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- 详细信息
- 技术资料
- 库存:
187
- 英文名:
Blood DNA Extraction Kit
- 保质期:
长期
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
冷藏
- 规格:
100次
特别提示:包括磁珠法血液DNA提取试剂盒在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:磁珠法血液DNA提取试剂盒
英文名称:Blood DNA Extraction Kit
产品货号:CZ001
产品规格:100次
产品描述:
本产品适用于从抗凝处理的全血样品中快速、高效地提取基因组 DNA。提 取过程采用超顺磁性微球,无需离心操作;使用预制的缓冲液,可直接进行提取,无需预先去除红细胞。
本产品既可以手动进行少量样品的提取,也适合于用自动化工作站进行高通量操作。提取的产物可 用于酶切、PCR 扩增、检测等后续实验。
操作流程
首次使用前:
● 在Binding Buffer中加入指定量(见瓶身标签)的异丙chún(分析纯),混匀后室温下密闭保存。
● 在Washing Buffer I中加入指定量(见瓶身标签)的无水乙醇(分析纯),混匀后室温下密闭保存。
● 在Washing Buffer II中加入指定量(见瓶身标签)的无水乙醇(分析纯),混匀后室温下密闭保存。
准备工作:
● 1.5 mL离心管:2个/样品
● 单通道移液器:20 μL、200 μL、1000 μL
● 漩涡振荡器
● 垂直混合仪
● 恒温水浴锅/金属浴:55℃
● 磁性分离器:可选用百奥莱博磁性分离器
操作步骤:
1.裂解
取一个新的1.5 mL离心管,加入200 μL的抗凝血液样品(不足200 μL时可用PBS或Elution Buffer补足),再分别加入10 μL的 Proteinase K Solution和230 μL的Lysis Buffer,以涡旋振荡器zuì大转速漩涡震荡10 s后,置于55℃条件下反应5 min。
2.结合
加入320 μL的Binding Buffer(检查是否已加入异丙chún)和20 μL的Magnetic beads,以涡旋振荡器zuì大转速漩涡震荡10 min(或漩涡震荡10 s后置于垂直混合仪上反应10 min)。然后将离心管置于磁性分离器上放置2 min,用移液器移去上清液并取下离心管。
注:此步骤的磁性分离时间应不少于2 min。
3.洗涤
(1)加入600 μL Washing Buffer I(检查是否已加入无水乙醇),漩涡震荡1 min或用移液器缓慢吹打磁珠20次,使磁珠充分重悬,再将离心管置于磁性分离器上直至溶液澄清,用移液器移去上清液并取下离心管。重复该步骤一次。
(2)加入600 μL Washing Buffer II(检查是否已加入无水乙醇),漩涡震荡1 min或用移液器缓慢吹打磁珠20次,使磁珠充分重悬,再于室温下静置1 min后,将离心管置于磁性分离器上直至溶液澄清,用移液器移去上清液。
注:步骤(2)应尽量除尽洗涤液。
4.干燥
保持离心管于磁性分离器上,于室温下静置10 min后,取下离心管。
5.洗脱
加入100~200 μL Elution Buffer,用移液器缓慢吹打磁珠50次,使磁珠充分重悬。然后于55℃条件下加热5 min,将离心管置于磁性分离器上直至溶液澄清,转移上清液至新的离心管中,此即为纯化得到的基因组DNA,可保存于-20℃。
注意事项:
1.操作之前,请务必认真阅读本产品手册。
2.血液样品的质量对产物DNA的纯化量有较大影响,应避免反复冻融血液样品。
3.应避免对磁珠进行冷冻、离心等操作。
4.磁珠取用前应充分重悬均匀。
5.磁珠干燥前,应使用移液器吸尽洗涤液。
6.应避免磁珠过度干燥,否则会严重降低核酸洗脱效率。
7.建议使用质量较好的离心管和移液器吸头,避免因粘附磁珠而造成损失。
8.在96孔板中进行磁性分离操作时,磁珠吸附时间可适当延长至4~5 min。
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