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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
2~8℃
- 保质期:
长期
- 英文名:
JC-1 Apoptosis Detection Kit
- 库存:
728
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专业生产供应细胞凋亡线粒体膜电位检测试剂盒(JC-1)哪里卖,我公司销*(代"售")全品类的细胞生物学试剂,价格优惠,欢迎广大科研工作者垂询订购。
名称:细胞凋亡线粒体膜电位检测试剂盒(JC-1)哪里卖
产地:国产|进口
规格:10T|20T|50T|100T
编号:KFS212
品牌:百奥莱博
本试剂盒可应用于细胞、组织或纯化的线粒体膜电位检测。大量的研究表明线粒体与细胞凋亡密切相关,其中线粒体跨膜电位(△)的破坏,被认为是细胞凋亡级联反应过程中最早发生的事件之一,它发生在细胞核凋亡特征(染色质浓缩、DNA断裂)出现之前,一旦线粒体跨膜电位崩溃,则细胞凋亡不可逆转。
本试剂盒采用JC-1(5,5’,6,6’-tetrachloro-1,1’,3,3’-tetraethylbenzimidazolcarbocyanine iodide)一种阳离子脂质荧光染料作为检测线粒体跨膜电位指示剂。JC-1有单体和多聚体两种存在状态,在低浓度时以单体的形式存在,高浓度时以多聚体形式存在,两者的发射光谱不同,但均可在流式细胞仪绿色(FL-1)通道检测出绿色荧光,JC-1可透过正常细胞膜以单体状态聚集胞内,正常健康线粒体的膜电位(△)具有极性,JC-1依赖于△的极性被迅速摄入线粒体内,并因浓度增高而在线粒体内形成多聚体,多聚体发射光为红色荧光;可被流式细胞仪的红色(FL-2)通道检测到,而细胞发生凋亡时,线粒体跨膜电位被去极化,JC-1从线粒体内释放,红光强度减弱,以单体的形式存在于胞质内发绿色荧光。根椐这一特征检测线粒体膜电位的变化。
注意事项
1. 微量试剂取用前请离心集液。
2. JC-1 避光保存及使用。
3. 细胞培养至汇合度80-90%,收集细胞量在1×106/Test。
4. 对PH 变化过于敏感的细胞建议用胎牛血清取代Buffer 孵育染色及洗涤,或延长观测时间。
5. 流式细胞仪检测线粒体膜电位变化受到多种因素的影响,因诱导剂、细胞株类型,作用时间的不同而荧光强度比例都有不同,因此没有通用标准的补偿设门指南,因此每个试验需设阴性及阳性对照组进行荧光补偿及设门。
6. 组织需先制备单细胞悬液或提取纯化线粒体后方可进行检测,可选用我司细胞悬液制备试剂盒或线粒体提取试剂盒。
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·8-16%预制胶(205-14 kDa分离范围;12个样/胶)
编号:KFS089
规格:一盒(10个)
·CCK-8法细胞增殖检测试剂盒
编号:KFS320
规格:500T
此试剂盒是用于测定细胞增殖或毒性试验中活细胞数目的一种高灵敏度,无放射性的比色检测法。实验的灵敏度比其它如MTT, XTT 或MTS 高。由于新型细胞增殖及毒性检测溶液相当稳定,并且对细胞没有毒性,可直接加入到细胞样品中长时间孵育。
注意事项
1. 本试剂盒的检测依赖于脱*酶催化的反应,如果待检测体系中存在较多的还原剂,例如一些抗氧化剂会干扰检测,需设法去除。
2. 如果待测溶液有还原性,测定不含细胞,但含有新型细胞增殖及毒性检测溶液在450 nm 处的空白吸光度。如果该吸光度很小,则可以直接加入CCK-8 检测溶液,如果吸光度相对较大,则需要除去培养基,并用培养基洗涤细胞两次,然后加入新的100 μl 培养基和10 μl 新型细胞增殖及毒性检测溶液进行检测。
3. 用酶标仪检测前请确保孔内没有气泡,否则会干扰测定。
4. 为保证您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
操作方法
1. 96 孔板加入细胞100μL/孔(约1×104),置37℃ 5%CO2 细胞培养箱培养24 小时。2.加入适当浓度的受试化合物。3.将96 孔板在37℃,含5% CO2 空气及100%湿度的细胞培养箱中孵育适当时间。
4. 向各孔中加入10 μl 的新型细胞增殖及毒性检测溶液。
5. 37℃下孵育1~4 小时。
6. 酶标仪在450nm 波长处检测每孔的光密度。
结果分析
1. 细胞的存活率:将各测试孔的OD 值减去本底OD 值(完全培养基加新型细胞增殖及毒性检测溶液,无细胞)或空白药物孔OD 值(完全培养基加受试药物的不同稀释度加新型细胞增殖及毒性检测溶液,无细胞),各重复孔的OD 值取均数±SD。细胞的存活率以T/C%表示,T 为加药细胞的OD 值,C 为对照细胞的OD 值。细胞存活率% =(加药细胞OD/对照细胞OD)×100
