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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20℃
- 保质期:
6个月
- 英文名:
pDONR221
- 库存:
大量
- 供应商:
钰博生物
- 规格:
1ug/5ug
载体基本信息
| 出品公司: | Ybscience |
|---|---|
| 载体名称: | pDONR221 |
| 质粒类型: | Gateway载体;克隆载体 |
| 高拷贝/低拷贝: | 高拷贝 |
| 启动子: | -- |
| 克隆方法: | Gateway ; BP反应 |
| 载体大小: | 4762 bp |
| 5' 测序引物及序列: | M13-F(-20): GTAAAACGACGGCCAG |
| 3' 测序引物及序列: | M13-R: CAGGAAACAGCTATGAC |
| 载体标签: | -- |
| 载体抗性: | 卡那霉素/ 氯霉素 |
| 筛选标记: | -- |
| 备注: | pDONR221载体本身含有CCDb致死基因,能够使得普通的DH5alpha等细菌死亡,必须使用DB3.1感受态细胞进行质粒扩增; 构建Gateway系统入门克隆时需要使用ccdB敏感的 OmniMAX2 感受态细胞。 |
| 稳定性: | -- |
| 组成型: | -- |
| 病毒/非病毒: | 非病毒 |
载体质粒图谱和多克隆位点信息



载体简介
载体序列
LOCUS pDONR221 4762 bp DNA circular 2-SEP-2003
SOURCE
ORGANISM
COMMENT This file is created by Vector NTI
http://www.biofeng.com/
COMMENT VNTAUTHORNAME|biofeng.com|
COMMENT VNTNAME|pDONR221|
COMMENT VNTREPLTYPE|Plasmid
COMMENT VNTEXTCHREPL|Bacteria
FEATURES Location/Qualifiers
source 1..4762
/invitrogen="722"
/vntifkey="98"
CDS complement(1197..1502)
/invitrogen="1060000"
/vntifkey="4"
/label=ccdB
CDS complement(1847..2506)
/invitrogen="1080000"
/vntifkey="4"
/label=Cm(R)
CDS 3156..3965
/invitrogen="1210000"
/vntifkey="4"
/label=Kan(R)
primer 537..552
/invitrogen="1980000"
/vntifkey="27"
/label=M13\(-20)\forward\primer
primer 517..533
/invitrogen="2000000"
/vntifkey="27"
/label=M13\(-40)\forward\primer
primer complement(3027..3043)
/invitrogen="2010000"
/vntifkey="27"
/label=M13\reverse\primer
primer complement(3003..3022)
/invitrogen="2100000"
/vntifkey="27"
/label=T7\primer
promoter complement(3006..3022)
/invitrogen="2370000"
/vntifkey="30"
/label=T7\promoter
terminator 427..470
/invitrogen="2580000"
/vntifkey="43"
/label=rrnB\T1\transcription\terminator
terminator 268..295
/invitrogen="2590000"
/vntifkey="43"
/label=rrnB\T2\transcription\terminator
misc_recomb 570..801
/invitrogen="2685000"
/vntifkey="86"
/label=attP1
misc_recomb complement(2754..2985)
/invitrogen="2686000"
/vntifkey="86"
/label=attP2
BASE COUNT 1260 a 1121 c 1060 g 1321 t
ORIGIN
1 ctttcctgcg ttatcccctg attctgtgga taaccgtatt accgcctttg agtgagctga
61 taccgctcgc cgcagccgaa cgaccgagcg cagcgagtca gtgagcgagg aagcggaaga
121 gcgcccaata cgcaaaccgc ctctccccgc gcgttggccg attcattaat gcagctggca
181 cgacaggttt cccgactgga aagcgggcag tgagcgcaac gcaattaata cgcgtaccgc
241 tagccaggaa gagtttgtag aaacgcaaaa aggccatccg tcaggatggc cttctgctta
301 gtttgatgcc tggcagttta tggcgggcgt cctgcccgcc accctccggg ccgttgcttc
361 acaacgttca aatccgctcc cggcggattt gtcctactca ggagagcgtt caccgacaaa
421 caacagataa aacgaaaggc ccagtcttcc gactgagcct ttcgttttat ttgatgcctg
481 gcagttccct actctcgcgt taacgctagc atggatgttt tcccagtcac gacgttgtaa
541 aacgacggcc agtcttaagc tcgggcccca aataatgatt ttattttgac tgatagtgac
601 ctgttcgttg caacacattg atgagcaatg cttttttata atgccaactt tgtacaaaaa
