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Y Human Male DNA Quantification Kit
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728
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北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专业生产销*(代"售")北京现货Y染色体人基因组DNA定量试剂盒库存,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:北京现货Y染色体人基因组DNA定量试剂盒库存
英文名:Y Human Male DNA Quantification Kit
品牌:百奥莱博
产地:国产|进口
编号:WE0232
规格:1ml|5ml
本产品是一种检测人类男性Y染色体浓度的实时荧光定量PCR试剂盒,包括精心优化的PCR反应液、引物混合物、标准品,尤其适用于珍贵、微量DNA样本的定量检测。试剂盒采用了全新高效、快速的热启动扩增酶Goldstar Taq DNA Polymerase,有效避免常温条件下由引物和模板非特异性结合或引物二聚体而产生的非特异性扩增。本品实现对Y染色体的准确定量,后续可应用于各种领域如遗传制图、物种多态性研究、疾病基因定位、亲子鉴定和法医鉴定等研究分析。
ROX染料用于校正定量PCR仪孔与孔之间产生的荧光信号误差,一般用于ABI、Stratagene等公司的Real Time PCR 扩增仪。不同仪器的激发光学系统有所不同,因 此ROX染料的浓度必须与相应的荧光定量PCR仪相匹配。
不需要ROX校正的仪器:Roche LightCycler 480,Roche LightCyler 96,Bio-radiCyler iQ,iQ5,CFX96等。
需要Low ROX校正的仪器:ABI Prism7500/7500 Fast,QuantStudio® 3 System,QuantStudio® 5 System, QuantStudio® 6 Flex System,QuantStudio® 7 Flex System,ViiA 7 system, Stratagene Mx3000/Mx3005P,Corbett Rotor Gene 3000等。
需要High ROX校正的仪器:ABI Prism7000/7300/7700/7900,Eppendorf,ABI Step One/Step One Plus等。
我公司的北京现货Y染色体人基因组DNA定量试剂盒库存,性价比高,货期短,送货上门,欢迎您来电咨询购买,另外,我公司还生产供应销*(代"售")下列产品:
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PY02-268A 哥伦比亚琼脂培养基基础 250克
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4-*基马尿酸* Thymoquinone 94-16-6
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BTN90901 菌体内毒素清除剂 Bacterial Endotoxin Erasol
北京现货Y染色体人基因组DNA定量试剂盒库存关键词:Y Human Male DNA Quantification Kit,WE0232,Y染色体人基因组DNA定量试剂盒
·SDS-PAGE分离胶缓冲液(4×)
编号:WE0287
英文名称:SDS-PAGE Separating Gel Buffer(4×)
规格:500ml
本产品为配制SDS-PAGE分离胶缓冲液,可用于配制各种浓度的变性及非变性PAGE凝胶,方便、快捷。产品中已加入10%SDS,使用时不用另外加入。
操作步骤:
根据目的蛋白分子量大小选择合适的PAGE分离胶配制浓度,最佳胶浓度请参考附表1。
I 灌制分离胶(各试剂使用量请参考附表2)
1、参照凝胶模具说明书,装配好凝胶模具。
2、将不同体积的30%Acr-Bis(29:1)、SDS-PAGE Separating Gel Buffer(4×)分离胶缓冲液和纯水在小烧杯或试管中混合。
3、加入10%APS和TEMED,轻轻搅拌使其混匀,避免产生气泡。
4、在凝胶模具中灌入适量分离胶溶液(对于mini-gel,凝胶液加至约距前玻璃板顶端1.5 cm或距梳齿约0.5 cm即可), 然后在分离胶溶液上轻轻覆盖一层1 cm的水层,使凝胶表面保持平整。
