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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
低温运输、-20℃保存
- 保质期:
一年
- 英文名:
SuperHyb Solution for Oligo
- 库存:
大量
- 供应商:
联迈生物
- 规格:
10 mL
本产品为即用型Oligo探针专用核酸杂交 液,既可用于DNA Oligo探针,也可以用 于RNA Oligo探针。本产品即开即用,非 常方便。
超级杂交液(Oligo探针)低温运输和-20℃保存、有效期一年。
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文献和实验大于 109 计数/分/μl。六、杂交Southern 杂交一般采取的是液-固杂交方式,即探针为液相,被杂交 DNA 为固相。杂交发生于一定条件的溶液(杂交液)中并需要一定的温度,可以用杂交瓶或杂交袋并使液体不断的在膜上流动。杂交液可以自制或从公司购买,不同的杂交液配方相差较大,杂交温度也不同。下面给出的为一杂交液配方:PEG 6000 10%;SDS 0.5%;6×SSC;50% 甲酰胺。 该杂交液的杂交温度为 42 ℃。1.预杂交NC 膜浸入 2× SSC 中 5 min,在杂交瓶中加入杂交液
1min; (4)每孔加入1ml预冷的通透液,置于4度冰箱,5min; (5)弃去通透液; (6)1X PBS洗细胞,3次,每次加入1ml。 3、检测细胞或组织中的RNA (1)用钻石笔在切片背面圈定用于原位杂交的范围; (2)杂交前,先将切片置于约200ul预杂交液中封闭,20-25度,20min; (3)同时,将杂交液预热于同上温度中; (4)在探针混合液稀释好待用前,不要将预杂交液从切片上弃去; (5)切片需置于湿盒中; (6)杂交1小时,所用温度与预杂交温度相同,每张切片
3.预杂交和杂交加约300μl预杂交液(配制法见附录)在每张载片上,室温孵育1h。如为鲱鱼精子DNA,在应用前须在沸水浴中加热10min,而对酵母tRNA可不用加热变性。 (1)应用预杂交液稀释地高辛标记的Oligo-探针,探针理想工作浓度根据于待测核苷酸含量和实践的结果。如对于检测大鼠垂体的前促黑激素(proopiomelanocortin,POMC)mRNA的Oligo –探针,其理想工作浓度为342ng/ml(0.342ng/μl)。 (2)预杂交后以2×SSC漂洗
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