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pHook-3

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  • Ybscience
  • 中国/美国
  • YB-0217
  • 2025年07月07日
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    • 保质期

      6个月

    • 英文名

      pHook-3

    • 库存

      大量

    • 供应商

      钰博生物

    • 规格

      1ug/5ug

    pHook-3

    载体基本信息

    出品公司: Ybscience
    载体名称: pHOOK-3
    质粒类型: 哺乳动物表达载体;Capture-Tec系统;免疫磁珠
    高拷贝/低拷贝: 高拷贝
    克隆方法: 限制性内切酶,多克隆位点
    启动子: CMV
    载体大小: 6199 bp
    5' 测序引物及序列: CMV fwd 5’ CGCAAATGGGCGGTAGGCGTG3’
    3' 测序引物及序列: SV40pA rev 5'GAAATTTGTGATGCTATTGC'
    载体标签: IgK、HA tag (N-term);2XMyc tag (N-term)
    载体抗性: 氨苄青霉素
    筛选标记: 博来霉素
    克隆菌株: DH5α 
    宿主细胞(系): 哺乳动物细胞
    备注:
    pHOOK3载体可以用于:  
     1.       The effect of dominant, negative mutations of growth regulating proteins or toxic gene products
    2.       The acute effects of constitutive mutations
    3.       The effect of anti-sense RNA or ribozymes
    4.       Temporal events along a developmental or signaling pathway
    5.       Activation or inactivation of downstream genes using differential display
    6.       You may also use the pHook-3 System to isolate a homogeneous population of transfected cells for:
            a)        Immunoblot analysis of proteins
            b)        Isolation of DNA or RNA
            c)         Flow Cytometry

    See pHOOK-1
     
    稳定性: 稳表达
    组成型/诱导型: 组成型
    病毒/非病毒: 非病毒
     

    载体质粒图谱和多克隆位点信息

    pHOOK-3载体图谱



    pHOOK-3多克隆位点

    载体简介

    pHook-3载体使用方法——免疫磁珠法


    pHOOK-3使用流程



    pHOOK-3使用流程



    pHOOK-3使用流程


     