661 agctgaacga gaaacgtaaa atgatataaa tatcaatata ttaaattaga ttttgcataa
721 aaaacagact acataatact gtaaaacaca acatatccag tcactatgaa tcaactactt
781 agatggtatt agtgacctgt agtcgaccga cagccttcca aatgttcttc gggtgatgct
841 gccaacttag tcgaccgaca gccttccaaa tgttcttctc aaacggaatc gtcgtatcca
901 gcctactcgc tattgtcctc aatgccgtat taaatcataa aaagaaataa gaaaaagagg
961 tgcgagcctc ttttttgtgt gacaaaataa aaacatctac ctattcatat acgctagtgt
1021 catagtcctg aaaatcatct gcatcaagaa caatttcaca actcttatac ttttctctta
1081 caagtcgttc ggcttcatct ggattttcag cctctatact tactaaacgt gataaagttt
1141 ctgtaatttc tactgtatcg acctgcagac tggctgtgta taagggagcc tgacatttat
1201 attccccaga acatcaggtt aatggcgttt ttgatgtcat tttcgcggtg gctgagatca
1261 gccacttctt ccccgataac ggagaccggc acactggcca tatcggtggt catcatgcgc
1321 cagctttcat ccccgatatg caccaccggg taaagttcac gggagacttt atctgacagc
1381 agacgtgcac tggccagggg gatcaccatc cgtcgcccgg gcgtgtcaat aatatcactc
1441 tgtacatcca caaacagacg ataacggctc tctcttttat aggtgtaaac cttaaactgc
1501 atttcaccag cccctgttct cgtcagcaaa agagccgttc atttcaataa accgggcgac
1561 ctcagccatc ccttcctgat tttccgcttt ccagcgttcg gcacgcagac gacgggcttc
1621 attctgcatg gttgtgctta ccagaccgga gatattgaca tcatatatgc cttgagcaac
1681 tgatagctgt cgctgtcaac tgtcactgta atacgctgct tcatagcata cctctttttg
1741 acatacttcg ggtatacata tcagtatata ttcttatacc gcaaaaatca gcgcgcaaat
1801 acgcatactg ttatctggct tttagtaagc cggatccacg cggcgtttac gccccgccct
1861 gccactcatc gcagtactgt tgtaattcat taagcattct gccgacatgg aagccatcac
1921 agacggcatg atgaacctga atcgccagcg gcatcagcac cttgtcgcct tgcgtataat
1981 atttgcccat ggtgaaaacg ggggcgaaga agttgtccat attggccacg tttaaatcaa
2041 aactggtgaa actcacccag ggattggctg agacgaaaaa catattctca ataaaccctt
2101 tagggaaata ggccaggttt tcaccgtaac acgccacatc ttgcgaatat atgtgtagaa
2161 actgccggaa atcgtcgtgg tattcactcc agagcgatga aaacgtttca gtttgctcat
2221 ggaaaacggt gtaacaaggg tgaacactat cccatatcac cagctcaccg tctttcattg
2281 ccatacggaa ttccggatga gcattcatca ggcgggcaag aatgtgaata aaggccggat
2341 aaaacttgtg cttatttttc tttacggtct ttaaaaaggc cgtaatatcc agctgaacgg
2401 tctggttata ggtacattga gcaactgact gaaatgcctc aaaatgttct ttacgatgcc
2461 attgggatat atcaacggtg gtatatccag tgattttttt ctccatttta gcttccttag
2521 ctcctgaaaa tctcgataac tcaaaaaata cgcccggtag tgatcttatt tcattatggt
2581 gaaagttgga acctcttacg tgccgatcaa cgtctcattt tcgccaaaag ttggcccagg
2641 gcttcccggt atcaacaggg acaccaggat ttatttattc tgcgaagtga tcttccgtca
2701 caggtattta ttcggcgcaa agtgcgtcgg gtgatgctgc caacttagtc gactacaggt
2761 cactaatacc atctaagtag ttgattcata gtgactggat atgttgtgtt ttacagtatt
2821 atgtagtctg ttttttatgc aaaatctaat ttaatatatt gatatttata tcattttacg
2881 tttctcgttc agctttcttg tacaaagttg gcattataag aaagcattgc ttatcaattt
2941 gttgcaacga acaggtcact atcagtcaaa ataaaatcat tatttgccat ccagctgata
