北京现货BL21(DE3)感受态细胞特价促销

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

北京百奥莱博专业生产供应北京现货BL21(DE3)感受态细胞特价促销，我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂，价格优惠，欢迎广大科研工作者垂询订购。

名称：北京现货BL21(DE3)感受态细胞特价促销
编号：WE0253
规格：100μl×10支
品牌：百奥莱博
产地：国产|进口
英文名：BL21(DE3)Competent Cell
  本产品是大肠杆菌BL21(DE3)菌株经特殊工艺处理得到的感受态细胞，可用于DNA的热击转化。BL21(DE3)菌株适合表达非毒性蛋白，该菌株是以T7 RNA聚合酶为表达系统的外源基因蛋白高效表达的宿主。T7噬菌体RNA聚合酶基因的表达受λ噬菌体DE3区的lacUV5启动子调控，该区整合在BL21染色体上。使用pUC19质粒检测，转化效率可达107。

产品组成：

 

组份	0.1ml×10支
BL21(DE3)Competen t Cell	10×100μl
Control DNA pUC19，0.1ng/μl	10μl

实验前准备及重要注意事项
1、感受态细胞一定要用干冰运输。感受态细胞应在-80℃下保存，不可反复冻融和放置时间过长，以免降低感受态细胞的转化效率。
2、转化所有步骤均在无菌条件下操作。
3、包装中有0.1ng/μl的pUC19DNA，供对照试验使用。

使用方法：
1、取感受态细胞置于冰浴中。一次转化感受态细胞的建议用量为50-100μl，可以根据实际情况分装使用。以下实验以50μl感受态细胞为例。
2、待感受态细胞融化后，向感受态细胞悬液中加入目的DNA(根据实际情况加入适量的DNA，通常100μl感受态细胞能够被1ng超螺旋质粒DNA所饱和)，用移液器轻轻吹打混匀，冰浴30分钟。
3、42℃热击45秒，迅速将离心管转移到冰浴中，冰上静置2-3分钟。
4、向每个离心管中加入450μl无菌的SOC或LB培养基(不含抗生素)，混匀后置于37℃摇床，150 rpm振荡培养45分钟使菌体复苏。
5、根据实验需求，取适量已转化的感受态细胞，加到含相应抗生素的SOC或LB固体琼脂培养基上，用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开，将平板置于37℃直至液体被吸收，倒置培养，37℃培养12-16小时。
注意：
1)涂布用量可根据具体实验调整。若转化的DNA总量较多，可取少量转化产物涂布平板；若转化的DNA总量较少，可取200-300μl转化产物涂布平板。若预计的克隆数较少，可通过离心(4000rpm，2分钟)后吸除部分培养液，悬浮菌体后将其涂布于平板中。
2)新制备的固体培养基不易涂干，可将平板正置于37℃直至液体被吸收后再倒置培养。
3)涂布剩余的菌液可置于4℃保存，如果次日的转化菌落数过少，可以将剩下的菌液再涂布新培养基进行培养。

