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- 百奥莱博
- 北京
- WE0186-BDE
- 2025年07月14日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
室温(15～30℃)
- 保质期：
长期
- 英文名：
Mouse&Rat Tail Genomic DNA Extraction Kit
- 库存：
462
- 供应商：
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专业生产销*(代"售")北京现货鼠尾基因组DNA提取试剂盒厂家直销，我公司供应的分子生物学试剂品类齐全，且具有优势价格，欢迎新老客户垂询订购。
名称：北京现货鼠尾基因组DNA提取试剂盒厂家直销
产地：国产|进口
编号：WE0186
品牌：百奥莱博
规格：50次
英文名：Mouse&Rat Tail Genomic DNA Extraction Kit
本试剂盒适用于从新鲜或冷冻的小鼠或大鼠鼠尾中提取高纯度的总DNA。该试剂盒提供的方法简单易行，纯化过程无需*酚或*仿抽提，可获得最大为50 kb的DNA片段，同时对100 bp的片段也能有效回收。本试剂盒采用独特的裂解液，有效裂解鼠尾样本，优化的缓冲体系使裂解鼠尾后产生的DNA高效结合到硅基质吸附柱上，而其他污染物可流过膜；PCR和其他酶促反应的抑制剂可通过两步洗涤步骤被有效去除，最后使用低盐缓冲液或水洗脱，即可得到高纯度的DNA。纯化得到的DNA可以直接用于酶切、PCR、Real-Time PCR、文库构建、Southern Blot、分子标记等下游实验。
试剂盒组成：
| 组份 | 50次 |
| Buffer GTT | 15ml |
| Buffer GL | 15ml |
| Buffer GW1(浓缩液) | 13ml |
| Buffer GW2(浓缩液) | 15ml |
| Buffer GE | 15ml |
| 蛋白酶K | 25 mg |
| 蛋白酶K 储存液 | 1.25ml |
| 吸附柱DM及收集管 | 50套 |
自备试剂：无水乙醇
产品特点
1、专用于从大鼠或小鼠的鼠尾中分离纯化高纯度总DNA。
2、无需有机溶剂提取以及乙醇沉淀，彻底去除污染物及下游反应抑制物，快速提取高品质DNA。
实验前准备及重要注意事项/strong>：
1、向蛋白酶K 中加入1.25ml 蛋白酶K 储存液使其溶解，-20℃保存。配制好的蛋白酶K 勿长时间室温放置，避免反复冻融，以免影响其活性。
2、样品应避免反复冻融，否则会导致提取的DNA片段较小且提取量下降。
3、第一次使用前应按照试剂瓶标签说明在Buffer GW1和Buffer GW2中加入无水乙醇。
4、使用前请检查Buffer GL是否出现结晶或者沉淀，如有结晶或者沉淀，请将Buffer GL于56℃水浴重新溶解。
操作步骤：
1、取一段大鼠或两段小鼠长度为0.4-0.6 cm的尾巴，在液氮中研磨成细粉或剪碎放入离心管(自备)中。加入180μl Buffer GTT，振荡混匀。
注意：确保组织的起始量不要超出推荐范围。
2、加入20μl 蛋白酶K ，涡旋振荡，彻底混匀。
3、置于56℃水浴，直至组织溶液完全清澈，一般情况下需要消化6-8小时，孵育过程中涡旋震荡，使样品均匀分散。
注意：1)如果孵育和涡旋震荡后仍然有胶状物质，必要时过夜消化或再加入20μl 蛋白酶K 消化，不会影响后续操作。
2)如需去除RNA，在上述步骤完成后加入4μl 100 mg/ml 的RNase A溶液(货号：WE0225S)，震荡混匀，室温放置5-10分钟。
4、12000rpm(~～13400×g)离心1分钟，以除掉未消化的类似于鼠毛等组织。将上清转移到一个新的离心管(自备)中。
5、加入200μl Buffer GL，涡旋震荡，充分混匀。加入200μl无水乙醇，涡旋震荡，充分混匀。短暂离心，使管壁上的溶液收集到管底。
