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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
室温(15~30℃)
- 保质期:
长期
- 英文名:
RNAtiqu Plant RNA Extraction Kit(DNase I)
- 库存:
577
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专业生产销*(代"售")北京现货植物RNA提取试剂盒(含DNase I)(国产,进口),我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:北京现货植物RNA提取试剂盒(含DNase I)(国产,进口)
品牌:百奥莱博
产地:国产|进口
编号:WE0200
本试剂盒用于从各种植物中提取纯化高品质总RNA,也适用于真菌菌丝RNA的提取。独特的Shredder分离柱,用于匀质化和过滤高粘度的植物或真菌裂解物,同时采用硅基质膜吸附RNA进行纯化,使多聚糖等各种污染物通过洗涤被有效去除,经洗脱的RNA可直接用于各种下游实验。由本试剂盒提取RNA分子量大于200碱基,纯度高,几乎无DNA残留。如果是对微量DNA非常敏感的RNA实验,残留的DNA可利用无RNase的DNase在柱上进行消化去除。提取的RNA可用于Northern Blot、Dot Blot 、RT-PCR和体外翻译等实验。
试剂盒组成:
| 组份 | 50次 |
| DNase I | 1000 U |
| 10×Reaction Buffer | 1000μl |
| Buffer RL | 35ml |
| Buffer RLC | 35ml |
| Buffer RW1 | 40ml |
| Buffer RW2(浓缩液) | 11ml |
| RNase-Free Water | 10ml |
| 过滤柱FL及收集管 | 50套 |
| 吸附柱RM及收集管 | 50套 |
| RNase-Free离心管(1.5ml) | 50个 |
保存条件:DNase I及10×Reaction Buffer -20℃保存,其它组分室温(15~30℃)。
自备试剂:β-巯基乙醇、无水乙醇(新开封或提取RNA专用)。
实验前准备及重要注意事项/strong>:
1、预防RNase污染,应注意以下几方面:
① 使用无RNase的塑料制品和枪头,避免交叉污染。
② 配制溶液应使用无RNase的水。
③ 操作人员戴一次性口罩和手套,实验过程中要勤换手套。
2、预防RNase污染,应注意以下几方面:
① 使用无RNase的塑料制品和枪头,避免交叉污染。
② 玻璃器皿应在使用前于180℃高温下干烤4小时,塑料器皿可在0.5 M NaOH中浸泡10分钟,用水彻底冲洗后高压灭菌。
③ 配制溶液应使用无RNase的水。
④ 操作人员戴一次性口罩和手套,实验过程中要勤换手套。
3、提取的样品避免反复冻融,否则影响RNA提取的量和质量。
4、Buffer RL在使用前请加入β-巯基乙醇,1ml Buffer RL加10μl β-巯基乙醇。加入β-巯基乙醇的Buffer RL室温可保存1个月。Buffer RLC使用时不需加β-巯基乙醇。
5、第一次使用前应按照试剂瓶标签的说明先在Buffer RW2中加入无水乙醇。
6、Buffer RL和Buffer RLC如果产生沉淀,请加热使其溶解后室温放置。
7、所有离心步骤均在室温下进行,且所有操作步骤动作要迅速。
操作步骤:
1、50-100 mg植物组织在液氮中迅速研磨成粉末,加入600μl Buffer RL(使用前检查是否加入β-巯基乙醇)或Buffer RLC。涡旋振荡使其充分裂解。
注意:
① Buffer RL主要成分为异硫*酸胍,适用于大多数植物组织的裂解。但有些植物组织(如玉米的胚乳),由于次级代谢产物较特殊,异硫*酸胍使样品产生沉淀,导致RNA提取效果不佳,此时可加入Buffer RLC替代Buffer RL。
