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- 详细信息
- 技术资料
- 保存条件:
常温运输及保存
- 保质期:
一年
- 英文名:
Fungus DNA extraction kit
- 库存:
566
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产供应北京现货真菌DNA提取试剂盒供应,我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂,价格优惠,欢迎广大科研工作者垂询订购。
名称:北京现货真菌DNA提取试剂盒供应
规格:50次
品牌:百奥莱博
编号:BTN60304
产地:国产|进口
英文名:Fungus DNA extraction kit
本试剂盒是基于液氮研磨法的真菌基因组DNA快速提取试剂盒,尤其适用于从真菌的菌丝体和子实体提取DNA(如果提取孢子和有坚硬细胞壁的单个真菌细胞,则建议选用本公司的玻璃珠法柱式真菌DNA提取试剂盒),提取过的真菌包括酵母(如:Saccharomyces cerevisiae、Schizosaccharomyces pomb、Pichia pastoris)、动物病原真菌(如:Candida albicans、Aspergillus niger)和植物病原真菌(如:Collectotrichum musae、Fusarium oxysporum)。
试剂盒特点:
1. DNA 纯净,OD260/280一般都在1.9左右,可直接用于PCR、酶切、杂交等。DNA大小在50 Kb左右。
2. 操作简单,整个过程约30分钟左右,比大多数同类产品短。
3.液体培养物处理量在0.1-3mL 之间,真菌菌丝、子实体的处理量在0.1-0.5 g 之间。
4. 价廉物美,与国外同类产品相比质量相当,但价格便宜。
5. 安全无毒,不需要使用*化苄等有毒物质,本试剂盒对人体无毒,无腐蚀性和刺激性气味。
试剂盒组成:
| 成分 | 规格 |
| 溶液A | 50ml |
| 溶液B | 50ml |
| RNase A溶液(10mg/ml) | 0.75ml |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:常温运输及保存,有效期一年。
使用方法:
1. 先将全部RNase A溶液全部加入到溶液A中,摇匀后再取用,未用完的溶液A最好在4℃保存。
2. 称取0.1-0.5g 湿的真菌菌丝、子实体或0.1-3mL液体培养物离心得到的沉淀,转移到塑料研钵中,液氮研磨成粉后转移到一个干净的1.5mL塑料离心管中。注意:最好避免使用含二氧化硅的玻璃研钵,因为DNA 会吸附在表面,影响得率。如果菌丝或子实体等已经十分干燥,则使用量最好比上面推荐的使用量低5-10倍;如果需要预先从环境中对真菌进行纯化(如从血液病原真菌中提取DNA,则需要先去除红细胞等成份),请按相关的标准方法先将该真菌预纯化出来,以沉淀物的形式放液氮研磨。
3.在离心管中加入1mL 65℃预热的溶液A并用移液枪头充分吹打混匀(如果溶液A有沉淀,需先在65℃加热溶解后摇匀再使用)。
4. 65℃保温5-30分钟,其间最好吹打混匀2-3次。
5. 12000~15000g室温离心3分钟,将不超过0.75mL的上清转移到新离心管中。有时候上清液中还会有少量细小悬浮物,但对后续操作没有影响,不必进行特殊处理。
6.在上清液中加入等体积的溶液B,上下颠倒30秒充分混匀,溶液将呈白色混浊状,将其置于冰浴中放置5-10分钟。
7. 12000~15000g室温离心3分钟,转移上清到新离心管中。
8. 加入0.2mL的*仿(自备),震荡器上充分振荡30秒混匀。
9. 12000~15000g室温离心3分钟,两相交界面将有白色膜状物,小心转移上清到新离心管中。
10. 重复第7-第8 步操作一次。
11. 加入0.6-1倍体积的异丙醇(自备),上下颠倒30秒混匀,12000~15000g离心5分钟,弃上清,管底将有微小DNA沉淀。
12. 用1mL 70%乙醇清洗沉淀2次后(一次洗涤是指加入70%乙醇震荡,12000~15000g室温离心3分钟,小心吸弃上清),再短暂离心一次,吸弃残留的液体(约50μL。吸出残留的乙醇很重要,否则它会严重影响后续的电泳上样、酶切、杂交等实验)。
13. 加入50-100μl自备缓冲液(如TE)和5-15μl RNase A溶液溶解沉淀(由于基因组DNA较大,一般需要过夜溶解)。DNA 即可用于电泳,酶切和PCR等反应。如果需要测OD,则必须乙醇沉淀去除降解的RNA。
除北京现货真菌DNA提取试剂盒供应外,我公司正在打折促销以下产品:
·RNase A干粉
编号:BTN90205
英文名称:RNase A Powder
规格:100mg
本产品是牛胰RNase A的冻干粉,可以配制成RNase A溶液用于各种分子生物学实验。
储存条件:低温运输,4℃或-20℃保存,有效期两年。
注意:RNase A非常容易吸附到玻璃表面,所以应避免与玻璃接触。