注意：
1)加入Buffer GL和无水乙醇后要立即涡旋震荡混匀。
2)如果多个样品一起操作，Buffer GL和无水乙醇可以等比例混匀后一起加入样品。
3)加入Buffer GL和无水乙醇后可能会产生白色沉淀，不会影响后续实验。
6、将步骤5中所得溶液全部加入到已装入收集管的吸附柱DM中，若一次不能加完溶液，可分多次转入。12000rpm离心1分钟，倒掉收集管中的废液，将吸附柱重新放回收集管中。
7、向吸附柱中加入500μl Buffer GW1(使用前检查是否已加入无水乙醇)，12000rpm离心1分钟，倒掉收集管中的废液，将吸附柱重新放回收集管中。
8、向吸附柱中加入500μl Buffer GW2(使用前检查是否已加入无水乙醇)，12000rpm离心1分钟，倒掉收集管中的废液，将吸附柱重新放回收集管中。
注意：如需进一步提高DNA纯度，可重复步骤8。
9、12000rpm离心2分钟，倒掉收集管中的废液。将吸附柱置于室温数分钟，以彻底晾干。
注意：这一步目的是将吸附柱中残余乙醇去除，乙醇残留会影响后续酶促反应(酶切、PCR等)。
10、将吸附柱置于一个新的离心管(自备)中，向吸附柱的中间部位悬空加入50-200μlBuffer GE或灭菌水，室温放置2-5分钟，12000rpm离心1分钟，收集DNA溶液，-20℃保存DNA。
注意：
1)如果下游实验对pH值或EDTA敏感，可以用灭菌水洗脱。洗脱液的pH值对洗脱效率有很大影响，若用水做洗脱液应保证其pH值在7.0-8.5(可以用NaOH将水的pH值调到此范围)，pH值低于7.0时洗脱效率不高。
2)离心之前室温孵育5分钟可以增加产量。
3)用另外的50-200μl Buffer GE或灭菌水再次洗脱可以增加产量。
4)如果要提高DNA的终浓度，可以将步骤10所得的DNA洗脱液重新加至吸附膜上，重复步骤10；若洗脱体积小于200μl，可以增加DNA的终浓度，但可能会减少总产量。如果DNA的量小于1μg，推荐用50μl Buffer GE或灭菌水洗脱。
5)因为保存在水中的DNA会受到酸性水解作用的影响，如需长期保存，推荐用Buffer GE洗脱并于-20℃保存。
储存条件：室温(15～30℃)。
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北京现货鼠尾基因组DNA提取试剂盒厂家直销关键词：Mouse&Rat Tail Genomic DNA Extraction Kit,鼠尾基因组DNA提取试剂盒,WE0186
·唾液基因组DNA提取试剂盒
编号：WE0184
英文名称：Saliva DNA Extraction Kit
规格：50次|200次
本试剂盒适合于从新鲜唾液或唾液/保存液混合液中提取基因组DNA。本产品纯化过程不需使用*酚或*仿等有毒溶剂，无需乙醇沉淀。优化的缓冲体系使DNA高效特异地结合到硅基质离心吸附柱上，PCR和其他酶促反应的抑制剂可通过两步洗涤步骤被有效去除，最后使用低盐缓冲液或水洗脱，即可得到高纯度DNA。纯化得到的DNA可以直接用于酶切、PCR、Real-Time PCR、文库构建、Southern Blot、分子标记等下游实验。
试剂盒组成：
| 组份 | 50次 | 200次 |
| Buffer GL | 25ml | 100ml |
| Buffer GW1(浓缩液) | 13ml | 52ml |
| Buffer GW2(浓缩液) | 15ml | 10ml |
| Buffer GE | 15ml | 60ml |
| 蛋白酶K | 2×25mg | 180mg |
| 蛋白酶K 储存液 | 2×1.25ml | 2×5ml |
| 吸附柱DM及收集管 | 50套 | 200套 |
自备试剂：无水乙醇
实验前准备及重要注意事项/strong>：
1、向蛋白酶K 中加入指定用量(1.25ml/9ml)的蛋白酶K 储存液使其溶解，使其浓度为20mg/ml。配制好的蛋白酶K -20℃保存，勿长时间室温放置，以免影响其活性。其他组分可以在干燥、室温(15-25℃)环境下稳定保存一年。如需保存更长时间，可置于2～8℃。