② 56℃孵育1-3分钟有助于组织的裂解,但是淀粉含量高的植物不要进行高温孵育。
2、将步骤1所得全部液体转移至已装入收集管的过滤柱中,12000rpm(~~13400×g)离心2分钟,将收集管中的上清液转移到一个新的离心管(自备)中。
注意:
① 在吸取液体时可以将枪头尖端剪掉,便于取样。
② 过滤柱FL可以除去大部分的碎片,但仍会有小部分流出,离心后会在收集管内形成沉淀,在进行下一步时注意避免吸到沉淀。
3、在步骤2所得干净的裂解液中加入0.5倍体积的无水乙醇,迅速混匀。
注意:加入乙醇后可能会产生沉淀,但不影响后续试验。
4、将上步得到的溶液转移到已装入收集管的吸附柱中,若一次不能将全部溶液加入吸附柱中,请分两次转入; 12000rpm离心15秒,弃掉废液,将吸附柱重新放回收集管中。
5、向吸附柱中加入350μl Buffer RW1,12000rpm离心1分钟,弃废液,将吸附柱重新放回收集管中。
6、配制DNase I 混合液:取52μl RNase-Free Water,向其中加入8μl 10×Reaction Buffer和20μl DNase I(1 U/μl),混匀, 配制成终体积为80μl的反应液。
7、向吸附柱中直接加入80μl DNase I 混合液,20-30℃孵育15分钟。
8、向吸附柱中加入350μl Buffer RW1, 12000rpm离心1分钟,弃废液,将吸附柱重新放回收集管中。
9、向吸附柱中加入500μl Buffer RW2(使用前检查是否加入无水乙醇), 12000rpm离心15秒,弃废液。
10、重复步骤9。
11、将吸附柱放回收集管中,12000rpm离心1分钟,将吸附柱置于室温数分钟,以彻底晾干吸附柱中的无水乙醇。
注意:这一步的目的是将吸附柱中残余乙醇去除,乙醇残留会影响后续的酶促反应(酶切、PCR等)。
12、将吸附柱装入新的离心管中,向吸附膜的中间加入30-50μl RNase-Free Water,室温放置1分钟,12000rpm离心1分钟,得到的RNA溶液保存在-70℃,防止降解。
注意:
① RNase-Free Water体积不应小于30μl,体积过小影响回收率。
② 如果要提高RNA的产量,可用30-50μl新的RNase-Free Water重复步骤12。
③ 如果要提高RNA浓度,可将得到的溶液重新加入到吸附柱中,重复步骤12。
储存条件:室温(15~30℃)。
关于北京现货植物RNA提取试剂盒(含DNase I)(国产,进口)的更详细说明,请致电我公司咨询,我们将以最饱满的热情为您提供解答,此外,我公司专业供应下列产品:
·生物素化驴抗人IgG(H+L)
编号:WE0371
英文名称:Donkey Anti-Human IgG,Biotin Conjugated
规格:100μl
本产品为生物素标记的经亲和纯化的驴抗体,特异识别人IgG重链和轻链,检测灵敏度高,本底低,对其他种属IgG无明显交叉反应。生物素(Biotin)与链霉亲和素(Streptavidin,SA)具有极高的亲和力,反应呈高度专一性。每个链霉亲和素分子具有4个生物素分子结合位点,因此,链霉亲和素可同时以多价形式结合生物素。生物素化的抗体与辣根过氧化物酶或碱性磷酸酶标记的链霉亲和素联合使用,将检测信号级联放大,最后通过显色反应或化学发光可检测到微量蛋白。
免疫原:人IgG
缓冲液:0.01M PBS,50%甘油,pH7.6
稳定剂:15 mg/ml BSA(不含IgG和蛋白酶)
防腐剂:0.05%叠氮*
应用范围:
WB 酶链亲和素检测(1:20000-400000)
ELISA(1:20000-400000)
Enzyme immunohisto/cytochemistry(1:500-5000)
Fluorescence Immunohisto/cytochemistry(1:200-1000)
Flow cytometry(1:200-1000)
·HRP标记驴抗兔IgG(H+L)
编号:WE0366
