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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
低温运输,-20℃保存
- 保质期:
一年
- 英文名:
Coomassie Blue R-250 Stain Solution
- 库存:
大量
- 供应商:
联迈生物
- 规格:
250 mL
考马斯亮蓝G-250染液产品及特点
考马斯亮蓝G250是最经典的SDS-PAGE染色方法,本产品就是基于此方法而开发的产品。它具有下列特点:
1. 即开即用,不需要自己单独准备所有溶液。
2. 不需昂贵仪器,肉眼即可观察结果,不象其他纳克级的染色方法需要贵重的仪器设备(如SYPRO系列的高灵敏度的荧光染料需要荧光成像系统)。
3. 与普通扫描仪等兼容,便于保存数据和后续处理。
4. 灵敏度略高于考马斯亮蓝R250染色液。
考马斯亮蓝G-250染液使用及效果
凝胶电泳停止后,切除浓缩胶, 转移分离胶至染色容器中。倒入30-40 mL溶液A,1mm和1.5mm厚PAGE胶,摇床分别震荡10-15分钟和2-3小时。 弃掉溶液A,加入15-20 mL溶液B,1mm和1.5mm厚PAGE胶,摇床分别震荡30-60分钟和2-3小时。弃掉溶液B,加入30-40 mL10%的乙酸,缓慢摇动,直到出现亮蓝色的蛋白条带。常规扫描或保存。
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文献和实验一般R250 染蛋白,G250 一般测蛋白浓度,也可染胶,敏感性更高但较慢脱色较难。 G250常用的蛋白染料,作定性试验用,染色后为蓝绿色;R250较敏感,,做定量实验用,染胶效果较好.染色后为红蓝色 考马斯亮蓝R250(Coomassie brilliant blue R250)。C45H44O7H3S2Na,MW=824,λmax
用考马斯亮蓝 R - 250 染色 1. 凝胶的固定液中轻微摇荡至少 1 小时。 2. 凝胶在染色液中摇荡过夜或至少 1 小时。 3. 胶在脱色液中摇荡过夜或至少 1 小时以消除背景。 4. 凝胶放于保存液中至少 4 小时以进一步脱色。在最初的 1 小时内换两次溶液
水研磨成匀浆,转移到 离心管 中,再用6mL 蒸馏水分次洗涤研钵,洗涤液收集于同一 离心管 中,放置0.5~1h 以充分提取,然后在4 000r/min 离心20min,弃去沉淀,上清液转入10mL 容量瓶,并以蒸馏水定容至刻度,即得待测样品提取液。 (2)测定:另取2 支10mL 具塞 试管 ,按下表取样。吸取提取液0.1mL(做一重复),放入具塞刻度 试管 中,加入5mL 考马斯亮蓝G-250 蛋白
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