    载体序列

    LOCUS       Exported                6199 bp ds-DNA     circular SYN 13-AUG-2016
    KEYWORDS    pHOOK-3
    SOURCE      synthetic DNA construct
      ORGANISM  synthetic DNA construct
    REFERENCE   1  (bases 1 to 6199)
      AUTHORS   Biofeng Lab.
      TITLE     Direct Submission
    FEATURES             Location/Qualifiers
         source          1..6199
                         /organism="synthetic DNA construct"
                         /mol_type="other DNA"
         promoter        29..358
                         /note="SV40 promoter"
                         /note="SV40 enhancer and early promoter"
         rep_origin      209..344
                         /note="SV40 ori"
                         /note="SV40 origin of replication"
         promoter        787..834
                         /note="EM7 promoter"
                         /note="synthetic bacterial promoter "
         promoter        826..844
                         /note="T7 promoter"
                         /note="promoter for bacteriophage T7 RNA polymerase"
         CDS             854..1228
                         /codon_start=1
                         /gene="Sh ble from Streptoalloteichus hindustanus"
                         /product="antibiotic-binding protein"
                         /note="BleoR"
                         /note="confers resistance to bleomycin, phleomycin, and 
                         Zeocin(TM)"
                         /translation="MAKLTSAVPVLTARDVAGAVEFWTDRLGFSRDFVEDDFAGVVRDD
                         VTLFISAVQDQVVPDNTLAWVWVRGLDELYAEWSEVVSTNFRDASGPAMTEIGEQPWGR
                         EFALRDPAGNCVHFVAEEQD"
         polyA_signal    1292..1426
                         /note="SV40 poly(A) signal"
                         /note="SV40 polyadenylation signal"
         rep_origin      complement(1590..2178)
                         /direction=LEFT
                         /note="ori"
                         /note="high-copy-number ColE1/pMB1/pBR322/pUC origin of 
                         replication"
         enhancer        2263..2566
                         /note="CMV enhancer"
                         /note="human cytomegalovirus immediate early enhancer"
         promoter        2567..2770
                         /note="CMV promoter"
                         /note="human cytomegalovirus (CMV) immediate early 
                         promoter"
         promoter        2905..2923
                         /note="T7 promoter"
                         /note="promoter for bacteriophage T7 RNA polymerase"
         polyA_signal    3261..3309
                         /note="HSV TK poly(A) signal"
                         /note="herpes simplex virus thymidine kinase 
                         polyadenylation signal (Cole and Stacy, 1985)"
         promoter        4079..4341
                         /note="RSV promoter"
                         /note="Rous sarcoma virus enhancer/promoter"
         CDS             4366..4428
                         /codon_start=1
                         /product="leader sequence from mouse immunoglobulin kappa 
                         light chain"
                         /note="Ig-kappa leader"
                         /translation="METDTLLLWVLLLWVPGSTGD"
         CDS             4429..4455
                         /codon_start=1
                         /product="HA (human influenza hemagglutinin) epitope tag"
                         /note="HA"
                         /translation="YPYDVPDYA"
         CDS             5194..5223
                         /codon_start=1
                         /product="Myc (human c-Myc oncogene) epitope tag"
                         /note="Myc"
                         /translation="EQKLISEEDL"
         CDS             5239..5268
                         /codon_start=1
                         /product="Myc (human c-Myc oncogene) epitope tag"
                         /note="Myc"
                         /translation="EQKLISEEDL"
         promoter        complement(5460..5478)
                         /note="SP6 promoter"
                         /note="promoter for bacteriophage SP6 RNA polymerase"
         polyA_signal    5504..5728
                         /note="bGH poly(A) signal"
