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江蓝纯
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50次
本试剂盒采用了融胶液,可以使琼脂糖凝胶完全融化。同时采用了一种新型的离子交换柱,在特定条件下,使DNA能在离心过柱的瞬间,结合到DNA纯化柱上,在一定条件下又能将DNA充分洗脱,从而实现DNA的快速纯化。无需酚氯仿抽提,无需酒精沉淀,通常12个样品只需不足20分钟即可完成。
每个DNA纯化柱可以结合的DNA量的上限约为15微克。
适用于从DNA琼脂糖凝胶(agarose gel)电泳后割取的含有目的DNA的凝胶块中快速提取DNA。该目的DNA通常为PCR产物、质粒DNA酶切出来的DNA片段、超螺旋质粒DNA单酶切后的线性化产物和DNA连接产物等。
本试剂盒适用于纯化100bp-10kb DNA。长至30个碱基的引物均可被完全去除。
DNA回收效率通常为60-90%。接近100bp或10kb的DNA片段回收效率要略低一些,大于10kb的DNA回收效率迅速下降。另外如果样品中DNA含量特别低也会导致回收效率下降。
本试剂盒纯化所得DNA可直接用于酶切,连接,转化细菌,测序,PCR,杂交等后续操作。
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文献和实验不用试剂盒的凝胶回收(来自网络) 2008-01-09 15:41:32| 分类: 分子生物学实验室 | 标签: |字号大中小 订阅 . (1)用小针头在0.5ml离心管底部打洞,用玻璃棉塞住离心管底部。 (2)紫外透射检测仪下观察,用小刀片小心切出含有目的片段的凝胶。 (3)将凝胶条放入0.5ml离心管中,外套1.5ml离心管,8000rpm离心3分钟。用微量取液器吸取1.5ml离心管中的液体,转移到另一干净的1.5ml离心管中。然后重复离心,直到将凝胶条中的液体全部转移
1、在长波紫外灯下切下含有目标DNA的琼脂糖凝胶,用纸巾吸干凝胶表面的液体并切小。计算凝胶的重量,该重量作为一个凝胶体积(如如100mg=100ul)。2、根据凝胶的浓度,加DE-A 液凝胶浓度 DE-A溶液体积≤1.0% 3个凝胶体积≤1.5% 4 个凝胶体积≤2.0% 5 个凝胶体积混匀后于75℃加热,(低熔点琼脂糖凝胶于45oC加热),间断混合,直到凝胶熔化(6-8分钟)。3、加
相关专题 用常规的凝胶回收试剂盒(Gel Extraction Kit)来回收琼脂 糖凝胶电泳 里的DNA条带可谓最简便易行的实验室操作之一。只要割胶,加入溶胶Buffer保温溶胶,上柱离心,清洗一次,最后洗脱就可以了。不过如果实验偶尔需要跑聚丙烯酰胺 PAGE胶,回收DNA可就麻烦多了。电洗脱?要多麻烦就有多麻烦,回收率还低----PAGE上样量本来就不能多加,否则分辨率会降低,量少再加上回收率低做起来就更加不划算。本来好几
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