酵母基因组DNA大量提取试剂盒怎么卖

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名称：酵母基因组DNA大量提取试剂盒怎么卖
产地：国产|进口
英文名：Yeast DNA Massive Extraction Kit
编号：ALH156
规格：10次
本试剂盒用于快速的从酵母中大量提取基因组DNA。在针对酵母细胞特点配制的酵母裂解液作用下， 酵母细胞被裂解释放出基因组DNA，然后蛋白沉淀液选择性沉淀去除蛋白，最后纯净的基因组DNA通过异丙醇沉淀并重溶解于DNA溶解液。

试剂盒组份：
酵母裂解液——————100ml×2
蛋白沉淀液——————70ml
DNA溶解液 ——————30ml

产品特点：
1.不需要使用有毒的*酚、*仿等试剂。
2.快速，简捷，整个过程可在1个小时内完成。
3.结果稳定，产量高（比离心柱型的产量高一倍以上），OD260/OD280典型的比值达1.7～1.9，长度可达50Kb-150kb，可直接用于PCR，Southern-blot和各种酶切反应以及文库构建。

操作步骤：
1. 吸取60ml-70ml 酵母培养物到一个100ml 离心管；2,500 x g 离心2 分钟，尽可能弃上清，必要时候可以用枪吸去。
2. 高速涡旋振荡，打散重悬酵母细胞团。
3. 加入20 ml 酵母裂解液，涡旋振荡混匀，或者用1 毫升的枪头反复吹打混匀。酵母细胞的重悬分散对下一步裂解非常重要，必须充分分散重悬。
4. 将裂解物放置在70℃水浴15-30 分钟。
如果产量低，可以适当提高水浴温度和延长水浴时间，中间可以涡旋振荡混匀几次帮助裂解。
5. 冰上至少5 分钟使回复到室温。
6. 在回复到室温的裂解物内加入6.8 ml 蛋白沉淀液后，在涡旋振荡器上高速连续振荡混匀25 秒。混匀后可能见到一些小的蛋白团块。冰浴5 分钟。
7. 2,500 x g(可根据需要调整加大离心力)离心5 分钟。这时应该可以见到管底蛋白沉淀，也可能见到一些蛋白沉淀漂浮在液体表面。
8. 小心缓慢吸取上清到一个新的100ml 离心管中，不要吸到沉淀。吸取上清时，注意不要吸到管底的和漂浮在液体表面的蛋白沉淀。如果不小心将蛋白沉淀转入新的离心管中，可再次离心2 分钟后取上清。
9. 加入等体积的室温异丙醇，颠倒30 次混匀或者直到出现絮状DNA 沉淀（或者白色浑浊沉淀）。
10. 2,500 x g 离心5 分钟(可根据需要调整加大离心力)，在管底可以见到白色的DNA沉淀块，倒弃上清。
11. 加入20ml 70％乙醇，颠倒几次漂洗DNA 沉淀，2,500 x g 离心2 分钟， 倒去上清（注意不要把DNA 沉淀倒掉了），倒置后在吸水纸上轻敲几下以控干残留乙醇，还可以用枪头小心吸掉管底沉淀周围和管壁的残留乙醇，空气晾干沉淀几分钟。注意不要干燥过头，否则DNA极其难溶；也不能残留太多乙醇，否则乙醇可能抑制下游如酶切反应。
12. 加入1-3ml DNA 溶解液重新水化溶解DNA 沉淀，轻弹管壁混匀，可以放置在65℃温育30-60 分钟（不要超过一小时），也可以在室温或者4℃放置过夜来重新水化DNA。期间不时的轻弹管壁帮助重新水化DNA。
13. 加入0.5-1ml RNase A（10mg/ml），颠倒混匀，37℃温育30－60 分钟去除残留RNA。该步骤主要作用为去除残留的RNA，如果残留RNA多，可以适当延长时间或者增加RNase A 用量。如果残留RNA 不影响实验，可略去该步骤。如果残留的RNA酶可能影响实验，也可以用等体积酚/*仿抽提去除，然后用标准的乙醇沉淀回收DNA。
14. DNA 可以存放在2-8℃，如果要长时间存放，可以放置在－20℃。

储存条件：室温，有效期12个月。

本品别名：酵母基因组DNA大量提取试剂盒|酵母DNA大量提取试剂盒|大龄酵母DNA提取试剂盒

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·植物直接PCR试剂盒(无需提取DNA)
编号：ALH207
英文名称：Plant direct PCR Kit (without extraction of DNA)
规格：100次|500次
本试剂盒采用独特的裂解缓冲液快速裂解植物组织，释放的DNA无需纯化便可以作为模板，用高度耐抑制物的2×Direct PCR Mix扩增，扩增产物可直接上样电泳。适用于简单非多糖、多酚植物。操作简单，高通量筛选；一般扩增大小<2kb。