英文名称:Donkey Anti- Rabbit IgG,Peroxidase Conjugated
规格:100μl
本产品为过氧化物酶标记的经亲和纯化的驴抗体,特异识别兔IgG,检测灵敏度高,本底低,可用于Western Blot、ELISA 和免疫组化检测。酶标记抗体,是一类广泛用于免疫学、分子生物学及临床医学各个分支学科中的免疫化学制剂,具有特异、敏感和安全的特点。
免疫原:兔IgG
缓冲液:0.01M PBS,50%甘油,pH7.6
稳定剂:15 mg/ml BSA(不含IgG和蛋白酶)
防腐剂:无(叠氮*是HRP抑制剂,抗体稀释液中请避免使用叠氮*作为防腐剂)
应用范围:
WB ECL发光检测(1:10000-200000)
ELISA(1:5000-100000)
WB 显色检测(1:5000-100000)
Immunohisto/cytochemistry(1:500-5000)
北京现货植物RNA提取试剂盒(含DNase I)(国产,进口)关键词:植物RNA提取试剂盒(含DNase I),RNAtiqu Plant RNA Extraction Kit(DNase I),WE0200
·Western Blot封闭液Ⅰ(BSA)
编号:WE0306
英文名称:BSA Blocking Buffer
规格:500ml
Western Blot 实验中,为防止印迹膜与检测系统中的蛋白成分(如抗体IgG等)发生非特异性吸附,导致实验结果不清晰,通常在进行一抗孵育前需预先对印迹膜上的非特异结合位点进行封闭。本产品以BSA为基础,配合其他有效成份,可快速高效地封闭膜上多余的结合部位,减少非特异结合情况的产生,降低背景,适用于各种转印膜的封闭,操作方便快捷。另外,本产品特别添加了蛋白稳定剂,可保证每次实验封闭效果稳定可靠。
注意事项:
1、每次使用时,必须保证封闭液将印迹膜完全浸没,以免影响封闭效果。
2、本产品含有防腐剂,操作时请佩戴手套进行防护。
3、本产品仅用于科研,不能用于人体实验或人体治疗。
操作步骤:
1、本产品无需稀释,开盖即用。
2、目的蛋白转移完毕后,将印迹膜放入容器中,加入适量BSA Blocking Buffer(以完全覆盖印迹膜为宜)。
3、室温孵育30分钟至2小时,必要时可2~8℃孵育过夜。
4、封闭结束后弃去BSA Blocking Buffer,进行Western Blot后续操作。
储存条件:室温
北京现货植物RNA提取试剂盒(含DNase I)(国产,进口)关键词:植物RNA提取试剂盒(含DNase I),RNAtiqu Plant RNA Extraction Kit(DNase I),WE0200
·无RNA酶水
编号:WE0217
英文名称:RNase-Free Water
规格:100ml
本品为不含RNase的水,常用于RNA的提取纯化、RT-PCR等分子生物学实验。
·粪便基因组DNA提取试剂盒
编号:WE0180
英文名称:Stool Genomic DNA Extraction Kit
规格:50次
本试剂盒适用于从粪便样本中提取总DNA,包括细胞、细菌、寄生虫以及病毒DNA,也适用于含有高浓度PCR反应抑制剂的样本。本品可处理多至300 mg的粪便样本,纯化获得主要为20-30 kb的DNA片段,纯化过程中不需*酚或*仿等有毒溶剂,无需乙醇沉淀,可在一小时内获得高纯度的DNA。本试剂盒采用独特的缓冲系统使裂解液中的DNA高效结合到吸附柱上,同时粪便中的蛋白杂质及抑制下游反应的其他有机化合物可流过膜,PCR和酶反应的抑制剂以及残留的杂质可通过两步洗涤步骤有效去除,最后使用低盐缓冲液或水洗脱,即可获得高纯度DNA。纯化得到的DNA可以直接用于酶切、PCR、Real-Time PCR、文库构建、Southern Blot、分子标记等下游实验。
试剂盒组成:
| 组份 | 50次 |
| Buffer SW | 60ml |
| Buffer SL | 60ml |
| Buffer GL | 50ml |
| Buffer GW1(浓缩液) | 2×13ml |
| Buffer GW2(浓缩液) | 15ml |