3001 tcccctatag tgagtcgtat tacatggtca tagctgtttc ctggcagctc tggcccgtgt
3061 ctcaaaatct ctgatgttac attgcacaag ataaaataat atcatcatga acaataaaac
3121 tgtctgctta cataaacagt aatacaaggg gtgttatgag ccatattcaa cgggaaacgt
3181 cgaggccgcg attaaattcc aacatggatg ctgatttata tgggtataaa tgggctcgcg
3241 ataatgtcgg gcaatcaggt gcgacaatct atcgcttgta tgggaagccc gatgcgccag
3301 agttgtttct gaaacatggc aaaggtagcg ttgccaatga tgttacagat gagatggtca
3361 gactaaactg gctgacggaa tttatgcctc ttccgaccat caagcatttt atccgtactc
3421 ctgatgatgc atggttactc accactgcga tccccggaaa aacagcattc caggtattag
3481 aagaatatcc tgattcaggt gaaaatattg ttgatgcgct ggcagtgttc ctgcgccggt
3541 tgcattcgat tcctgtttgt aattgtcctt ttaacagcga tcgcgtattt cgtctcgctc
3601 aggcgcaatc acgaatgaat aacggtttgg ttgatgcgag tgattttgat gacgagcgta
3661 atggctggcc tgttgaacaa gtctggaaag aaatgcataa acttttgcca ttctcaccgg
3721 attcagtcgt cactcatggt gatttctcac ttgataacct tatttttgac gaggggaaat
3781 taataggttg tattgatgtt ggacgagtcg gaatcgcaga ccgataccag gatcttgcca
3841 tcctatggaa ctgcctcggt gagttttctc cttcattaca gaaacggctt tttcaaaaat
3901 atggtattga taatcctgat atgaataaat tgcagtttca tttgatgctc gatgagtttt
3961 tctaatcaga attggttaat tggttgtaac actggcagag cattacgctg acttgacggg
4021 acggcgcaag ctcatgacca aaatccctta acgtgagtta cgcgtcgttc cactgagcgt
4081 cagaccccgt agaaaagatc aaaggatctt cttgagatcc tttttttctg cgcgtaatct
4141 gctgcttgca aacaaaaaaa ccaccgctac cagcggtggt ttgtttgccg gatcaagagc
4201 taccaactct ttttccgaag gtaactggct tcagcagagc gcagatacca aatactgttc
4261 ttctagtgta gccgtagtta ggccaccact tcaagaactc tgtagcaccg cctacatacc
4321 tcgctctgct aatcctgtta ccagtggctg ctgccagtgg cgataagtcg tgtcttaccg
4381 ggttggactc aagacgatag ttaccggata aggcgcagcg gtcgggctga acggggggtt
4441 cgtgcacaca gcccagcttg gagcgaacga cctacaccga actgagatac ctacagcgtg
4501 agctatgaga aagcgccacg cttcccgaag ggagaaaggc ggacaggtat ccggtaagcg
4561 gcagggtcgg aacaggagag cgcacgaggg agcttccagg gggaaacgcc tggtatcttt
4621 atagtcctgt cgggtttcgc cacctctgac ttgagcgtcg atttttgtga tgctcgtcag
4681 gggggcggag cctatggaaa aacgccagca acgcggcctt tttacggttc ctggcctttt
4741 gctggccttt tgctcacatg tt
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文献和实验15389094922 15129202416 029-85264243 DZJ-221 AC12V 1A A11K 中间继电器 15389094922 15129202416 029-85264243 通过国家质量监督检验合格。 名牌产品电话:029-85239494 我公司是全国大型电器集团之一对外设计加工。 全球市场合作:029-85230751-806 国内传真
thx221 有没有哪位大侠做内皮细胞方面的信号转导的???帮忙给提供几个通路做参考!或者给我点相关的最新研究文献!我实在是找不到这方面的最新研究进展,大家帮个忙吧!先谢谢了!!! 编年张 加此QQ492207858 chuckdouble thx221 wrote: 有没有哪位大侠做内皮细胞方面的信号转导的???帮忙给提供几个通路做参考!或者给我点相关
用传统的限制酶切和连接的方法产生入门克隆。这些载体配合合适的目的载体,可以用于表达天然蛋白或带有N端或C端融合标签的重组蛋白。为了在真核细胞中有效地翻译蛋白,所有的5个Gateway入门载体提供了Kozak 序列。此外,pENTR11提供了SD (Shine-Dalgarno)序列,便于在大肠杆菌中有效的翻译。2、PCR重组克隆 重组是从PCR产物创建Gateway入门克隆的另一种方法。这种方法是通过合并attB位点到上游和下游引物上,然后共同孵育PCR扩增产物和pDONR载体(包含attP位点
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