5、静置30-60分钟,待分离胶和水层之间出现一个清晰的界面后,表面凝胶已聚合。
II 灌制浓缩胶(各试剂使用量请参考附表3)
1、去除覆盖在分离胶上的水层。
2、将不同体积的30%Acr-Bis(29:1)、浓缩胶缓冲液和纯水在一个小烧杯或试管中混合。
3、加入10%过硫*(代"酸")铵和TEMED,轻轻搅拌使其混匀,避免产生气泡。
4、将浓缩胶溶液加至分离胶的上面,直至凝胶溶液到达前玻璃板的顶端。
5、将梳子插入凝胶内,避免产生气泡。
6、静置10~20分钟,等待浓缩胶聚合。
7、待凝胶聚合后,小心地拔出梳子,以免破坏加样孔。
8、进行常规电泳操作。
附表1. SDS-PAGE分离胶的浓度与最佳分离范围
| SDS-PAGE 分离胶浓度 | 最佳分离范围 |
| 6%胶 | 50-150 kD |
| 8%胶 | 30-90 kD |
| 10%胶 | 20-80 kD |
| 12%胶 | 12-60 kD |
| 15%胶 | 10-40 kD |
附表2. 配制SDS-PAGE分离胶
| 分离胶浓度 | 凝胶体积 | 所需各组分体积(单位:ml) | ||||
| 纯水 | 30%Acr-Bis(29:1) | 分离胶缓冲液(4×) | 10%APS | TEMED | ||
| 6% | 5ml | 2.75 | 1.0 | 1.25 | 0.05 | 0.004 |
| 10ml | 5.5 | 2.0 | 2.5 | 0.1 | 0.008 | |
| 15ml | 8.25 | 3.0 | 3.75 | 0.15 | 0.012 | |
| 20ml | 11 | 4.0 | 5 | 0.2 | 0.016 | |
| 8% | 5ml | 2.42 | 1.33 | 1.25 | 0.05 | 0.003 |
| 10ml | 4.8 | 2.7 | 2.5 | 0.1 | 0.006 | |
| 15ml | 7.25 | 4.0 | 3.75 | 0.15 | 0.009 | |
| 20ml | 9.7 | 5.3 | 5 | 0.2 | 0.012 | |
| 10% | 5ml | 2.08 | 1.67 | 1.25 | 0.05 | 0.002 |
| 10ml | 4.17 | 3.33 | 2.5 | 0.1 | 0.004 | |
| 15ml | 6.25 | 5.0 | 3.75 | 0.15 | 0.006 | |
| 20ml | 8.3 | 6.7 | 5 | 0.2 | 0.008 | |
| 12% | 5ml | 1.75 | 2.0 | 1.25 | 0.05 | 0.002 |
| 10ml | 3.5 | 4.0 | 2.5 | 0.1 | 0.004 | |
| 15ml | 5.25 | 6.0 | 3.75 | 0.15 | 0.006 | |
| 20ml | 7.0 | 8.0 | 5 | 0.2 | 0.008 | |
| 15% | 5ml | 1.25 | 2.5 | 1.25 | 0.05 | 0.002 |
| 10ml | 2.5 | 5.0 | 2.5 | 0.1 | 0.004 | |
| 15ml | 3.75 | 7.5 | 3.75 | 0.15 | 0.006 | |
| 20ml | 5 | 10.0 | 5 | 0.2 | 0.008 | |
附表3. 配制5%SDS-PAGE浓缩胶
| 凝胶体积 | 所需各组分体积(单位:ml) | ||||
| 纯水 | 30%Acr-Bis(29:1) | 浓缩胶缓冲液(4×) | 10%APS | TEMED | |
| 2ml | 1.14 | 0.34 | 0.5 | 0.02 | 0.002 |
| 4ml | 2.28 | 0.68 | 1 | 0.04 | 0.004 |
| 6ml | 3.42 | 1.02 | 1.5 | 0.06 | 0.006 |
| 8ml | 4.56 | 1.36 | 2 | 0.08 | 0.008 |
储存条件:2~8℃
北京现货Y染色体人基因组DNA定量试剂盒库存关键词:Y Human Male DNA Quantification Kit,WE0232,Y染色体人基因组DNA定量试剂盒
·酵母质粒提取试剂盒
编号:WE0165
英文名称:Yeast Plasmid Extraction Kit
规格:50次
本试剂盒在普通碱裂解法的基础上进行了改进,全新的Lyticase可以有效的破除酵母细胞壁,新型硅基质膜和缓冲液系统能高效专一的结合质粒DNA,同时可以最大限度的去除蛋白及其他杂质,整个过程方便快捷,不需使用有毒有害试剂,可以同时处理多个样品。除适用于酵母细胞外,也可用于大肠杆菌。使用本试剂盒提取的质粒DNA可用于各种分子生物学实验,如连接、转化、测序和文库筛选等。
