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T4聚核苷酸激酶
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一年
T4 Polynucleotide Kinase
大量
联迈生物
200U
T4聚核苷酸激酶产品及特点:
该酶能够催化磷酸在ATP的γ-位和寡核苷酸链(双链或单链DNA或RNA)的5-羟基末端以及3-单磷酸核苷间进行转移和交换。该酶还具有3磷酸酶活性,将3-磷酸基团从寡核苷酸的3磷酸末端、脱氧3-单磷酸核苷和脱氧3-二磷酸核苷上水解掉。其反应示意图如下:
该酶主要用途是:
1. DNA或RNA的末端标记,用作寡核苷酸探针和进行DNA测序。
2. 寡核苷酸5末端的磷酸化,以便进行连接反应。
3. 除去3磷酸基团。
T4聚核苷酸激酶活性单位定义
以Micrococcal Nuclease处理的小牛胸腺DNA为底物,在37℃,pH7.6的条件
下,30分钟内使1 nmol的[γ-32P]ATP掺入酸不溶性沉淀物所需要的酶量定义为1个
活性单位(U)。
纯度
1. 10 U的本酶和1 μg的λDNA-Hind III片段在37℃下反应16小时,DNA的电泳谱带不发生变化。
2. 5 U的本酶和1 μg的16S,23S rRNA在37℃下反应16小时,RNA的电泳谱带不发生变化。
T4聚核苷酸激酶反应条件
反应Buffer,10×:Tris-HCl(pH8.0) 500 mM,MgCl2 100 mM,DTT50 mM。* Buffer在溶解时,如果出现少量沉淀属正常现象保温后使用不影响反应性能。
Buffer成分
Tris-HCl(pH7.5) 50 mM,KCl 50 mM,DTT 1 mM,ATP 0.1 μM,Glycerol 50 %。
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