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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20℃,避免反复冻融
- 保质期:
长期
- 英文名:
BAmp DNA Polymerase
- 库存:
708
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博主要从事生物试剂的生产和销*(代"售"),产品线涵盖BAmp DNA Polymerase多少钱在内的分子生物学试剂产品,还包括PCR及荧光定量PCR、核酸提取试剂盒类、样本核酸保护试剂、核酸提取、克隆与转化、蛋白纯化、蛋白检测、免疫组化、细胞凋亡与抗体等。
名称:BAmp DNA Polymerase
编号:WE0105
规格:500U
英文名:BAmp DNA Polymerase
产地:国产|进口
品牌:百奥莱博
BAmp DNA Polymerase在具有5"-3"DNA聚合酶活性的同时具有3"-5"外切酶活性,是一种兼具高扩增效率和高保真性的耐热聚合酶。其主要特点是可以高效扩增长片段DNA,尤其在扩增>10 kb的DNA片段方面,其优势更加明显,所扩增的片段最长可以达到40 kb。该酶具有高度的延伸和校对能力,保真度高于普通Taq酶。优化的缓冲体系使酶的应用更加广泛,即使以复杂的基因组DNA为模板,也可以保证很高的特异性和长片段的扩增。特有的PCR增强剂(C-Solution)使GC含量高,有二级结构和重复序列的复杂模板也能得到高效扩增。使用本制品扩增得到的PCR产物的3"端附有一个“A”碱基,因此可直接用于T/A克隆。适用于高保真度的长片段PCR扩增和复杂模板的PCR扩增,如构建基因图谱、序列测定及分子遗传学研究等。
产品组成:
| 组份 | 500U |
| BAmp DNA Polymerase, 5 U/μl | 100μl |
| 10×PCR Buffer | 1.8ml |
| 5×C-Solution(PCR Enhancer) | 1.8ml |
注意:本产品的10×PCR Buffer中含有15 mM*离子。
活性定义:
用活性化的大马哈鱼精子DNA作为模板/引物,在74℃,30分钟内,将10 nmol脱氧核苷酸掺入到酸性不溶物质所需的酶量定义为1个活性单位(U)。
质量控制:
1、经过多次柱纯化,SDS-PAGE检测其纯度大于99%;
2、经检测无外源核酸酶活性;
3、PCR方法检测无宿主残余DNA;
4、能有效地扩增人基因组中的单拷贝基因;
5、室温存放一个月,无明显活性改变。
使用方法:
以下举例为以人基因组DNA为模板,扩增1 kb的片段的PCR反应体系和反应条件,实际操作中应根据模板、引物结构和目的片段大小不同进行相应的改进和优化。
1、PCR反应体系
| 试剂 | 50μl反应体系 | 终浓度 |
| 10×PCR Buffer | 5μl | 1× |
| dNTP Mix,10 mM each | 1μl | 200μM each |
| Forward Primer,10μM | 2μl | 0.4μM |
| Reverse Primer,10μM | 2μl | 0.4μM |
| Template DNA | <0.5μg | <0.5μg/50μl |
| BAmp DNA Polymerase, 5 U/μl | 0.5μl | 2.5 U/50μl |
| 5×C-Solution | 10μl | 1× |
| ddH2O up to | 50μl |
注意:
1)引物浓度请以终浓度0.1-1.0μM作为设定范围的参考。扩增效率不高的情况下,可提高引物的浓度;发生非特异性反应时,可降低引物浓度,由此优化反应体系。
2)当利用常规条件仍然未能得到扩增时,可以加入5×C-Solution(PCR Enhancer),PCR增强剂可以使富含GC,有二级结构和重复序列的复杂模板到高效扩增,可以提高反应的特异性。但PCR增强剂也有可能使常规条件成功扩增的反应扩增失败,因此第一次使用PCR增强剂时建议设置一个不加PCR增强剂的对照。
2、PCR反应条件
| 步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
| 预变性 | 94℃ | 2 min | |
| 变性 | 94℃ | 30 s | 25-35 个循环 |
| 退火 | 55-65℃ | 30 s | |
| 延伸 | 72℃ | 30 s | |
| 终延伸 | 72℃ | 5 min |
注意:
1)一般实验中退火温度比扩增引物的熔解温度Tm低5℃,无法得到理想的扩增效率时,适当降低退火温度;发生非特异性反应时,提高退火温度,由此优化反应条件。
2)延伸时间应根据所扩增片段大小设定,BAmp DNA Polymerase的扩增效率为2 kb/min。
