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- LMAI Bio
- 上海
- LM131228-500
- 2025年07月16日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
低温运输，-20℃保存
- 保质期：
一年
- 英文名：
Tth Endonuclease IV
- 库存：
大量
- 供应商：
联迈生物
- 规格：
500U
Tth 核酸内切酶 IV产品及特点：
Tth 核酸内切酶 IV 是一种热稳定的脱嘌呤/脱嘧啶（AP）核酸内切酶。该酶切割AP 位点 5 端的第一个磷酸二酯键，产生 3 羟基和 5 脱氧核糖磷酸末端。该酶也具有 3 二酯酶活性。其反应原理图如下：
本产品具体有下列用途：
1. 碱洗脱
2. 碱解旋
Tth 核酸内切酶 IV反应条件
1 X 反应缓冲液 [ 10 mM KCl，20 mM Tris-HCl，10 mM (NH4)2SO4，
2 mM MgSO4，0.1% Trition X-100（pH 8.8 @ 25 ℃）]，65 ℃ 温育。
单位定义
1 单位指在 10 μl 缓冲液体系中，65℃ 条件下，1 小时内能够切割 1 pmol 含一个 AP 位点*的 60 bp 寡核苷酸双链所需要的酶量。 AP 位点的创建方法如下：37℃条件下，用 1 单位尿嘧啶-DNA 糖基化酶 (UDG)处理 10 pmol 含单一尿嘧啶碱基的60 bp 寡核苷酸双链 2 分钟。
Buffer 成分
10 mM Tris-HCl，100 mM KCl，1 mM DTT，0.1 mM EDTA，50%Glycerol，0.1% Triton® X-100，pH 7.4 @ 25℃
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文献和实验Dra III Eag I Fse I Hinc II Hind III Hph IHpyCH4 VI-Ceu II-Sce IKas I*Mme IMnl IMsc I MspA1 I* Mwo I Nla III Nla IV PI-Psp IPI-Sce IPpuM I Pvu I SfaN I Sfc I Sfo I Sph I StyD4 ISwa I Taq I Tli I Tth111 I Tse I TspR I 可用稀释缓冲液C进行稀释的酶:Age
Tth111 I 65℃ 10
热失活是终止酶切反应的一种简便易行的方法。大多数最适反应温度是37℃的酶在65℃下温育20分钟即可失活。一些在65℃下不能失活的酶如将温度升高至80℃，温育20分钟也可失活。下表注明了每种酶的失活条件。 在50μl的反应体系中，37℃条件下，以0.5μg小牛胸腺DNA作为底物，加入5-10μl内切酶及相应缓冲液，反应60分钟，然后升温至65℃或80℃温育20分钟进行热失活。在上述混合液中加入0.5μg底物DNA（通常为λDNA），调节温度至最适反应温度，温育60分钟。若琼脂糖电泳显示底物
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