试剂盒组分(100次)：
Stock A——————————0.5ml
Stock B——————————1ml
Buffer N-—————————5ml
2 × Direct PCR Mix————1ml
双蒸水(PCR级)———————10ml

注意事项:
1. 如果扩增条带较弱，可以适当增加减少模板加入量，裂解混合物模板一般可以在0.5μl-2μl内调节，但是注意一般不能超过4μl，加入太多，反而抑制PCR反应。
2. 如果样品多酚多糖较多，扩增效果不理想，可在20 μl PCR反应体系加入2μl 10%PVP40改善效果。
3. 如果非特异扩增较多，可调整退火温度，或者适当增减模板用量。
4. 各溶液使用完毕后，应该立刻盖紧盖子，以免PH改变影响质量。

储存条件：-20℃。

·样品RNA保存液
编号：ALH053
英文名称：RNA Sample preservation solution
规格：50ml|100ml
本品适用于动物组织（心，肝，肾，肌肉，睾丸，脑，脾等）、培养细胞、RNA 病毒、果蝇、细菌、白细胞、全血、一些植物组织等。

本品是一种水相的，无毒的组织保存液体，可以迅速渗入新鲜组织细胞的胞浆中，在非冻状态下原位稳定和保护细胞内的RNA。取下组织薄片后立刻浸入本品保存并不影响将来提取RNA的质量和数量。本品消除了RNA样品需要立刻处理或者必须液氮保存的不方便。浸入本产品后，新鲜组织细胞中RNA可以完好的在37℃下保存一天, 在25℃下保存一周, 4℃下保存一个月, 在-20℃或-80℃下长期保存。RNA 病毒样品(如HCV 和HIV)可在37℃保存一个月。

产品特点：
1.操作容易：将组织剪成适当大小，浸没在本品中即可使其RNA不被降解。
2.无需液氮：使样品的保存不需液氮,干冰或-80℃冰箱, 尤其适用于临床和野外样品的快速和大规模采集。
3.方便运输：处理过的样品能在25℃保存一周, 使样品邮寄和运输变得容易和便宜, 有利学术合作和交流。
4.多次冻融: 经本品处理的样品可反复冻融多次, 其间可对样品进行各种处理而不影响最终提取的RNA 的质量。
5.比性强: 本品能减少大规模样品处理中的误差, 增加各次实验数间的可比性,对大规模基因表达谱的分析尤其有用。
6.兼容性广: 多种总RNA提取试剂都可以用来提取保存在本品内的样品。还可直接用于组织切片, 免疫学和流式细胞分析而不影响RNA 提取的质量。

使用方法：
本品只用于新鲜组织，浸泡入本品前禁止冷冻组织。只需要迅速将新鲜组织剪成长，宽，高任意一边厚度<0.5厘米浸泡入本品即可（只要有一边厚度不超过0.5厘米，本品可以迅速渗透，其它两边的尺寸并不重要）。将新鲜组织浸泡在5倍体积的本品中，按照指示存放在适当的温度。

1. 动物组织：本品并不破坏或者溶解组织结构，因此浸泡在本品中达到渗透平衡的组织可以从本品中取出，然后切成更小的块，然后放回到本品中下次继续使用。小器官如小鼠肝，肾，和脾不需要剪切，可以完整的存放在本品中。
2. 植物组织：很多植物组织直接浸泡入本品即可，有的植物有天然渗透屏障如腊质保护层，需要先破坏掉腊质层，便于本品渗透。
3. 组织培养细胞：细胞吹打下来后，离心收集细胞,弃上清，用冰浴的PBS缓冲液洗一次去除残留培养液。将细胞悬浮在少量PBS缓冲液中。加入五到十倍体积本品, 混均。
4. 血和血浆：和红细胞和血清分离的白细胞可以和组织培养细胞一样的保存。本品也可以保存抗凝全血，血清和血浆。对于全血加入3倍体积本品，混匀。
5. 酵母：离心收集3×10^8的细胞（＞12000g离心两分钟），立刻将细胞团重悬在0.5～1 ml的本品中。酵母细胞可以保存在本品中25℃8小时或者4℃一个星期。如果要保存存更长时间，将酵母细胞在本品中放置一个小时后， 再次于＞12000g离心5分钟，将酵母细胞团放入液氮瞬时冷冻后放置于–80℃储存。
6. 细菌：细菌并不能在本品 中生长，但是本品并不破坏细菌，E.coli在4℃保存一个月仍旧可以提出完整的RNA。

储存条件：室温，有效期12个月(使用时如发现有沉淀或析出，加热至37℃溶解，不影响使用)。

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