2. 求出T/C = 50% 时的药物浓度(IC50)及T/C = 10%时的药物浓度(IC90)。
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规格:100μL
·FAS-L蛋白检测试剂盒
编号:KFS232
英文名称:FAS-L Detection Assay(Western Blot)
规格:50T
本试剂盒用于从哺乳动物组织和培养细胞中提取全蛋白, 用含有蛋白酶抑制剂及磷酸酶抑制剂的裂解缓冲液LysisBuffer 匀浆裂解组织或细胞,作用温和,提取过程简便高效。获得的全蛋白可用于Western Blot、免疫共沉淀等后续研究(本试剂盒包含兔抗FAS-L抗体),但不能用于蛋白激酶及磷酸酶免疫共沉淀的研究,因本试剂盒中包括这两种酶的抑制剂。
·Western转膜液(干粉)
编号:KFS093
英文名称:FAS-L Detection Assay(Western Blot)
规格:1L|10×1L
本产品作为蛋白电泳完毕后,将凝胶上蛋白电转移到PVDF 膜或其它膜上的缓冲液,含有0.25M Tris、1.92M 甘*酸。本产品不含SDS,客户可根据自身需求,自行添加0.1%的SDS。
每个包装单独加蒸馏水溶解,定容到800ml 即可使用,加200ml 甲醇。配制好的转膜缓冲液使用时间不宜超过两周。
储存:RT,有效期一年。
·双荧光素酶报告基因检测试剂盒
编号:KFS303
英文名称:Dual Luciferase Reporter Gene Assay Kit
规格:100T
双萤光素酶报告基因检测试剂盒,是先以萤光素(luciferin)为底物来检测萤火虫萤光素酶(Firefly luciferase),后以肠腔素(coelenterazine)为底物来检测海肾萤光素酶(Renilla luciferase),并且在后续加入海肾萤光素酶底物时,同时加入抑制萤火虫荧光素酶催化luciferin 发光的物质,使后续检测仅仅检测到海肾萤光素酶的活性,实现双萤光素酶报告基因检测。萤火虫萤光素酶是一种分子量约为61kD 的蛋白,在ATP、*离子和氧气存在的条件下,可以催化luciferin 氧化成oxyluciferin,在luciferin 氧化的过程中,会发出生物萤光(bioluminescence)。海肾萤光素酶是一种分子量约为36kD 的蛋白,在氧气存在的条件下,可以催化coelenterazine 氧化成coelenteramide,在coelenterazine 氧化的过程中也会发出生物萤光。生物萤光可以通过化学发光仪(luminometer)或液闪测定仪进行测定。
注意事项
1.无菌操作。
2.荧光染料操作中注意避光进行。
3.由于温度对酶反应有影响,所以测定时样品和试剂均需达到室温后再进行测定。
4.为保证荧光素酶检测试剂的稳定性,可以采取适当分装后避光保存的方法,以避免反复冻融和长时间暴露于室温。
5.萤火虫荧光素酶检测试剂、Renilla 荧光素酶检测试剂最好现用现配。
6.细胞裂解液及裂解时间可根据细胞量适当增加、延长。
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文献和实验一、线粒体膜电位检测原理 线粒体膜电位下降是细胞凋亡早期的标志性事件,发生在细胞核凋亡特征(染色质浓缩、DNA断裂)出现之前,一旦线粒体膜电位崩溃,细胞凋亡便不可逆转。 JC-1是一种广泛用于检测线粒体膜电位∆Ψm的理想荧光探针,可以检测细胞、组织或纯化的线粒体膜电位。JC-1有单体和多聚体两种存在状态,两者发射光谱不同。在正常细胞内,线粒体膜电位较高,JC-1聚集在线粒体的基质中,形成聚合物,可产生红色荧光;凋亡早期,线粒体膜电位降低,JC-1不能聚集在线粒体基质中,此时JC-1为单体
线粒体跨膜电位DYmt的下降,被认为是细胞凋亡级联反应过程中最早发生的事件,它发生在细胞核凋亡特征(染色质浓缩、DNA断裂)出现之前,一旦线粒体DYmt崩溃,则细胞凋亡不可逆转。 线粒体跨膜电位的存在,使一些亲脂性阳离子荧光染料如Rhodamine 123、3,3-Dihexyloxacarbocyanine iodide[DiOC6(3)]、Tetrechloro-tetraethylbenzimidazol carbocyanine iodide[JC-1]、Tetramethyl
线粒体在细胞凋亡的过程中起着枢纽作用,多种细胞凋亡刺激因子均可诱导不同的细胞发生凋亡,而线粒体跨膜电位的下降,被认为是细胞凋亡级联反应过程中最早发生的事件,它发生在细胞核凋亡特征(染色质浓缩、DNA断裂)出现之前,一旦线粒体DYmt崩溃,则细胞凋亡不可逆转。 线粒体跨膜电位的存在,使一些亲脂性阳离子荧光染料如Rhodamine 123、3,3-Dihexyloxacarbocyanine iodide[DiOC6(3)]、Tetrechloro
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