储存条件：-80℃。

更多有关北京现货BL21(DE3)感受态细胞特价促销的价格及使用说明等，请联系我们的业务经理王欣女士咨询，我公司还销*(代"售")以下产品：
ARB14035 植物维生素D2(VD2)酶免分析 Plant vitamin d2,vd2 ELISA KIT
甘油醛-3-磷酸脱*酶 Sepharose CL-2B 9001-50-7
ARB13722 兔载脂蛋白A1(Apo-A1)免费代测 Rabbit apoprotein a1,apo-a1 ELISA KIT
ARB10168 人T细胞受体(TCR)检测服务 Human t cell receptor,tcr ELISA KIT
PY01-014-2  酵母膏(酵母浸膏)  发酵级  1公斤  
F030816 BIOTIN标记兔抗人IgM抗体 Rabbit Anti-Human IgM*BIOTIN
ARB12195 大鼠主要碱性蛋白(MBP)酶免分析 Rat major basic protein,mbp ELISA KIT
ARB13849 猪内皮型一氧化*(代"氮")合成酶3(eNOS-3)酶标法分析 Porcine endothelial nitric oxide synthase 3,enos-3 ELISA KIT
ARB13176 小鼠缺血修饰白蛋白(IMA)Elisa定量检测 Mouse ischemia modified albumin,ima ELISA KIT
J0317             山羊抗兔IgG(H+L)抗血清          
31282-04-9 牛胆盐 Bile Salt(Bovine)
ARB11637 人淋巴毒素α(LTA)血清中含量检测 Human lymphotoxinα,lta ELISA KIT
ARB11752 人嗜酸粒细胞趋化蛋白EotAxIn 1(EotAxIn 1/CCL11)Elisa分析 Human eotaxin 1 ELISA KIT
1461-15-0 Calcein *黄绿素
ARB10749 人麦角蛋白IgA(GlIAdIn-IgA)ELISA检测服务 Human gliadin iga ELISA KIT
BTN90901 菌体内毒素清除剂 Bacterial Endotoxin Erasol
BTN130418 Protein A琼脂糖 Protein A Agarose
硫*(代"酸")* Piperacillin sodiu*(代"m") salt 7778-80-5
苏丹红7B Methyl α-D-mannopyranoside 6368-72-5
DP321 快捷型植物基因组DNA提取系统
北京现货BL21(DE3)感受态细胞特价促销关键词：WE0253,DE3,BL21(DE3)感受态细胞,BL21(DE3)Competent Cell

*化硝基四氮唑蓝 Dimedone 298-83-*(代"9")
ARB13310 口蹄疫非结构蛋白3AB抗体代做ELISA实验 
F030211 HRP标记山羊抗小鼠IgA抗体 Goat Anti-Mouse IgA*HRP
N,N,N",N"-四甲基-S-(1-氧代-2-吡*(代"啶")基)硫*(代"脲")鎓六*磷酸盐 Cinnamic acid 212333-72-7
ARB11410 人诱导型一氧化*(代"氮")合成酶(INOS)尿液中含量检测 Human inducible nitric oxide synthase,inos ELISA KIT
ARB13616 兔子细胞间粘附分子3(ICAM-3/CD50)含量检测 Rabbit intercellular adhesion molecule 3,icam-3 ELISA KIT
PY08-054  孟加拉红琼脂平板(虎红琼脂平板) 9CM  10皿/盒，用于霉菌和酵母菌的计数
ARB10579 人同型半胱*酸(Hcy)含量测试 Human homocysteine acid,hcy ELISA KIT
F050317 狗IgG抗体 Dog IgG
ARB11833 人整合素连接激酶1(ILK-1)ELISA代测服务 Human integrin-linked kinase 1,ilk-1 ELISA KIT
HC0346 BRAND  8道整支消毒移液器
ARB10646 人血管内皮细胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)Elisa方法检测 Human vascuolar cell adhesion molecule 1,vcam-1 ELISA KIT
ARB13602 兔子层连蛋白/板层素(LN)酶标法分析 Rabbit laminin,ln ELISA KIT
硫*(代"酸")葡聚糖 Sodium iodide 9011-18-1
F050101 辣根酶标记盐*(代"酸")克伦特罗 HRP*Clenbuterol
PY04-106  孔雀石绿  1ml/支×10支  每支预热至50℃后，加入100ml灭菌冷却至50℃ 改良罗氏培养基基础中，用于结核分枝杆菌的分离培养、保存及药敏试验用
北京现货BL21(DE3)感受态细胞特价促销关键词：WE0253,DE3,BL21(DE3)感受态细胞,BL21(DE3)Competent Cell


