nm 测定光吸收。
四、样品中干扰物质的去除(本产品不含相关产品,如果样品中有干扰Lowry法蛋白定量的物质(见附表),可另购本公司的微量蛋白质沉淀试剂盒(BTN81217)去除,也可以用自备试剂按下法去除:用水将样品调到体积为200μl,加入20μl 0.15%去氧胆酸*,混匀,室温放置10分钟。加入20μL 72%的TCA,室温放置5分钟。3000 g离心15分钟,小心去除上清。用200μl水溶解蛋白沉淀后以用于Lowry法测定。
附:常见Lowry法蛋白定量干扰物(低于所列浓度不干扰,高于所列浓度则会干扰,需要按上法去除。不能含任何浓度的DTE,DTT和硫*(代"酸")胺)。
| 干扰物 | 浓度 | 干扰物 | 浓度 |
| Acetone | 10% | 2-Mercaptoethanol | 1mM |
| Aprotinin | 10mg/mL | NaCl | 1 M |
| CHAPS | 0.05% | NaOH | 100mM |
| DMF | 10% | NaPi | 100mM |
| DMSO | 10% | NP40 | 0.02% |
| EDTA | 1mM | PMSF | 1mM |
| EGTA | 1mM | SDS | 1% |
| Ethanol | 10% | Sodium Citrate | 100mM |
| Glucose | 100mM | Sucrose | 7% |
| Glycin | 100mM | Tris | 10mM |
| HEPES | 1mM | Trition X-100 | 0.03% |
| Imidazole | 25mM | Tween 20 | 0.05% |
| Methanol | 10% | Urea | 3M |
疑难解答:
1. 该方法检测的蛋白质浓度范围1μg~50μg/ml。
2. 由于Lowry法测定的是蛋白质中酪*酸残基,对于那些酪*酸残基数高于或低于BSA,其测定的蛋白质含量将偏低或偏高。如果遇到该情况,需要采用BCA或Bradford法测定。
3. 阅读测定方法后化学试剂对测定方法的影响。
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文献和实验的影响,所以回收率并非是一成不变的。所以Qiagen以严谨的态度提供多种条件下的详细介绍:使用QIAquick回收之前和回收之后再混合的DNA 片段 (大小已指出) 。对所有尺寸的片段均获得了接近80%的回收率。A 1-5 : 回收之前; P : 回收之后再混合。样品使用 1.5% 琼脂糖凝胶分析(TAE buffer)。B 1-3: 回收之前; P : 回收之后混合。样品于 3.5% 高分辨琼脂糖凝胶上分析( TAE buffer)。M : pTZ-HinfI marker。记得《分子克隆II
哪些蛋白质数据库最受研究者欢迎?GEN网站罗列出16个,包括BioGRID, DDBJ, ExPasy, Gepasi, IntAct, KEGG, MINT, MS-Fit, NCBI, STRING, Uniprot等,详细列表请见如下内容。 BioGRID数据库于2003年建立,是一个有关于蛋白质—蛋白质以及基因相互作用的数据库。 DDBJ数据库,于1984年建立,是世界三大DNA 数据库之一,与NCBI的GenBank,EBI的EMBL数据库共同组成国际DNA数据
,反应时间在1小时,而反应的终止则由EDTA溶液的加入完成,因为它能鳌合核酸酶活性所必需的金属离子。 2、DNA的琼脂糖电泳 DNA的电泳有琼脂糖电泳和聚丙烯酰胺电泳,它们是分离、鉴定和纯化DNA片段的标准方法。 DNA的电泳原理与蛋白质的电泳原理基本相同。DNA分子在电场中通过凝胶介质中而泳动,除电荷效应外,凝胶介质还有分子筛效应,与分子大小及构象有关。由于DNA分子或DNA片段的分子量差别,电泳后呈现迁移位置的差异。琼脂糖凝胶电泳所需样品量仅0.5~1ug
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