                         /note="bovine growth hormone polyadenylation signal"
         rep_origin      5774..3
                         /direction=RIGHT
                         /note="f1 ori"
                         /note="f1 bacteriophage origin of replication; arrow 
                         indicates direction of (+) strand synthesis"
    ORIGIN
            1 attatggtga ccggatccgc tgtggaatgt gtgtcagtta gggtgtggaa agtccccagg
           61 ctccccagca ggcagaagta tgcaaagcat gcatctcaat tagtcagcaa ccaggtgtgg
          121 aaagtcccca ggctccccag caggcagaag tatgcaaagc atgcatctca attagtcagc
          181 aaccatagtc ccgcccctaa ctccgcccat cccgccccta actccgccca gttccgccca
          241 ttctccgccc catggctgac taattttttt tatttatgca gaggccgagg ccgcctcggc
          301 ctctgagcta ttccagaagt agtgaggagg cttttttgga ggcctaggct tttgcaaaaa
          361 gctggctcga tctctccttc acgcgcccgc cgccctacct gaggccgcca tccacgccgg
          421 tgagtcgcgt tctgccgcct cccgcctgtg gtgcctcctg aactgcgtcc gccgtctagg
          481 taagtttaga gctcaggtcg agaccgggcc tttgtccggc gctcccttgg agcctaccta
          541 gactcagccg gctctccacg ctttgcctga ccctgcttgc tcaactctac gtctttgttt
          601 cgttttctgt tctgcgccgt tacaacttca aggtatgcgc tgggacctgg caggcggcat
          661 ctgggacccc taggaagggc ttgggggtcc tcgtgcccaa ggcagggaac atagtggtcc
          721 caggaagggg agcagaggca tcagggtgtc cactttgtct ccgcagctcc tgagcctgca
          781 gcacgtgttg acaattaatc atcggcatag tatatcggca tagtataata cgactcacta
          841 taggagggcc accatggcca agttgaccag tgccgttccg gtgctcaccg cgcgcgacgt
          901 cgccggagcg gtcgagttct ggaccgaccg gctcgggttc tcccgggact tcgtggagga
          961 cgacttcgcc ggtgtggtcc gggacgacgt gaccctgttc atcagcgcgg tccaggacca
         1021 ggtggtgccg gacaacaccc tggcctgggt gtgggtgcgc ggcctggacg agctgtacgc
         1081 cgagtggtcg gaggtcgtgt ccacgaactt ccgggacgcc tccgggccgg ccatgaccga
         1141 gatcggcgag cagccgtggg ggcgggagtt cgccctgcgc gacccggccg gcaactgcgt
         1201 gcacttcgtg gccgaggagc aggactgacc gacgccgacc aacaccgccg gtccgacggc
         1261 ggcccacggg tcccaggggg gtcgacctcg aaacttgttt attgcagctt ataatggtta
         1321 caaataaagc aatagcatca caaatttcac aaataaagca tttttttcac tgcattctag
         1381 ttgtggtttg tccaaactca tcaatgtatc ttatcatgtc tggatccctc ggagatcgat
         1441 ctgggcccat gcggccggcc gcggatcgat gctcactcaa aggcggtaat acggttatcc
         1501 acagaatcag gggataacgc aggaaagaac atgtgagcaa aaggccagca aaaggccagg
         1561 aaccgtaaaa aggccgcgtt gctggcgttt ttccataggc tccgcccccc tgacgagcat
         1621 cacaaaaatc gacgctcaag tcagaggtgg cgaaacccga caggactata aagataccag
         1681 gcgtttcccc ctggaagctc cctcgtgcgc tctcctgttc cgaccctgcc gcttaccgga
         1741 tacctgtccg cctttctccc ttcgggaagc gtggcgcttt ctcaatgctc acgctgtagg
         1801 tatctcagtt cggtgtaggt cgttcgctcc aagctgggct gtgtgcacga accccccgtt
         1861 cagcccgacc gctgcgcctt atccggtaac tatcgtcttg agtccaaccc ggtaagacac
         1921 gacttatcgc cactggcagc agccactggt aacaggatta gcagagcgag gtatgtaggc
         1981 ggtgctacag agttcttgaa gtggtggcct aactacggct acactagaag gacagtattt
         2041 ggtatctgcg ctctgctgaa gccagttacc ttcggaaaaa gagttggtag ctcttgatcc
         2101 ggcaaacaaa ccaccgctgg tagcggtggt ttttttgttt gcaagcagca gattacgcgc
         2161 agaaaaaaag gatctcaaga agatcctttg atcttttcta cggggtctga cgctcagtgg
         2221 aacgaaaact cacgttaagg gattttggtc atggctagag tccgttacat aacttacggt
         2281 aaatggcccg cctggctgac cgcccaacga cccccgccca ttgacgtcaa taatgacgta
         2341 tgttcccata gtaacgccaa tagggacttt ccattgacgt caatgggtgg agtatttacg
         2401 gtaaactgcc cacttggcag tacatcaagt gtatcatatg ccaagtacgc cccctattga
         2461 cgtcaatgac ggtaaatggc ccgcctggca ttatgcccag tacatgacct tatgggactt
         2521 tcctacttgg cagtacatct acgtattagt catcgctatt accatggtga tgcggttttg
         2581 gcagtacatc aatgggcgtg gatagcggtt tgactcacgg ggatttccaa gtctccaccc
         2641 cattgacgtc aatgggagtt tgttttggca ccaaaatcaa cgggactttc caaaatgtcg
         2701 taacaactcc gccccattga cgcaaatggg cggtaggcgt gtacggtggg aggtctatat
         2761 aagcagagct cgtttagtga accgtcagat cgcctggaga cgccatccac gctgttttga
         2821 cctccataga agacaccggg accgatccag cctccgcggc cgggaacggt gcattggaac
         2881 ggacctgcag cacgtgttga caattaatac gactcactat agggagaccc aagcttggta