·Annexin V-PE/7-AAD凋亡流式检测试剂盒
编号：WE0328
英文名称：Annexin V-PE/7-AAD Apoptosis Detection Kit
规格：50次
  本试剂盒是一种采用Annexin-PE与7-AAD双染法进行细胞早期凋亡分析的检测试剂盒。
  细胞凋亡早期改变发生在细胞膜表面，这些细胞膜表面的改变之一是磷脂酰丝*酸(PS)从细胞膜内转移到细胞膜外，使PS暴露在细胞膜外表面。PS是一种带负电荷的磷脂，正常主要存在于细胞膜的内面，在细胞发生凋亡时细胞膜上的这种磷脂分布的不对称性被破坏而使PS暴露在细胞膜外。Annexin V具有易于结合到磷脂类如PS的特性，对PS有高度的亲和性。因此，该蛋白可充当一敏感的探针检测暴露在细胞膜表面的PS。PS转移到细胞膜外不是凋亡所独特的，也可发生在细胞坏死中。两种细胞死亡方式间的差别是在凋亡的初始阶段细胞膜是完好的，而细胞坏死在其早期阶段细胞膜的完整性就被破坏。7-AAD是一种核酸染料，可进入死细胞内与DNA结合，能够对坏死和凋亡晚期的细胞进行染色。7-ADD与PI有着相似的荧光特性，但其发射波谱较PI窄，对其他检测通道的干扰更小，在多色荧光分析中是PI的最佳替代品，因此通常将Annexin V-PE与ADD配合染色，以区别凋亡早期细胞与坏死细胞和凋亡的晚期细胞。

试剂盒组成：

组份	50次
4×Binding Buffer	10ml
7-AAD Viability Staining Solution	500μl
Annexin V-PE	250μl

注意事项：
1、消化细胞时不能用含EDTA的胰酶。
2、本试剂盒需使用流式细胞仪进行检测。
3、需自备PBS和去离子水。
4、荧光染料均存在淬灭问题，保存和使用过程中请尽量注意避光，以减缓荧光淬灭。
5、请穿实验服并戴一次性手套操作。

操作步骤：

1、细胞样品的准备：
a．对于贴壁细胞：小心收集细胞培养液到一离心管内备用。用胰酶消化细胞，至细胞可以被轻轻用移液管或枪头吹打下来时，加入前面收集的细胞培养液，吹打下所有的贴壁细胞，并轻轻吹散细胞。再次收集到离心管内。1000×g左右离心3-5分钟，沉淀细胞。对于特定的细胞，如果细胞沉淀不充分，可以适当延长离心时间或稍稍加大离心力。小心吸除上清，可以残留约50μl左右的培养液，以避免吸走细胞。加入约1ml 4℃预冷的PBS，重悬细胞，再次离心沉淀细胞，小心吸除上清。再次加入1ml 4℃预冷的PBS，重悬细胞，再次离心沉淀细胞。
b．对于悬浮细胞：1000×g左右离心3-5分钟，沉淀细胞。对于特定的细胞，如果细胞沉淀不充分，可以适当延长离心时间或稍稍加大离心力。小心吸除上清，可以残留约50微升左右的培养液，以避免吸走细胞。加入约1ml 4℃预冷的PBS，重悬细胞，并转移到1.5毫升离心管内。再次离心沉淀细胞，小心吸除上清，可以残留约50μl左右的PBS，以避免吸走细胞。再次加入1ml 4℃预冷的PBS，重悬细胞，再次离心沉淀细胞。

2、用去离子水按1:3稀释Binding Buffer(4ml Binding Buffer+12ml去离子水)。
3、用250μl Binding Buffer重新悬浮细胞，调节其浓度为1×106/ml。
4、取 100μl 的细胞悬液于 5ml 流式管中，加入 5μl Annexin V-PE 和 10μl 7-AAD 溶液。
5、混匀后于室温避光孵育 15 分钟。
6、在反应管中加400μl PBS，流式细胞仪(FACS)分析。

实验图例：

Jurkat细胞用顺铂诱导凋亡后用Annexin V-PE/7AAD双染流式分析图谱

储存条件：2～8℃，避光保存

我公司强烈推荐克隆与表达系列产品，热情期待您的咨询选购北京现货BL21(DE3)感受态细胞特价促销。