·动物RNA提取试剂盒(柱式Trizol)
编号:BTN71201
英文名称:Animal RNA column extraction kit(Trizol)
规格:50次
本试剂盒是动物总RNA快速提取试剂动物RNA提取试剂盒(BTN3070)的柱式升级产品,可用于从各种动物组织(包括白细胞)快速提取总RNA。
试剂盒特点:
1. 操作更加简单快速,整个过程只需要不到十分钟(对一个样品而言)。
2. RNA 纯度更高,OD260/OD280一般在2.0左右。
3.一般不含用RT-PCR可以检测到的基因组DNA污染。
4.适用于培养细胞、大部分动物组织和部分植物组织。
5. 得到的RNA可直接用于RT-PCR、Northern杂交、cDNA 合成等实验。
6. 性价比高于进口的柱式RNA提取产品。
试剂盒组成:
| 成分 | 50T |
| 溶液A | 50ml |
| 溶液B | 25ml |
| 离心吸附柱 | 50套 |
| 通用洗柱液 | 50ml |
| RNA 洗脱液 | 10ml |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:常温运输,4℃保存,有效期一年。
使用方法:
下面的操作步骤是针对在1.5mL塑料离心管中进行的微量提取的,如果处理样品量大,请按比例增加各成份的用量并使用大的离心管和离心机。
1. 根据组织细胞类型的不同分为下面及种情况使用:
a)对贴壁细胞:吸尽培养液,在每10 平方厘米细胞中加入1mL溶液A,用枪轻柔吹打数次,确保细胞全部裂解。
b)对悬浮细胞:离心收集细胞,吸尽液体,在每1-5×106 悬浮细胞中加入1mL溶液A,用枪轻柔吹打数次,确保细胞全部裂解。如果是fibroblasts或carcinoma cell,1mL溶液A的细胞使用量不要超过1×106个细胞。
c)对新鲜组织:先将剪切成小块新鲜组织或液氮保存的组织放入10mL或15mL塑料离心管中,每50-100mg 组织加1mL溶液A,用匀浆器匀浆30秒左右。对肝、脾、胰、肾等细胞分裂十分旺盛的组织(细胞中含大量正在复制的DNA),建议组织的使用量不要超过50mg/ mL溶液A,否则十分容易产生DNA污染。
d)对RNAhold 保存组织:先用纸吸去RNAhold液体后再剪切成小块,其余操作同新鲜组织的处理。
2. 将裂解物转移至一个干净的1.5mL塑料离心管中,然后加入0.2倍体积的自备*仿(1mL溶液A需0.2mL *仿),振荡器上充分振荡混均30秒。
3. 12000rpm室温离心3~5分钟。
4. 将上清液(约0.6-0.8mL的无色透明水相,有时水相比重大时,水相在下层,有机相即蓝相在上层,吸取时应吸取透明水相)转移到一个干净的1.5mL塑料离心管中。注意:离心后下层有机相和中间层含有DNA和蛋白质,避免触及,否则将产生蛋白质和DNA污染。为保险起见,可以留下100μl上清液不取。同时吸取上清时最好缓慢进行,否则容易吸出交界面的不可见的丝状DNA。
5. 加入等体积的溶液B,充分颠倒混匀。
6. 将一半的溶液转移到离心吸附柱中,12000rpm室温离心半分钟,弃穿透液。
7. 将剩下的一半溶液转移到同一离心吸附柱中,12000rpm室温离心半分钟,弃穿透液。
8. 加0.7mL 通用洗柱液到离心吸附柱中,室温离心半分钟,弃收集管中的穿透液。一次洗涤一般足够去除杂质。
9. 加0.3mL 通用洗柱液,室温离心半分钟,弃穿透液。此步可以省略。
10.室温12000 rmp离心半分钟。此步十分重要,否则残留的通用洗柱液会影响RNA的使用。
11. 将离心吸附柱转移到一自备的RNase-free 收集管中,加入50-100μL RNA 洗脱液。
12.室温12000 rmp离心半分钟,离心管中溶液即为RNA样品,可以立即使用或存放于-80℃待用。
13. RNA的电泳检测:本试剂盒提取的RNA 最好用甲醛变性胶电泳,如果在非变性的普通琼脂糖胶(in TAE或TBE buffer)上电泳,一定要使用RNA 专用上样液RNAload(操作详见RNAload 使用手册),千万不要使用常用的DNA上样液,因为DNA上样液没有经过去RNase处理,也不能将RNA变性,得到的带型将十分杂乱。
14. RNA 完整性的电泳检测:如果需要做Northern杂交,强烈建议用户使用甲醛变性胶进行RNA电泳,因为非变性胶不能分离所有的RNA分子(BioTechniques,28:414,2000)。
15. RNA产量产率测定:将5-10μl RNA 溶于TE缓冲液中(pH7.5-8.2 之间)检测其在OD260的光吸收。通过光吸收可以得出RNA浓度(1 OD260的RNA=40μg/mL),进而计算出RNA的产量(浓度×体积)和产率(RNA产量/组织用量)。
16. RNA 纯度测定:无污染的总RNA的OD260/OD280一般在1.8-2.1 之间(具体数值与其碱基组成和溶液成分等多种因素有关),高于此范围则分别表示样品可能有蛋白质污染,但一般不影响RT-PCR等反应。
疑难解答:
Q:上样孔里的红色荧光物一定是DNA污染吗?