2、样品应避免反复冻融，否则会导致提取的DNA片段较小且提取量下降。
3、第一次使用前应按照试剂瓶标签的说明在Buffer GW1和Buffer GW2中加入无水乙醇。
4、使用前请检查Buffer GL是否出现结晶或者沉淀，如有结晶或者沉淀，请将Buffer GL于56℃水浴重新溶解。
5、如果下游实验对RNA污染比较敏感，可以在第3步中加入4μl DNase-Free的RNase A(100 mg/ml)，RNase A本试剂盒并未提供，如需要可单独向本公司订购，货号：WE0225。
6、若要在室温下长时间保存唾液DNA，推荐使用本公司的唾液DNA保存管(货号：WE0402)。
操作步骤：
1、加入唾液样本或唾液/保存液混合液400μl 。
注意：
1)加入保存液的唾液混合物需在提取前50℃水浴1小时或50℃空气温箱2小时。
2)如需要增加样本体积，则倍比增加步骤2-4中的蛋白酶K 、Buffer GL和无水乙醇的体积，步骤5中液体可分多次转入。
2、加入40μl 蛋白酶K 。
3、加入400μl Buffer GL，涡旋震荡充分混匀，56℃水浴15-30分钟。
注意：如需去除RNA，可在上述步骤完成后，加入4μl浓度为100 mg/ml的RNase A溶液(货号：WE0225)，涡旋15秒，室温放置2分钟。
4、短暂离心以去除管盖内壁的水珠。加入400μl无水乙醇，涡旋震荡充分混匀。短暂离心。
注意：
1)加入Buffer GL和无水乙醇后要立即涡旋震荡混匀。
2)加入Buffer GL和无水乙醇后可能会产生白色沉淀，不会影响后续实验。
3)GL和无水乙醇后可能形成溶胶状产物，此时推荐进行剧烈震荡或涡旋处理。
5、上一个步骤中所得溶液全部加入到已装入收集管的吸附柱(Spin Column DM)中，若一次不能加完溶液，可分多次转入。12000rpm(～13400 ×g)离心1分钟，倒掉收集管中的废液，将吸附柱重新放回收集管中。
6、向吸附柱中加入500μl Buffer GW1(使用前检查是否已加入无水乙醇)，12000rpm离心1分钟，倒掉收集管中的废液，将吸附柱重新放回收集管中。
7、向吸附柱中加入500μl Buffer GW2(使用前检查是否已加入无水乙醇)，12000rpm离心1分钟，倒掉收集管中的废液，将吸附柱重新放回收集管中。
注意：如需进一步提高DNA纯度，可重复步骤7。
8、12000rpm离心2分钟，倒掉收集管中废液。将吸附柱置于室温数分钟，以彻底晾干。
注意：这一步的目的是将吸附柱中残余的乙醇去除，乙醇的残留会影响后续的酶促反应(酶切、PCR等)。
9、将吸附柱置于一个新的离心管(自备)中，向吸附柱的中间部位悬空加入50-200μl Buffer GE或灭菌水，室温放置2-5分钟，12000rpm离心1分钟，收集DNA溶液，-20℃保存DNA。
注意：
1)如果下游实验对pH值或EDTA敏感，可以用灭菌水洗脱。洗脱液的pH值对洗脱效率有很大影响，若用水做洗脱液应保证其pH值在7.0-8.5(可以用NaOH将水的pH值调到此范围)，pH值低于7.0时洗脱效率不高。
2)Buffer GE在65-70℃水浴预热，离心之前室温孵育5分钟可以增加产量。
3)因为保存在水中的DNA会受到酸性水解作用的影响，如需长期保存，推荐用Buffer GE洗脱并于-20℃保存。
储存条件：室温(15～30℃)。
北京现货鼠尾基因组DNA提取试剂盒厂家直销关键词：Mouse&Rat Tail Genomic DNA Extraction Kit,鼠尾基因组DNA提取试剂盒,WE0186
·一步法逆转录实时荧光定量PCR试剂盒(高含量ROX校正染料)
编号：WE0150
英文名称：BaldStar TaqMan One Step RT-qPCR Kit(High ROX)
规格：100次