         2941 ccagatcttt taaagctagc tctagagtac cgagctcgga tcccccgggc cagtgtgctg
         3001 gaagtaccga gctcgatcgt acccagcttg gaggttgcag ggtcgatgcg acgcaatcgt
         3061 ccgatccgga gccgggactg tcgggcgtac acaaatcgcc cgcagaagcg cggccgtctg
         3121 gaccgatggc tgtgtagaag tactcgccga tagtggaaac cgacgcccca gcactcgtcc
         3181 gagggcaaag gaatagggga gatgggggag gctaactgaa acacggaagg agacaatacc
         3241 ggaaggaacc cgcgctatga cggcaataaa aagacagaat aaaacgcacg ggtgttgggt
         3301 cgtttgttca taaacgcggg gttcggtccc agggctggca ctctgtcgat accccaccga
         3361 gaccccattg gggccaatac gcccgcgttt cttccttttc cccaccccac cccccaagtt
         3421 cgggtgaagg cccagggctc gcagccaacg tcggggcggc aggccctgcc atagccactg
         3481 gccccgtggg ttagggacgg ggtcccccat ggggaatggt ttatggttcg tgggggttat
         3541 tattttgggc gttgcgtggg gtctggtcca cgactggact gagcagacag acccatggtt
         3601 tttggatggc ctgggcatgg accgcatgta ctggcgcgac acgaacaccg ggcgtctgtg
         3661 gctgccaaac acccccgacc cccaaaaacc accgcgcgga tttctggcgc ccagtggtcg
         3721 accaattctc atgtttgaca gcttatcatc gcagatcctg agcttgtatg gtgcactctc
         3781 agtacaatct gctctgctgc cgcatagtta agccagtatc tgctccctgc ttgtgtgttg
         3841 gaggtcgctg agtagtgcgc gagcaaaatt taagctacaa caaggcaagg cttgaccgac
         3901 aattgcatga agaatctgct tagggttagg cgttttgcgc tgcttcgcga tgtacgggcc
         3961 agatatacgc gtatctgagg ggactagggt gtgtttaggc gcccagcggg gcttcggttg
         4021 tacgcggtta ggagtcccct caggatatag tagtttcgct tttgcatagg gagggggaaa
         4081 tgtagtctta tgcaatacac ttgtagtctt gcaacatggt aacgatgagt tagcaacatg
         4141 ccttacaagg agagaaaaag caccgtgcat gccgattggt ggaagtaagg tggtacgatc
         4201 gtgccttatt aggaaggcaa cagacaggtc tgacatggat tggacgaacc actgaattcc
         4261 gcattgcaga gataattgta tttaagtgcc tagctcgata caataaacgc catttgacca
         4321 ttcaccacat tggtgtgcac ctccaagctg ggtacgatat ccaccatgga gacagacaca
         4381 ctcctgctat gggtactgct gctctgggtt ccaggttcca ctggtgacta tccatatgat
         4441 gttccagatt atgctggggc ccagccggcc atggccgagg tcaagctgca ggagtcaggg
         4501 ggaggcttag tgcagcctgg agggtcccgg aaactctcct gtgcagcctc tggattcact
         4561 ttcagtagct ttggaatgca ctgggttcgt caggctccag agaaggggct ggagtgggtc
         4621 gcatatatta gtagtggcag tagtaccatc tactatgcag acacagtgaa gggacgattc
         4681 accatctcca gagacaatcc caagaacacc ctgttcctgc aaatgaccag tctaaggtct
         4741 gaggacacgg ncatgtatta ctgtgcaaga gattacgggg cttattgggg ccaagggacc
         4801 acggncaccg tctcctcagg tggaggcggc tcaggcggag gtggctctgg cggtggcgga
         4861 tcggacattg agctcaccca gtctccagca atcatgtctg catctccagg ggagagggtc
         4921 accatgacct gcagtgccag ttcaagtgta aggtacatga actggttcca acagaagtca
         4981 ggcacctccc ccaaaagatg gatttatgac acatccaaac tgtcttctgg agtccctgct
         5041 cgcttcagtg gcagtgggtc tgggacctct tactctctca caatcagcag catggaggct
         5101 gaagatgctg ccacttacta ctgccagcag tggagtagta acccactcac gttcggtgct
         5161 gggaccaagc tggagctgaa acgggcggcc gcagaacaaa aactcatctc agaagaggat
         5221 ctgaatgggg ccgtcgacga acaaaaactc atctcagaag aggatctgaa tgctgtgggc
         5281 caggacacgc aggaggtcat cgtggtgcca cactccttgc cctttaaggt ggtggtgatc
         5341 tcagccatcc tggccctggt ggtgctcacc atcatctccc ttatcatcct catcatgctt
         5401 tggcagaaga agccacgtta ggcggccgct cgagcatgca tctagctaga gggccctatt
         5461 ctatagtgtc acctaaatgc tagagctcgc tgatcagcct cgactgtgcc ttctagttgc
         5521 cagccatctg ttgtttgccc ctcccccgtg ccttccttga ccctggaagg tgccactccc
         5581 actgtccttt cctaataaaa tgaggaaatt gcatcgcatt gtctgagtag gtgtcattct
         5641 attctggggg gtggggtggg gcaggacagc aagggggagg attgggaaga caatagcagg
         5701 catgctgggg atgcggtggg ctctatggct tctgaggcgg aaagaaccag ctggggctct
         5761 agggggtatc cccacgcgcc ctgtagcggc gcattaagcg cggcgggtgt ggtggttacg
         5821 cgcagcgtga ccgctacact tgccagcgcc ctagcgcccg ctcctttcgc tttcttccct
         5881 tcctttctcg ccacgttcgc cggctttccc cgtcaagctc taaatcgggg catcccttta
         5941 gggttccgat ttagtgcttt acggcacctc gaccccaaaa aacttgatta gggtgatggt
         6001 tcacgtagtg ggccatcgcc ctgatagacg gtttttcgcc ctttgacgtt ggagtccacg
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