A:不是。用TAE或TBE电泳液和非变性胶电泳RNA时容易产生此现象,我们初步研究发现大部分红色荧光物是变性不充分的单链RNA通过碱基互补或通过硼*(代"酸")络合(如果使用TBE作电泳液的话)形成的复合物,加RNase处理后,这些红色荧光物(RNA)一般会消失。为避免此现象,建议最好使用甲醛变性胶电泳和RNA 专用上样液(如RNAload)。
Q:如何确认和去处除污染的基因组DNA?
A:如果怀疑有DNA污染,可以用RNase处理RNA样品,然后再电泳。如果上样孔里的红色荧光物不消失,则表示是基因组DNA污染。进一步确认可以使用PCR扩增法。去除污染的DNA可以使用百奥莱博的非酶的DNA去除剂DNA Scavenger或RNase-free DNase,由于RNase-free DNase一般都有残留的RNase污染,所以必须严格按照厂家提供的使用说明书进行操作。
北京现货真菌DNA提取试剂盒供应关键词:Fungus DNA extraction kit,BTN60304,真菌DNA提取试剂盒
BFD078 犬细小抗原快速检测卡
ARB10681 人血凝素(HA)酶标法分析 Human hemagglutinin,ha ELISA KIT
D-来苏糖 4-Methoxysalicylaldehyde 1114-34-7
百里酚蓝* Maltase 62625-21-2
盐*(代"酸")乙醇胺溶液(1mol/L,pH8.0) 500ml
ARB12460 大鼠促肾上皮质激素释放激素(CRH)酶免分析 Rat corticotropin releasing hormone,crh ELISA KIT
ARB12979 小鼠纤连蛋白(FN)elisa检测 Mouse fibronectin,fn ELISA KIT
Golden Easy PCR System
BTN120801 镍柱原位再生试剂盒 Ni-Agarose Column In-Place Recharge Kit
PBS缓冲液 Zein
HC0146 灭菌封瓶膜
003003 猪血浆
SJ0326 Glyphosphate 草甘膦 标准品
RNase A(10mg/ml) 1ml|5ml
BL0296 HT(原装)
HC0109 透析袋MD25(8000-14000)
ARB10145 人P糖蛋白/渗透性糖蛋白(P-gp)定量分析 Human permeability glycoprotein,p-gp ELISA KIT
ARB10496 人白介素9(IL-9)含量检测 Human interleukin 9,IL-9 ELISA KIT
北京现货真菌DNA提取试剂盒供应关键词:Fungus DNA extraction kit,BTN60304,真菌DNA提取试剂盒
·RNase H
编号:BTN120413
英文名称:Ribonuclease H
规格:600U
RNase H是特异性分解RNA-DNA杂交体中的RNA链的核糖核酸内切酶,产生具有游离 3´-OH和5´-磷酸末端的产物,该酶对单链的核酸,双链DNA或双链RNA不起作用。
产品用途:
1.通过Okayama-Berg法进行cDNA Cloning。
2.DNA-RNA杂交体的检定。
3.在Oligo(dT)存在下除去mRNA的Poly(A)末端。
4.mRNA的定量。
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
活性定义:以Poly(rA)*Poly(dT)为底物,在30℃、pH7.7的条件下,20分钟内产生1nmol酸可溶性物质所需要的酶量定义为1个活性单位
纯度:
1.50U的本酶和1μg的λDNA-Hind III分解物在37℃下反应16小时,DNA的电泳谱带不发生变化。
2.50U的本酶和1μg的Closed circular(RFI)pBR322 DNA在37℃下反应1小时,DNA的电泳谱带不发生变化。
3.50U的本酶和1μg的16S,23S rRNA在37℃下反应1小时,RNA的电泳谱带不发生变化。
·*苄青霉素溶液
编号:BTN60206
英文名称:Ampicillin Solution
规格:10mL
本产品是浓度为50mg/mL的*苄青霉素溶液,用于分子生物学和组织培养(防止微生物污染和抗性筛选)。
作用原理:能使细菌细胞膜内层的transpeptidase(转肽酶)失活从而抑制细菌细胞壁的合成。
抗性机制:抗性基因bla能特异性表达外周质酶β-lactamase(β-内酰胺酶),该酶可切割*苄青霉素的β-内酰胺环从而使之失活。
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期6个月。
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