本试剂盒是采用探针法(TaqMan，Molecular Beacon等)进行一步法Real-Time RT-qPCR的专用试剂盒。使用本产品进行Real Time RT-qPCR反应时，逆转录和定量PCR在同一反应体系中进行，反应过程中无需添加试剂，无需打开管盖，避免了污染的同时提高了实验效率。本产品的检测灵敏度高，荧光信号强，信噪比高，非常适合于RNA病毒等微量RNA的检测。其所包含的特殊缓冲系统能使逆转录酶与DNA聚合酶同时发挥最大功效，提高反应效率。使用本产品可以得到更宽广的线性范围，对目的基因定量更准确，重复性好，可信度高。
ROX染料用于校正定量PCR仪孔与孔之间产生的荧光信号误差，一般用于ABI、Stratagene等公司的Real Time PCR 扩增仪。不同仪器的激发光学系统有所不同，因此ROX染料的浓度必须与相应的荧光定量PCR仪相匹配。
不需要ROX校正的仪器:(WE0148)
Roche LightCycler 480，Roche LightCyler 96，Bio-rad iCyler iQ，iQ5，CFX96等。
需要Low ROX校正的仪器：(WE0149)
ABI Prism7500/7500 Fast，QuantStudio® 3 System，QuantStudio® 5 System，QuantStudio® 6 Flex System，QuantStudio® 7 Flex System，ViiA 7 system，Stratagene Mx3000/Mx3005P，Corbett Rotor Gene 3000等。
需要High ROX校正的仪器：(WE0150)
ABI Prism7000/7300/7700/7900，Eppendorf，ABI Step One/Step One Plus等。
试剂盒组成：
| 组份 | WE0148-100次 | WE0149-100次 | WE0150-100次 |
| 2×BaldStar TaqMan One Step Buffer | 1.4ml | 1.4ml | 1.4ml |
| BaldStar TaqMan One Step EnzymeMix | 100μl | 100μl | 100μl |
| 50×Low ROX | - | 50μl | - |
| 50×High ROX | - | - | 50μl |
| RNase-Free Water | 1.5ml | 1.5ml | 1.5ml |
注意事项：
1、本试剂盒中试剂使用前请上下颠倒轻轻混匀，尽量避免起泡，并经短暂离心后使用。
2、本产品以RNA为模板进行一步法RT-PCR实验，在操作过程中应避免RNase污染，建议在专门的区域进行RNA操作，使用专门的仪器和耗材，操作人员带口罩和一次性手套并经常更换手套，实验相关耗材应用0.1%DEPC(焦碳酸二乙酯)水溶液在37℃处理12小时,并高压灭菌30分钟后使用。
3、本试剂盒中的各试剂应尽量避免反复冻融，反复冻融可能使产品性能下降。
4、本试剂盒必须使用特异性引物，引物的选择可根据具体实验来选择，引物设计的好坏直接影响到RT-qPCR反应的结果，设计引物时需考虑GC含量，引物长度，引物位置，PCR产物的二级结构等因素，建议采用专业的引物设计软件进行设计。
5、本试剂盒推荐使用特异性探针，建议采用专业的设计软件进行设计。
使用方法：
以下举例为常规的反应体系和反应条件，实际操作中应根据模板、引物结构和目的片段大小的不同进行相应的改进和优化。(反应液的配置请在冰上进行)
1、将RNA模板、引物、2×BaldStar TaqMan One Step Buffer、BaldStar TaqMan One Step EnzymeMix和RNase-Free Water溶解并置于冰上备用。
2、PCR反应体系：
| 试剂 | 25μl反应体系 | 终浓度 |
| 2×BaldStar TaqMan One Step Buffer | 12.5μl | 1× |
| Forward Primer，10μM | 0.5μl | 0.2μM |