| Buffer GE | 15ml |
| 吸附柱DM及收集管 | 50套 |
实验前准备及重要注意事项/strong>:
1、样品应避免反复冻融,否则会导致提取的DNA 片段较小且提取量下降。
2、第一次使用前应按照试剂瓶标签的说明预先在Buffer GW1和GW2中加入无水乙醇。
3、使用前请检查Buffer SL和Buffer GL是否出现结晶或者沉淀,如有结晶或者沉淀,请将Buffer SL和Buffer GL于56℃水浴重新溶解。
4、如果下游实验对RNA污染比较敏感,可以在加入Buffer SL后加入4μl DNase-Free的RNase A(100 mg/ml), RNase A本试剂盒并未提供,如需要可单独向本公司订购,货号:WE0225S。
操作步骤:
1、取100-300 mg粪便样本,置于离心管(自备)中。
2、加入1ml Buffer SW,涡旋振荡3-5分钟,使样本均匀分散于溶液中。12000rpm(~13400×g)离心1分钟,弃上清。
3、加入1ml Buffer SL,涡旋振荡3-5分钟,使样本均匀分散于溶液中,65℃水浴20分钟,期间可每隔5分钟涡旋振荡15秒。
注意:如需去除RNA,可在上述步骤完成后,加入4μl浓度为100 mg/ml的RNase A溶液(货号:WE0225S),震荡混匀,室温放置5-10分钟。
4、12000rpm离心3分钟,将上清移至新的离心管(自备)中。
5、向上清液中加等体积Buffer GL,颠倒混匀15-25次,冰上放置5分钟。12000rpm离心5分钟。
注意: 此时液体可能为透明或浑浊状态,均不影响实验。
6、将步骤5中所得上清加入到已装入收集管的吸附柱中,若一次不能加完溶液,可分多次转入。12000rpm(~~13400×g)离心1分钟,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放回收集管中。
7、向吸附柱中加入500μl Buffer GW1(使用前检查是否已加入无水乙醇),12000rpm离心1分钟,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放回收集管中。
8、重复步骤7。
9、向吸附柱中加入500μl Buffer GW2(使用前检查是否已加入无水乙醇),12000rpm离心1分钟,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放回收集管中。
10、12000rpm离心2分钟,倒掉收集管中的废液。将吸附柱置于室温数分钟,以彻底晾干。
注意:这一步的目的是将吸附柱中残余的乙醇去除,乙醇的残留会影响后续的酶促反应(酶切、PCR 等)。
11、将吸附柱置于一个新的离心管(自备)中,向吸附柱的中间部位悬空滴加50-100μl Buffer GE或灭菌水,室温放置2-5分钟,12000rpm离心1分钟,收集DNA溶液,-20℃保存DNA。
注意:
1)如果下游实验对pH值或EDTA敏感,可以用灭菌水洗脱。洗脱液的pH值对洗脱效率有很大影响,若用水做洗脱液应保证其pH值在7.0-8.5(可以用NaOH将水的pH值调到此范围),pH值低于7.0时会降低洗脱效率。
2)离心之前室温孵育5分钟可以增加产量。
3)用另外的50-100μl Buffer GE或灭菌水再次洗脱可以增加产量。
4)如果要提高DNA的终浓度,可以将步骤11所得的DNA洗脱液重新加至吸附膜上,重复步骤11;可以增加DNA的终浓度,但可能会减少总产量。如果DNA的量小于1μg,推荐用50μl Buffer GE或灭菌水洗脱。
5)保存在水中的DNA会受到酸性水解作用的影响,如需长期保存,推荐用Buffer GE洗脱并于-20℃保存。
6)基因组DNA模板中残余的微量PCR抑制物可能对PCR反应产生不良影响,可将DNA稀释2-10倍通常即可解决。
储存条件:室温(15~30℃)。
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