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T4 RNA 连接酶 2 (双
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T4 RNA Ligase 2
大量
联迈生物
150U
T4 RNA 连接酶 2 (双链RNA连接酶 )产品及特点:
T4 RNA 连接酶 2 ,也被称为 T4 Rnl-2( gp24.1 ),同时具有 RNA 链分子间和分子内连接活性。与 T4 RNA 连接酶1不同的是,T4 RNA 连接酶2 对双链 RNA切刻的连接活性要明显高于对单链 RNA 的末端连接。该酶连接时需要相邻的 3´ 羟基与 5´ 磷酸基。同时该酶也可用于连接双链结构中 RNA 3´ 羟基和 DNA 5´ 磷酸基的切刻 。它具有下列特点:
1. 连接粘性末端接头
2. 连接双链 RNA 中的切刻最佳用酶
3. 可用于 DNA/RNA 杂交链中,RNA 3羟基与 DNA 5 磷酸基的连接
4. 无单链和双链 DNA 核酸外切酶、核酸内切酶、RNase 以及磷酸酶的污染。
T4 RNA 连接酶 2 (双链RNA连接酶 )反应条件
1X T4 RNA Ligase 2 反应缓冲液 [ 50 mM Tris-HCl (pH 7.5 @ 25℃), 2 mMMgCl2, 1 mM DTT,400 μM ATP ],37℃ 温育。
单位定义
1 单位指 20 μl 反应体系中,37℃ 条件下,30 分钟内完全连接 0.4 μg 的 23-mer 和 17-mer RNA 等摩尔混合物所需的酶量。5´-GGGCUUUGCGUGGGUUU-3´3´-CCCGAAACGCACCCAAAGAUAUCp-5´退火后底物将形成如下的双链 RNA 分子,随后用此酶进行连接。5´-GGGCUUUGCGUGGGUUUpCUAUAGAAACCCACGCAAAGCCC-3´3´-CCCGAAACGCACCCAAAGAUAUCpUUUGGGUGCGUUUCGGG-5´
Buffer成分
10 mM Tris-HCl,50 mM KCl,35 mM (NH4)2SO4,0.1 mM DTT,0.1 mMEDTA,50% Glycerol,pH 7.5 @ 25℃
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