- ¥492
- 江蓝纯
- GS005
- 2025年07月12日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商：
江蓝纯
- 规格：
100次
| 产品编号 | 产品名称 | 产品包装 | 产品价格 |
| GS005 | EMSA/Gel-Shift 结合缓冲液(5X) | 100次 | 492.00元 |
EMSA/Gel-Shift结合缓冲液(5X)(EMSA/Gel-Shift Binding Buffer,5X)是用于EMSA/Gel-Shift的结合缓冲液。通过EMSA，也称gel-shift，可以研究目的蛋白和特定的DNA序列的结合情况，从而可以研究细胞内一些转录因子的激活水平。EMSA/Gel-Shift 结合缓冲液(5X)可以用于EMSA研究时细胞核蛋白或纯化的转录因子和特定的双链寡核苷酸的结合反应。
EMSA/Gel-Shift结合缓冲液(5X)中含有poly(dI-dC)，DTT，甘油，EDTA，氯化钠，氯化镁以及Tris等有效成分。其中poly(dI-dC)的浓度经过优化，可以很的消除蛋白和标记探针间的非特异性结合，同时又不会减弱目的转录因子和标记探针间的结合。
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文献和实验in the following order (in m l): 5X EMSA buffer: 4Water: to a final volume of 20 m lPolydI/dC: 1BSA: 132P probe: 1 (10K cpm)protein: 1-3 m llet the reaction stand for 10-15 min at room temp., then load 18 m l per lane on a 5% polyacrylamide gel. Run at 150 V for 2h
Gel Shift (EMSA)实验方法（Protocol）
There are multiple variations to this protocol, but we find that this one works well in all cases we tested. Reagents: 5X EMSA Buffer: 50mM HEPES (pH 7.9) 375 mM KCl 12.5 mM MgCl2 0.5 mM EDTA
前先混匀，并且室温（20-25℃）放置10分钟，从而消除可能发生的探针和蛋白的非特异性结合，或者让冷探针优先反应。然后加入标记好的探针，混匀，室温（20-25℃）放置20分钟。 （3） 加入1微升EMSA/Gel-Shift上样缓冲液（无色，10X），混匀后立即上样。注意：有些时候溴酚蓝会影响蛋白和DNA的结合，建 议尽量使用无色的EMSA/Gel-Shift上样缓冲液。如果对于使用无色上样缓冲液在上样时感觉到无法上样，可以在无色上样缓冲液里面添加极少量的蓝色的上样缓冲液，至能观察到蓝颜色即可
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