3)可根据扩增产物的下游应用设定循环数。如果循环次数太少,扩增量不足;如果循环次数太多,错配机率会增加,非特异性背景严重。所以在保证产物得率的前提下应尽量减少循环次数。
储存条件:-20℃,避免反复冻融。
关键词:WE0105,BAmp DNA Polymerase
更多有关BAmp DNA Polymerase多少钱的价格及使用说明等,请联系我们的业务经理王欣女士咨询,我公司还销*(代"售")以下产品:
| 编号 | 名称 |
| WE0164 | 高纯质粒大提试剂盒 |
| WE0185 | 血块基因组DNA提取试剂盒 |
| WE0226 | 人类基因组DNA |
| WE0354 | 抗β-Actin单克隆抗体 |
| WE0177 | 柱式中量血液基因组DNA提取试剂盒(1~5ml) |
| WE0271 | Protein A琼脂糖凝胶 |
| WE0400 | 口腔拭子DNA样本保存管 |
| WE0372 | HRP标记驴抗山羊IgG(H+L) |
| WE0113 | BaHF高保真DNA聚合酶 |
| WE0132 | cDNA第一链合成试剂盒 |
| WE0318 | 柠檬酸缓冲液(IHC抗原修复液,100×) |
| WE0328 | Annexin V-PE/7-AAD凋亡流式检测试剂盒 |
| WE0108 | 2×Pfu MasterMix(含染料) |
| WE0134 | SuperSYBR Mixture(低含量ROX校正染料) |
| WE0252 | DH5α感受态细胞 |
| WE0376 | HRP标记山羊抗人IgM(Fc5μ) |
| WE0355 | 抗β-Tubulin单克隆抗体 |
| WE0357 | 抗GAPDH多克隆抗体 |
| WE0195 | miRNA提取试剂盒 |
| WE0395 | 口腔拭子DNA样本保存管 |
| WE0111 | BaldStar Taq DNA Polymerase |
| WE0137 | 一步法Real-Time RT-qPCR试剂盒 |
| WE0392 | FITC标记山羊抗小鼠IgG(H+L) |
| WE0341 | HRP标记抗His标签多克隆抗体 |
| WE0100 | PCR Mix(含染料)(滴瓶装) |
| WE0114 | 2×BaHF MasterMix(含染料) |
| WE0112 | 2×BaldStar Taq MasterMix(含染料) |
| WE0118 | 结核分枝杆菌基因分型试剂盒(VNTR-9) |
| WE0236 | 大片段Bst DNA聚合酶 |
| WE0210 | UltraStain核酸染料 |
| WE0197 | 血液RNA提取试剂盒(含DNase I) |
| WE0320 | 封闭用正常山羊血清工作液(免疫组化封闭液) |
| WE0399 | 游离DNA样本保存管(10ml,PET) |
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文献和实验We report a simple homogeneous fluorescence assay for quantification of DNA polymerase function in high throughput. The fluorescence signal is generated by the DNA polymerase triggering opening of a molecular beacon extension of the template
The Polymerase Chain Reaction (PCR)
. Did He Really Invent PCR? • The basic principle of replicating a piece of DNA using two primers had already been described by Gobind Khorana in 1971:– Kleppe et al. (1971) J. Mol. Biol. 56, 341-346. • Progress was limited by primer synthesis and polymerase
能催化从四种5′-脱氧核苷三磷酸游离出焦磷酸而使DNA进行聚合反应的酶。EC2.7.7.7.。必须以DNA为模板,合成的DNA与模板具有互补的碱基排列(碱基互补性)。是与DNA复制和修复有关的重要的酶,虽可从许多组织分离出来,但对大肠杆菌的这种酶的研究较为先进。康伯格(A.Kornberg,1958)最初从大肠杆菌将此酶纯化,并弄清了其结构和特异性,但以后经过分子遗传学的研究,已明确了这种酶主要与DNA修复有关。因此重新进行与DNA复制有关酶的检索,发现两种新的酶。康伯格最初发现的酶称为
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