| Reverse Primer，10μM | 0.5μl | 0.2μM |
| Probe，10μM | 0.5μl | 0.2μM |
| BaldStar TaqMan One Step EnzymeMix | 1.0μl | |
| RNA Template | Xμl | 10 pg～100ng |
| 50×Low ROX or High ROX(可选) | 0.5μl | 1× |
| RNase-Free Water | up to 25μl |
注意：
1)通常引物浓度以0.2μM可以得到较好结果，可以在0.1-1.0μM作为设定范围的参考。
2)使用的探针浓度，与使用的荧光定量PCR仪、探针种类、荧光标记物质种类有关，实际使用时请参照仪器说明书，或各荧光探针的具体使用要求进行浓度的调节。
3)通常RNA模板的量以10 pg – 100ng为参照，因不同物种的模板中含有的目的基因拷贝数不同，可对模板进行梯度稀释，以确定最佳的模板使用量。
4)不同仪器的激发光学系统有所不同，根据使用荧光定量的仪器选择加入50×Low ROX or 50×High ROX。
3、混匀，短暂离心，将溶液收集到管底。
4、RT-PCR反应条件：
| 步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
| 逆转录 | 45℃ | 10 min | |
| PCR预变性 | 95℃ | 10 min | |
| 变性 | 95℃ | 15 s | 30-40个循环 |
| 退火/延伸 | 60℃ | 45 s |
注意：
1)1)本产品所采用的热启动酶须在预变性95℃、5-10 min条件下实现酶的活化。
2)建议采用两步法PCR反应程序，若因使用Tm值较低的引物等原因，得不到良好的实验结果时，可尝试进行三步法PCR扩增，退火温度请以 56℃-64℃的范围作为设定参考。
储存条件：-20℃，避免反复冻融
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文献和实验相关实验
一种基于手动芯片点样仪的快捷高效的转基因植物PCR-dot-blot鉴定法
no.DQ434847）转入烟草（Nicotiana tabacum L.cv.W38），所得T0代植株在16h光照（25℃）/8h黑暗条件下培养。1.2 方法1.2.1 转基因植物的PCR鉴定 随机挑取六株T0代转基因烟草，采用植物基因组DNA提取试剂盒（北京天根生化科技有限公司）提取基因组DNA模板，另外分别以未转化的野生型烟草基因组DNA以及含有OSsec27p的重组质粒作为阴性和阳性对照模板，使用OSsec27p基因特异性引物进行PCR扩增。 取部分扩增产物进行1%琼脂糖凝胶电泳检测，检测
简单。 2. 它可以提取大片段DNA，最大可到150kb，适合于文库构建需要大片段DNA的情况。 3. 价格相对来说，比进口产品价格低。低价格可以让一些经费有限的实验室也可以抛弃传统苯酚，氯仿方法而使用到简捷方便的试剂盒来提取。以下是部分客户 名单：解放军总医院、协和医院、北医三院、北大医院、人民医院、同仁医院、北京基因组研究中心、湖南湘雅医院、西安交通大学、湖南师范大学生命科学院…… 电泳图片： 图片说明：泳道1、2来源于同一个病人
四因子作用那么,是否可以直接应用相关转录因子对体细胞进行重编程而逆转终未分化细胞的发育潜能, 进而表现出ES细胞那样的多潜能性呢？Takahashi和Yamanaka{4}选择24种在小鼠早期胚胎ES细胞或者肿瘤细胞中丰富表达的转录因子, 通过筛选、组合, 发现用Oct4, Sox2, c-Myc和Klf4 4个因子(这4个因子也被称为Yamanaka因子)可以有效地将胎鼠成纤维细胞(mouse embryonic fibroblast, MEF细胞)和小鼠尾尖成纤维细胞诱导形成形态和生长
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