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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
密封阴凉干燥保存,有效期2年。
- 保质期:
密封阴凉干燥保存,有效期2年。
- 英文名:
Trimethyl carbinol
- 库存:
大量
- 供应商:
上海联迈生物工程有限公司
- 规格:
250 ml
Trimethyl carbinol(2-甲基-2-丙醇、三甲基甲醇、叔丁醇)
产品名称: 叔丁醇
英文名称: Trimethyl carbinol
产品及特点:是异丁醇的一种,无毒,熔点为 25 ℃(用时可放在温箱内),可与水、乙醇、二甲苯等混合 。目前单用,或与乙醇、混合使用,是一种使用较广的脱水剂 。此液优于正丁醇,不会使组织收缩或变硬,不必经过透明剂,而直接提蜡。电镜上为常用的中间脱水剂 。
成分及包装: 塑料瓶内包装,纸盒外包装,无使用手册。
运输及保存: 密封阴凉干燥保存,有效期2年
Trimethyl carbinol(2-甲基-2-丙醇、三甲基甲醇、叔丁醇)实验步骤1. 石蜡切片置于67℃烘箱中,烘片2小时,脱蜡至水,用pH7.4的PBS冲洗三次,每次3分钟(3×3’)。
2. 取一定量pH=6.0柠檬酸盐缓冲液,加入微波盒中,微波加热至沸腾,将脱蜡水化后的组织切片置于耐高温塑料切片架上,放入已沸腾的缓冲液中,中档微波处理10分钟,取出微波盒流水自然泠却,从缓冲液中取出玻片,先用蒸馏水冲洗两次,之后用PBS冲洗2×3’。(注:不是所有的抗体都需要微波修复的,视具体情况而定)
3. 每张切片加1滴3%H2O2,室温下孵育10分钟,以阻断内源性过氧化物酶的活性。PBS冲洗3×3’。
4. 除去PBS液,每张切片加1滴相应的第一抗体(相应稀释倍数),室温下孵育2小时。
5. PBS冲洗3×5’。除去PBS液,每张切片加1滴聚合物增强剂,室温下孵育20分钟。PBS冲洗3×3’。
6. 除去PBS液,每张切片加1滴酶标抗鼠/兔聚合物,室温下孵育30分钟。PBS冲洗3×5’。
7. 除去PBS液,每张切片加1滴新鲜配制的DAB液(二氨基联苯胺),显微镜下观察5分钟。
8. 苏木素复染,0.1%HCl分化,自来水冲洗,蓝化,切片经梯度酒精脱水干燥,二甲苯透明,中性树胶封固,晾干后观察。
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其他
一、Trimethyl carbinol(2-甲基-2-丙醇、三甲基甲醇、叔丁醇)特点
1. 在切片加上一抗后,第二抗体标记多聚螯合物酶(HRP)的复合物与一抗结合,在多聚螯合物上有大量的HRP分子,使抗原信号有显著的放大,其敏感性较SABC、SP法高。
2. 由于多聚物在体内不存在,又不使用生物素,从而避免了由于生物素引起的非特异性背景染色,背景比SABC、SP法清晰。
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文献和实验CTAB抽提缓冲液:2%CTAB(cetyl trimethyl ammonium bromide, 十六烷基三甲基溴化铵) ,1%β-巯基乙醇 1.4mol/L Nacl,20mmol/L EDTA,100mmol/L Tris-Hcl pH8.0 3M NaAC 50mM Tris-HCl pH8.0 20mM EDTA 氯仿:异戊醇(24:1) 异丙醇 70%乙醇TE buffer 三.实验方法 1.取0.5g植物材料,双
Voges-Proskauer(V-P) 试验的原理及注意事项
一、试验原理细菌在葡萄糖代谢中生成丙酮酸,从丙酮酸开始,随细菌种类不同而有多种分解途径,有的使丙酮酸进一步分解,生成甲酸、乙酸、乳酸等终产物,有的可以使丙酮酸脱羧变为中性最终产物乙酰甲基甲醇(Acetylmethyl carbinol),亦称 3-羧基丁酮(Acetoin)。本试验即为检查某些细菌在葡萄糖代谢中是否产生乙酰甲基甲醇,作为鉴定依据。乙酰甲基甲醇在碱性环境中可被空气中的氧气氧化为丁二酮(Diacetyl),丁二酮与蛋白胨中精氨酸所含的胍基起作用,生成红色化合物,即为 V-P 试验
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