试剂盒组成:
| 组份 | 50次 |
| Buffer P1 | 15ml |
| Buffer P2 | 15ml |
| Buffer N3 | 20ml |
| Buffer PS | 15ml |
| Buffer PB | 10ml |
| Buffer PW(浓缩液) | 10ml |
| Buffer EB | 10ml |
| RNase A(10 mg/ml) | 150μl |
| 玻璃珠 | 2g |
| 吸附柱DM及收集管 | 50套 |
自备试剂:无水乙醇,异丙醇。
实验前准备及重要注意事项/strong>:
1、所有组分可在干燥、室温(15~30℃)环境稳定保存1年,将吸附柱置于2~8℃可保存更长时间,加入RNase A的Buffer P1 置于2~8℃可稳定保存6个月。
2、第一次使用前,将RNase A溶液全部加入到Buffer P1中,混匀,置于2–8℃保存。
3、第一次使用前应按照试剂瓶标签的说明先在Buffer PW中加入无水乙醇。
4、使用前请检查Buffer P2、Buffer N3是否出现结晶或者沉淀,如有结晶或者沉淀现象,可在37℃水浴几分钟,即可恢复澄清。
5、注意不要直接接触Buffer P2和Buffer N3,使用后应立即盖紧盖子。
6、提取的质粒量与酵母菌株、质粒拷贝数、培养条件等因素有关,通常酵母质粒拷贝数都很低,通过电泳或分光光度计法都很难检测到。
操作步骤:
1、取1-5ml酵母培养物(最多不超过5×107个酵母细胞,一般对于酿酒酵母OD600=1.0时,相当于1-2×107细胞/ml)加入离心管(自备)中,12000rpm(~~13400×g)离心30秒,收集菌体沉淀,尽量吸弃上清。
2、向菌体中加入250μl Buffer P1(请先检查是否已加入RNase A),重悬沉淀。
3、在以上混合物中加入40 mg的玻璃珠(Glass Beads),涡旋震荡10分钟。
4、向离心管中加入250μl Buffer P2,温和地上下颠倒混匀6-8次,室温放置5-10分钟,此时菌液应变得清亮粘稠。
注意:温和混匀,不要剧烈震荡,以免打断基因组DNA,造成提取的质粒中混有基因组DNA片段。如果溶液未变得清亮,提示可能菌量过大,裂解不彻底,应减少菌体量。
5、向离心管中加入350μl Buffer N3,立即温和地上下颠倒混匀6-8次,此时出现白色絮状沉淀,12000rpm离心20分钟。
注意:Buffer N3加入后应立即混匀,避免产生局部沉淀。
6、柱平衡: 向已装入收集管的吸附柱DM中加入200μl Buffer PS,12000rpm离心1分钟,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放回收集管中。
7、将步骤5所得上清加入到已装入收集管的吸附柱中,注意不要吸出沉淀。
注意:吸附柱的最大容积为750μl,溶液分2次过柱。
8、12000rpm离心1分钟,倒掉收集管中的废液,将吸附柱放回收集管中。
9、向吸附柱加入150μl Buffer PB,12000rpm离心1分钟,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放回收集管中。
10、向吸附柱中加入750μl Buffer PW(请先检查是否已加入无水乙醇),12000rpm离心1分钟,倒掉收集管中的废液。
11、将吸附柱重新放回收收集管中,12000rpm离心2分钟,倒掉废液。将吸附柱置于室温数分钟,以彻底晾干。
注意:这一步的目的是将吸附柱中残余乙醇去除,乙醇残留会影响后续的酶促反应(酶切、PCR等)。
12、将吸附柱置于一个新的离心管中,向吸附膜的中间部位悬空滴加50-100μl Buffer EB,室温放置数分钟,13000rpm离心1分钟,将质粒溶液收集到离心管中。-20℃保存质粒。
注意:
1)为了增加质粒的回收效率,可将得到的溶液重新加入到吸附柱中,室温放置数分钟,13000rpm离心1分钟,将质粒溶液收集到离心管中。
2)质粒拷贝数较低或>10 kb时,Buffer EB在65-70℃水浴预热,可以增加提取效率。
3)通常酵母质粒拷贝数很低,通过电泳或者分光光度计法都很难检测到。提取的质粒如果用于下一步实验,通常建议使用量为:用作PCR模板可使用1–5μl质粒,用于转化大肠杆菌可使用5–10μl质粒。
4)转化大肠杆菌时应使用商业化高转化效率的感受态细胞。
储存条件:室温(15~30℃)
北京百莱博科技有限公司专业生产供应销*(代"售")生物试剂、化学试剂、抗原抗体、血清血浆、Elisa试剂盒,更多试剂产品需求,欢迎来电咨询选购北京现货Y染色体人基因组DNA定量试剂盒库存。
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